1、ICS 01.040.65B 40 DB50重 庆 市 地 方 标 准DB50/T 946 2019人 间 布 鲁 氏 菌 病 疫 情 处 置 技 术 规 范 Technical specification for epidemic disposal of human brucellosis 2019 -11- 07 发 布 2020- 02 -07 实 施重 庆 市 市 场 监 督 管 理 局 发 布 DB50/T 9462019 I 目 次前 言 .II1 范 围 .12 规 范 性 引 用 文 件 .13 术 语 和 定 义 .14 病 例 定 义 .15 疫 情 /突 发 公 共 卫
2、生 事 件 报 告 和 分 级 标 准 . 26 疫 情 处 置 .2附 录 A（ 资 料 性 附 录 ） 布 鲁 氏 菌 病 概 述 .4 附 录 B（ 资 料 性 附 录 ） 人 间 布 鲁 氏 菌 病 个 案 调 查 表 .6附 录 C（ 资 料 性 附 录 ） 人 间 布 鲁 氏 菌 病 采 样 送 检 单 .9附 录 D（ 资 料 性 附 录 ） 人 间 布 鲁 氏 菌 病 实 验 室 检 测 .10 DB50/T 9462019 II 前 言本 标 准 按 照 GB/T 1.1-2009给 出 的 规 则 起 草 。本 标 准 由 重 庆 市 卫 生 健 康 委 员 会 提 出 并
3、 归 口 。本 标 准 起 草 单 位 ： 重 庆 市 疾 病 预 防 控 制 中 心 。本 标 准 主 要 起 草 人 ： 向 旭 、 周 爽 、 肖 达 勇 、 黄 文 利 、 赵 波 、 段 刚 。 DB50/T 9462019 1 人 间 布 鲁 氏 菌 病 疫 情 处 置 技 术 规 范1 范 围本 标 准 规 定 了 人 间 布 鲁 氏 菌 病 例 定 义 、 疫 情 /突 发 公 共 卫 生 事 件 报 告 和 分 级 标 准 、 疫 情 处 置 的 内 容 。本 标 准 适 用 于 各 级 各 类 医 疗 机 构 、 疾 病 预 防 控 制 机 构 、 卫 生 检 疫 机 构
4、执 行 职 务 的 医 务 人 员 对 人 间 布鲁 氏 菌 病 疫 情 的 报 告 和 处 置 。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 仅 所 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文件 。 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。 WS 269-2019 布 鲁 氏 菌 病 诊 断3 术 语 和 定 义下 列 术 语 及 定 义 适 用 于 本 文 件 。3.1 人 间 布 鲁 氏 菌
5、 病 定 义人 间 布 鲁 氏 菌 病 （ 以 下 简 称 布 病 ） 是 由 布 鲁 氏 菌 属 的 细 菌 侵 入 机 体 引 起 的 人 兽 共 患 的 传 染 -变 态 反应 性 疾 病 ， 是 中 华 人 民 共 和 国 传 染 病 防 治 法 规 定 的 乙 类 传 染 病 ， 也 是 中 华 人 民 共 和 国 职 业 病 防 治法 规 定 的 生 物 因 素 所 致 的 职 业 病 。3.2 新 发 疫 情既 往 5年 内 ， 无 本 地 布 病 疫 情 的 区 县 （ 自 治 县 ， 以 下 简 称 区 县 ） ， 发 生 1例 及 以 上 在 本 地 感 染 病 例 。3.
