1、 ICS 65.020.30 B 41 DB51 四川省地方标准 DB51/T 18502014 猪圆环病毒病诊断技术规范 2014 - 09 - 19 发布 2014 - 10 - 01 实施 四川省质量技术监督局 发布 DB51/T 18502014 I 目 次 前 言 . . II 1 范围 . . 1 2 规范性引用文件 . . 1 3 术语和定义 . . 1 4 临床症状 及病理学变化 . . 1 5 实验室诊断 . . 2 6 结果判定 . . 3 DB51/T 18502014 II 前 言 本标准附录A为资料性附录。 本标准由四川省农业厅提出并归口。 本标准由四川省质量技术监督
2、局批准。 本标准由四川省动物疫病预防控制中心负责起草。 本标准主要起草人:陈斌、陈弟诗、李金海、裴超信、邢坤、张毅、潘梦、张睿、韩帅、张代芬、 王英。 DB51/T 18502014 1 猪圆环病毒病诊断技术规范 1 范围 本规范规定了猪圆环病毒病的临床症状及病理学变化、实验室诊断技术要求。 本规范适用于对猪圆环病毒病开展监测、诊断和流行病学调查。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 21674 猪圆环病毒聚合酶链反应试验方法 SN/T 2
3、708 猪圆环病毒病检疫技术规范 高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样本运输包装规范( 2005农业部公告第 503号) 兽医实验室生物安全技术管理规范( 2003农业部公告第 302号) 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准 3.1 猪圆环病毒(Porcine circ ovirus,PCV) 属于圆环病毒科圆环病毒属成员,无囊膜,含 有共价闭合的单股环状负链DNA,是迄今发现的一种 最小的动物病毒。分为对猪无致病性的PCV1型和对猪有致病性的PCV2型。 3.2 猪圆环病毒病 以圆环病毒2型为主要病原,主要引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)和猪皮炎与肾病综合征 (PDNS),
4、以及繁殖障碍、先天性振颤(CT)、猪呼吸道疾病综合征(PRDC)、增生性坏死性肺炎(PNP)、 肠炎等病症,是引起猪免疫障碍的重要传染病。 4 临床症状及病理学变化 4.1 临床症状 4.1.1 断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS) 主要发生在5周16周龄的猪,断奶前生长发育良好,断奶后同窝或不同窝仔猪有被毛粗糙,发育 迟缓,进行性消瘦;有时出现呼吸道症状,如 呼吸困难、咳嗽、喘气 ;有时腹泻;有时出现贫血皮肤苍 白或可视黏膜黄疸;有时出现突然死亡。 DB51/T 18502014 2 4.1.2 猪皮炎与肾病综合征(PDNS) 多发生于12周14周龄架子猪,皮肤初期潮红出现红色斑点或丘疹,后
5、发展为圆形或不规则隆起, 呈红色、紫红色,继而由中心部位变黑并逐渐扩展到整个丘疹形成黑色结痂。皮肤病主要发生在背部、 臀部和四肢,并可延伸至下腹、腰部和耳部,严重的可覆盖全身各处。轻者体温正常,常自行康复,严 重者表现厌食、跛行、发热、呼吸困难、结膜炎,腹泻,消瘦等症状。 4.1.3 先天性振颤(CT) 仔猪出生或几小时后出现震颤,共济失调。同一窝仔猪中有个别发病,也有全部发病,但颤抖轻重 程度各有差异。躺卧或睡眠时颤抖较轻或停止,外部刺激如突然声响或寒冷等能引发或增强颤抖。 4.1.4 繁殖障碍 妊娠后期流产和死胎;母猪怀孕不同阶段出现流产、早产,产出木乃伊胎或弱仔;哺乳母猪在仔猪 断奶后长
6、时间不发情,或虽然发情,却屡配不孕。 4.2 病理学诊断 4.2.1 断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS) 浅表淋巴结异常肿胀,特别是腹股沟浅淋巴结,切面为均匀的白色;肺部有灰褐色炎症和肿胀,呈 弥漫性病变,比重增加,质地坚硬或似橡皮;肝脏肝变硬、发暗,或者呈浅黄到橘黄色外观,萎缩,肝 小叶间结缔组织增生;肾脏水肿,苍白,被膜下有坏死灶;脾脏显著肿大;胰、小肠和结肠常有肿大及 坏死病变。 4.2.2 皮炎肾衰综合症(PDNS) 肾脏肿胀、苍白及肾皮质有大面积出血点或斑块;全身坏死性脉管炎,坏死性及纤维素性肾小球肾 炎;淋巴结水肿,切面苍白。 4.2.3 繁殖障碍 胎儿明显心肌肥大,心肌损伤,表
7、现为大面积纤维组织增生或坏死性心肌炎。 5 实验室诊断 5.1 样品采集 无菌采集病猪的扁桃体、全血2mL-4mL或新鲜病死猪的扁桃体、淋巴结、脾脏、肺脏等组织样品,4 保存,立即送检。送检猪全血,分离血清,血清应新鲜、透明、不溶血、无污染,密装于灭菌1.5mL 离心管内,4或-20保存待检。 5.2 病原学检测 5.2.1 聚合酶链式反应检测(PCR) 对病猪的扁桃体、全血或新鲜病死猪的扁桃体、淋巴结、脾脏、肺脏等组织样品进行检测,具体操 作方法按GB/T 21674相关规定执行。 5.2.2 实时定量荧光 PCR 检测(r eal-time PCR) DB51/T 18502014 3 对病猪的扁桃体、全血或新鲜病死猪的扁桃体、淋巴结、脾脏、肺脏等组织样品进行检测,具体操 作方法按SN/T 2708Z中4.4的相关规定执行。 5.3 抗体检测 对血清样品进行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体,具体操作方法参见附录A。 6 结果判定 6.1 疑似病例 猪只临床症状符合4.1中前3项任意一项者,病理变化符合4.2任意一项;或猪只临床症状符合4.1.4 者,胎儿病变符合4.2.3者,可判定为猪圆环病毒病疑似病例。 6.2 确诊病例 猪圆环病毒病疑似病例,经病原学任意一项检测为阳性,或者非免疫猪群抗体检测为阳性,可判定 为猪圆环病毒病。 _ DB51/T 18502014