1、 ICS 65.020.20 B 22 DB51 四川省地方标准 DB51/T 18852014 玉米抗茎腐病性田间鉴定技术规程 2014 - 11 - 11 发布 2014 - 12 - 01 实施 四川省质量技术监督局 发布 DB51/T 18852014 I 目 次 前 言 . . II 1 范围 . . 1 2 术语和定义 . . 1 3 培养基和仪器 . . 1 4 鉴定方法 . . 1 5 抗病性评价 . . 2 附录 A（资料 性附录） 玉米茎腐病基本信息 . 4 附录 B（规范性附录） 玉米茎腐病抗性鉴定接种体制备 . 5 附录 C（资料性附录） 玉米茎腐病抗性鉴定调查表格 .
2、 6 DB51/T 18852014 II 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则进行编写。 本标准附录A、附录C为资料性附录，附录B为规范性附录。 本标准由四川省农业厅提出并归口。 本标准由四川省质量技术监督局批准。 本标准起草单位：四川省农业科学院植物保护研究所、四川省农业厅种子管理站。 本标准主要起草人：李晓、邹成佳、崔丽娜、张小飞、杨晓蓉、林勇。 DB51/T 18852014 1 玉米抗茎腐病性田间鉴定技术规程 1 范围 本标准规定了玉米抗茎腐病性鉴定圃设置、接种、病情调查与抗病性评价。 本标准适用于栽培玉米（ Zea mays L.）自交系、杂交种、群体、开放授粉品
3、种以及野生玉米和玉 米近缘种对玉米茎腐病抗性的田间鉴定和评价。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 人工接种鉴定 artificial i noculation identification 采用人工繁殖病原物，仿照自然情况，创造发病条件，根据接种对象的抗性表现和发病程度确定供 试品种抗性级别的一种方法。 2.2 接种体 inoculum 能够侵染玉米并引起玉米茎腐病的病原体。 3 培养基和仪器 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）、玉米籽粒培养基、高压灭菌锅、超净工作台、恒温培养箱。 4 鉴定方法 4.1 鉴定圃设置 4.1.1 鉴定圃选择 设置在茎腐病常发区。选择排灌方便、肥
4、力均匀的田块。 4.1.2 田间设置 鉴定小区行长4m5m，行距0.7m。每份参鉴材料种植1行，留苗2530株。 参鉴材料随机排列或顺 序排列，每50100份参鉴材料设1组已知抗病、感病对照材料。 4.1.3 田间管理 栽培管理 与大田生产相同。在玉米整个生长期不使用杀菌剂。 4.2 接种 DB51/T 18852014 2 4.2.1 接种体制备 详见附录B。 4.2.2 接种方法 在玉米播种时，采用穴播进行播种，每穴播3粒种子后，在其上撒30g带菌玉米粒接种体，将种子覆 盖，浇足水后盖土。 4.3 病情调查 4.3.1 调查时间及方法 在玉米乳熟后期进行调查。调查时按行以手指按捏植株地表上
5、方第二茎节，茎秆发生空、软者即为 发病株，茎节明显变褐也为发病株。计数每份鉴定材料的总株数和发病株数。 4.3.2 病情分级 各鉴定材料的病株率按式1进行计算。 100(%) = t i i N N R （1） 式中： Ri发病株率，% Ni发病株数，株 Nt调查总株数，株 4.3.3 病情分级标准 病情分级及相对应的植株发病率描述见表1。 表1 玉米抗茎腐病鉴定病情级别划分 病情级别 发病株率（%） 抗性水平 1 05.0 高抗 （HR） 3 5.110.0 抗 （R） 5 10.130.0 中抗 （MR） 7 30.140.0 感 （S） 9 40.1100 高感 （HS） 5 抗病性评价