6、3 聚 集 疫 情3周 内 ， 局 部 地 区 或 同 一 牲 畜 饲 养 场 、 交 易 场 、 屠 宰 加 工 场 内 发 生 2例 病 人 （ 隐 形 感 染 者 ） ， 或 2例以 上 隐 形 感 染 者 。3.4 暴 发 疫 情3周 内 ， 局 部 地 区 或 同 一 牲 畜 饲 养 场 、 交 易 场 、 屠 宰 加 工 场 内 发 生 3例 及 以 上 病 人 。4 病 例 定 义 DB50/T 9462019 2 4.1 疑 似 病 例在 一 起 布 病 聚 集 或 暴 发 疫 情 中 ， 出 现 下 列 之 一 者 且 排 除 其 他 明 确 诊 断 ：a) 出 现 持 续
7、数 日 乃 至 数 周 发 热 （ 包 括 低 热 ） ， 多 汗 、 肌 肉 和 关 节 疼 痛 等 ；b) 骨 关 节 、 肌 肉 疼 痛 、 头 痛 、 多 汗 、 乏 力 ， 伴 或 不 伴 肝 /脾 /淋 巴 结 /睾 丸 肿 大 。具 体 临 床 表 现 参 见 附 录 A。4.2 临 床 诊 断 病 例符 合 疑 似 病 例 定 义 ， 出 现 虎 红 平 板 初 筛 实 验 或 平 板 凝 集 实 验 阳 性 或 可 疑 。4.3 确 诊 病 例疑 似 和 临 床 诊 断 病 例 符 合 以 下 条 件 之 一 者 ：a) 疑 似 病 例 +经 血 清 学 检 测 ， 标 准
8、试 管 凝 集 实 验 （ SAT） 滴 度 1:100+及 以 上 者 ； b) 细 菌 分 离 培 养 从 病 人 血 液 、 骨 髓 、 其 他 体 液 及 排 泄 物 中 分 离 到 布 鲁 氏 菌 。4.4 隐 性 感 染 者标 准 试 管 凝 集 实 验 （ SAT） 滴 度 1:100+及 以 上 者 ， 但 无 临 床 表 现 者 。5 疫 情 /突 发 公 共 卫 生 事 件 报 告 和 分 级 标 准5.1 个 案 报 告发 现 疑 似 、 临 床 诊 断 或 确 诊 的 布 病 病 例 ， 应 在 诊 断 后 24h内 填 写 传 染 病 报 告 卡 并 进 行 网 络
9、直 报 。5.2 突 发 公 共 卫 生 事 件 报 告 标 准新 发 疫 情 、 聚 集 疫 情 和 暴 发 疫 情 。 5.3 分 级 标 准5.3.1 级 （ 一 般 事 件 ）3周 内 ， 在 1个 区 县 局 部 地 区 或 同 一 牲 畜 饲 养 场 、 交 易 场 、 屠 宰 加 工 场 内 ， 发 生 5例 及 以 上 本 地 感 染病 例 。5.3.2 级 （ 较 大 事 件 ）3周 内 ， 在 1个 区 县 （ 自 治 县 ） ， 同 一 事 件 累 计 发 病 数 20例 以 上 。5.3.3 级 （ 重 大 事 件 ）3周 内 ， 在 1个 区 县 （ 自 治 县 ）
10、， 同 一 事 件 累 计 发 病 数 50例 以 上 ； 或 2个 及 以 上 区 县 发 生 有 关 联 的 级 事 件 。 6 疫 情 处 置6.1 基 本 原 则 DB50/T 9462019 3 疫 情 发 生 后 ， 根 据 分 级 响 应 程 序 ， 按 照 属 地 管 理 原 则 ， 当 地 政 府 组 织 卫 生 健 康 、 农 业 农 村 、 市 场 监管 等 部 门 成 立 联 合 调 查 组 ， 按 照 职 能 职 责 ， 开 展 联 防 联 控 。6.2 现 场 流 行 病 学 调 查6.2.1 疫 情 发 生 后 ， 疾 病 预 防 控 制 机 构 及 时 协 同