6、 5.1 有效性判别 当鉴定圃中的感病对照材料发病病级达到7级或高感对照材料达到9级， 该批次抗茎腐病鉴定视为有 效，否则，鉴定结果无效。 5.2 抗性评价标准 DB51/T 18852014 3 依据鉴定材料的病级确定其对茎腐病的抗性水平，划分标准见表1。 5.3 重复评价 若鉴定材料初次鉴定时表现为中抗以上，应在次年进行重复鉴定。 5.4 抗性评价 对初次鉴定结果和重复鉴定结果进行比较，以记载的最高病情级别为最终鉴定结果，并依此结果对 鉴定材料进行抗病性评价。 DB51/T 18852014 4 A A 附 录 A （资料性附录） 玉米茎腐病基本信息 A.1 症状 病害发生在玉米茎秆基部节
7、位，由于植株茎秆最下部的茎节组织被破坏而引发全株性症状。病害发 生时的典型症状有两种： （1）青枯型茎腐病：玉米进入乳熟期后，全株叶片突然失去绿色，无光泽，12天内迅速变为青 灰色并干枯；果穗倒挂；茎基部13节外观变褐，内部松软，剖开后可见茎髓组织变褐，髓组织分解， 仅剩维管束组织；根系（侧根和支持根）变黑腐烂，失去支撑力。 （2）黄枯型茎腐病：首先植株下部叶片叶脉间出现黄色条纹状褪绿，叶片呈脱肥状发黄，症状逐 渐向植株上部发展，并在数日内形成全株叶片黄枯；果穗下垂；茎基部节位外观变褐、内部髓组织分解 而使茎节变软，剖开后残存的维管束组织变紫红色；植株根系红褐色并发生腐烂。由于茎腐病的发生，
8、植株极易倒伏，造成更严重的减产。 A.2 病原学名 引起玉米茎腐病的病原菌有轮枝镰孢菌、禾谷镰孢菌、腐霉，四川地区主要为轮枝镰孢菌和禾谷镰 孢菌。 轮枝镰孢菌：有性阶段为子囊菌亚门 藤仓 赤霉菌（ Gibberella fujikuroi (Sawada) Wollenw） ， 无性态为轮枝镰孢（ Fusarium vertivillioid(Sacc.) Nirenberg）。 禾谷镰孢菌： 有性阶段为 子囊菌亚门 玉蜀黍赤霉 ( Gibberella zeae （Schwein） Petch.) ，无性 态为禾谷镰孢 （ Fusarium graminearum Schwabe）。 DB5
9、1/T 18852014 5 B B 附 录 B （规范性附录） 玉米茎腐病抗性鉴定接种体制备 B.1 培养基配方 B.1.1 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA） 马铃薯200g，葡萄糖15g，琼脂粉1 8g，水1000mL。 B.1.2 玉米籽粒培养基 玉米粒浸泡2小时，然后煮30min40min ，装入三角瓶中，每瓶装至三角瓶2/3即可，于121下灭 菌1h，冷却后备用。 B.2 接种体制备 B.2.1 病原菌活化 将在PDA上保存的四川优势强致病轮枝镰孢菌菌株和禾谷镰 孢菌菌株接种于PDA培养基上，培养2 3d后备用。 B.2.2 接种体制备 将在PDA培养基上培养2d3d 的菌落边缘打菌饼，接种于装有经高压灭 菌玉米粒的三角瓶中，每瓶 玉米粒均匀接种菌饼3个，在2325下黑暗培养。培养7d10d后，菌丝布满玉米粒即可。在接种前 从三角瓶中倒出玉米粒，将轮枝镰孢菌和禾谷镰孢菌两种菌的玉米粒以1:1的比例混合均匀。 DB51/T 18852014 6 C C 附 录 C （资料性附录） 玉米茎腐病抗性鉴定调查表格 表 年玉米抗茎腐病鉴定结果记载表 编 号 品种 /种质名称 来 源 发病率 抗性评价 注 1: 鉴定地点 注 2: 接种病原菌分离物编号 注 3: 接种日期 调查日期 鉴定单位： 鉴定人： _ DB51/T 18852014