11、联 合 调 查 组 的 其 他 成 员 开 展 流 行 病 学 调 查 ， 查 明 传 染源 、 传 播 途 径 、 疫 情 波 及 的 范 围 、 危 险 因 素 。6.2.2 对 流 行 病 学 暴 露 的 可 疑 人 群 应 开 展 个 案 调 查 （ 个 案 调 查 表 附 录 B） 、 采 样 送 检 （ 采 样 送 检 表 附录 C） 、 核 实 诊 断 。 有 流 行 病 学 暴 露 的 可 疑 人 员 均 为 调 查 目 标 人 群 ， 主 要 包 括 以 下 三 类 ：a) 有 养 殖 行 为 的 人 员 ， 如 阳 性 养 殖 户 及 家 属 、 1 年 内 与 该 阳 性
12、 养 殖 户 有 流 行 病 学 关 联 的 养 殖 户 及家 属 ；b) 无 养 殖 行 为 的 人 员 ， 如 销 售 、 屠 宰 、 不 安 全 食 用 、 暴 露 于 可 疑 污 染 的 环 境 或 场 所 等 人 员 ；c) 现 场 流 行 病 学 调 查 人 员 判 定 的 其 他 可 疑 人 员 。 6.3 实 验 室 检 测流 行 病 学 调 查 时 判 定 的 可 疑 人 员 应 采 集 样 检 测 。 样 品 采 集 、 登 记 、 保 存 、 运 输 、 实 验 室 检 测 参 照 附录 D。6.4 现 场 处 置6.4.1 控 制 和 清 除 传 染 源 、 切 断 传
13、 播 途 径对 发 现 的 疑 似 动 物 疫 情 ， 依 据 农 业 农 村 部 布 鲁 氏 菌 病 防 治 技 术 规 范 病 死 及 病 害 动 物 无 害 化 处理 技 术 规 范 进 行 处 置 。6.4.2 保 护 易 感 人 群及 时 宣 传 人 、 畜 布 病 临 床 表 现 和 危 害 等 相 关 知 识 ， 提 高 健 康 素 养 。 对 高 危 人 群 ， 依 据 工 作 性 质 的 不同 ， 采 取 口 罩 、 眼 罩 、 胶 鞋 或 胶 靴 、 手 套 等 防 护 用 品 进 行 有 效 的 防 护 。 6.5 病 例 的 管 理6.5.1 病 例 无 需 隔 离 ，
14、 按 布 鲁 氏 菌 病 诊 疗 指 南 （ 试 行 ） 给 予 及 时 规 范 的 治 疗 ， 避 免 慢 性 化 。6.5.2 疫 情 所 在 区 县 ， 应 指 定 定 点 医 疗 机 构 ， 成 立 布 病 治 疗 临 床 专 家 组 ； 指 定 乡 镇 卫 生 院 或 社 区 卫 生服 务 中 心 负 责 病 例 的 随 访 。6.6 评 估疫 情 处 置 过 程 中 ， 适 时 开 展 动 态 评 估 ， 研 判 疫 情 风 险 和 评 估 防 治 效 果 ， 适 时 调 整 防 控 策 略 。6.7 现 场 反 馈在 疫 情 处 置 过 程 中 至 终 止 响 应 期 间 ， 应
15、 开 展 一 次 或 多 次 ， 对 疫 情 进 展 ， 处 置 情 况 、 发 生 原 因 、 危 险因 素 、 部 门 协 作 、 需 要 解 决 的 问 题 等 进 行 反 馈 ， 提 出 阶 段 性 、 区 域 性 公 共 卫 生 防 控 策 略 。6.8 终 止 响 应 各 项 综 合 性 措 施 落 实 到 位 ， 病 人 得 到 及 时 规 范 治 疗 ， 经 过 3周 监 测 ， 无 新 病 例 或 感 染 者 出 现 ， 经 过专 家 评 估 ， 可 终 止 响 应 ， 并 在 1周 内 提 交 结 案 报 告 。 DB50/T 9462019 4 AA附 录 A（ 资 料
16、性 附 录 ）布 鲁 氏 菌 病 概 述A.1 病 原 学A.1.1 布 鲁 氏 菌 是 一 种 需 氧 短 小 杆 菌 ， 兼 性 细 胞 内 寄 生 ， 革 兰 染 色 阴 性 ， 最 适 生 长 温 度 为 35-37 。 布鲁 氏 菌 菌 株 分 6种 ： 牛 种 、 羊 种 、 猪 种 、 沙 林 鼠 种 、 绵 羊 附 睾 种 和 犬 种 ； 从 海 洋 哺 乳 动 物 中 至 少 分 离 到 3种 ， 被 认 为 是 新 布 氏 菌 。 羊 种 侵 袭 力 、 致 病 力 较 强 ， 易 引 起 暴 发 流 行 ， 临 床 典 型 ； 牛 种 侵 袭 力 较 强 ， 毒力 较 弱
17、 ， 感 染 率 高 ， 发 病 率 低 ， 临 床 不 典 型 ； 猪 种 猪 1和 猪 3型 致 病 ， 毒 力 介 于 羊 和 牛 种 之 间 ， 致 病 力 强 于 牛 种 ， 感 染 率 高 ， 发 病 率 低 ， 临 床 不 典 型 。A.1.2 布 鲁 氏 菌 喜 低 温 干 燥 环 境 ， 生 存 时 间 较 长 ， 有 较 高 的 抗 灭 活 能 力 ； 对 湿 热 、 紫 外 线 、 常 用 消 毒剂 和 抗 生 素 比 较 敏 感 。 该 菌 在 浓 度 为 3%的 来 苏 尔 生 存 时 间 为 1分 钟 内 、 浓 度 为 0.2%-2.5%的 漂 白 粉 生 存 时
18、间 为 2分 钟 内 。A.2 流 行 病 学A.2.1 传 染 源 ： 饲 养 动 物 羊 、 牛 和 猪 是 主 要 的 传 染 源 ， 其 次 为 鹿 、 犬 及 其 他 家 畜 和 啮 齿 类 动 物 ； 野 生动 物 野 羊 、 野 猪 、 野 牛 、 狼 、 野 兔 传 播 给 人 较 为 罕 见 ； 人 作 为 传 染 源 的 意 义 不 大 ， 人 体 通 过 献 血 和 器 官移 植 是 非 严 格 意 义 的 传 染 源 ， 乳 汁 、 脓 液 、 尿 、 阴 道 分 泌 物 等 传 播 罕 见 ， 未 发 现 有 确 切 的 证 据 证 明 通 过病 人 而 传 染 引
19、起 的 病 例 。A.2.2 传 播 途 径 ： 主 要 有 3种 传 播 途 径 ： 经 皮 肤 黏 膜 直 接 接 触 感 染 、 这 是 最 主 要 的 方 式 ； 经 消 化 道 感 染 ， 主 要 通 过 食 物 或 饮 水 ， 布 鲁 氏 菌 经 口 腔 、 食 道 黏 膜 感 染 ； 经 呼 吸 道 感 染 ； 常 见 于 吸 入 布 鲁 氏 菌 的 飞 沫 、尘 埃 ； 也 可 通 过 气 溶 胶 传 播 ， 且 感 染 剂 量 较 低 （ 10个 100个 菌 ） 。A.2.3 易 感 人 群 ： 全 人 群 均 易 感 ， 不 同 人 群 感 染 率 高 低 主 要 取 决
20、 于 接 触 牲 畜 等 传 染 源 机 会 和 时 间 。 感染 后 有 一 定 的 免 疫 力 ， 但 不 牢 固 ， 持 续 时 间 1 2年 ， 可 反 复 感 染 。A.2.4 流 行 特 征 ： 全 年 均 可 发 病 ， 羊 种 布 鲁 氏 菌 有 明 显 的 季 节 性 4月 -5月 发 病 高 峰 ， 牛 种 夏 季 有 季 节 性的 小 高 峰 ， 猪 种 季 节 性 不 明 显 。 有 明 显 的 职 业 性 ， 牧 民 、 兽 医 和 毛 皮 工 人 感 染 率 比 一 般 人 群 高 ； 无 性 别和 年 龄 差 异 ， 主 要 取 决 于 接 触 机 会 。A.3
21、临 床 表 现潜 伏 期 一 般 1周 3周 ， 平 均 2周 ， 最 短 3天 ， 最 长 可 达 1年 ， 或 更 长 。 临 床 表 现 出 现 持 续 数 日 乃 至 数周 发 热 （ 包 括 低 热 ） ， 多 汗 ， 肌 肉 和 关 节 疼 痛 ， 乏 力 ， 头 痛 ， 兼 或 肝 、 脾 、 淋 巴 结 和 睾 丸 肿 大 等 可 疑 症 状 及 体 征 ； 白 细 胞 正 常 或 偏 低 、 贫 血 ， 血 沉 增 快 。 病 人 的 临 床 表 现 总 体 呈 现 多 样 化 ， 无 特 异 性 。 病 程 分急 性 期 、 亚 急 性 期 、 慢 性 期 。 具 有 上
22、述 临 床 表 现 ， 病 程 在 3个 月 以 内 为 急 性 期 ； 病 程 在 3-6个 月 为 亚 急 性期 ； 病 程 超 过 6个 月 仍 未 痊 愈 为 慢 性 期 。A.4 治 疗 原 则 和 预 后 DB50/T 9462019 5 治 疗 原 则 为 ： “ 早 期 、 联 合 、 足 量 、 足 疗 程 用 药 ” ， 必 要 时 延 长 疗 程 ， 以 防 止 复 发 及 慢 性 化 。 因 为药 物 副 作 用 的 存 在 ， 治 疗 一 定 要 在 医 生 的 指 导 下 进 行 ， 通 常 需 要 定 期 复 查 肝 功 。 约 5% 15%的 患 者 存 在复
23、发 ， 主 要 原 因 为 抗 生 素 选 择 不 当 、 治 疗 时 间 缩 短 、 依 从 性 不 良 或 局 部 感 染 病 灶 。 本 病 预 后 良 好 ， 多 于3月 6月 康 复 ， 治 疗 失 败 通 常 与 布 鲁 氏 菌 脊 柱 炎 有 关 ， 未 经 药 物 治 疗 病 死 率 2% 3%， 多 于 心 内 膜 炎 和 脑膜 炎 相 关 。 DB50/T 9462019 6 BB附 录 B（ 资 料 性 附 录 ）人 间 布 鲁 氏 菌 病 个 案 调 查 表国 标 码 病 例 编 码 一 、 患 者 基 本 信 息1 患 者 姓 名 ： （ 患 儿 家 长 姓 名 ：
24、） 电 话 ： 。2.性 别 ： 男 女 。3.出 生 日 期 ： 年 月 日 （ 如 日 期 不 详 ， 实 足 年 龄 ： 岁 月 天 ）4.职 业 ： 幼 托 儿 童 散 居 儿 童 学 生 教 师 保 育 保 姆 饮 食 从 业 人 员 商 业 服 务 医 务 人 员 工 人 民 工 农 民 牧 民 渔 民 干 部 职 离 退 人 员 家 务 待 业 其 他 ，请 注 明 ： 不 详 5.从 事 感 染 布 病 的 高 风 险 职 业 ： 饲 养 放 牧 屠 宰 工 皮 毛 加 工 工 人 乳 肉 加 工 销 售 人 员 畜 产 品 收 购 、 贩 运 人 员 兽 医 实 验 室 人
25、员 其 他 ， ： （ 10） 不 从 事 6.现 住 址 ： 省 （ 市 ） 县 （ 区 ） 乡 （ 街 道 ） 村 组 号7.发 病 日 期 ： 年 月 日8.诊 断 日 期 ： 年 月 日9.报 告 日 期 ： 年 月 日10.病 例 分 类 :（ 1） 疑 似 病 例 （ 2） 临 床 诊 断 病 例 （ 3） 确 诊 病 例 隐 性 感 染 病 程 分 期 ： （ 1） 急 性 期 （ 2） 亚 急 性 期 （ 3） 慢 性 期 11.是 否 住 院 治 疗 ： 是 否 ； 住 院 时 间 天 所 住 医 院 名 称 ：二 暴 露 史 调 查(一 )有 否 牲 畜 及 其 制 品 接
26、 触 史 ： 是 否 不 清 楚 （ 如 “ 否 、 不 清 楚 ” 跳 至 题 目 2） 1 接 触 牲 畜 种 类 （ 可 多 选 ） ： 牛 羊 猪 狗 其 他2 主 要 接 触 方 式 ： 饲 养 放 牧 屠 宰 产 品 （ 肉 、 奶 、 皮 毛 等 ） 加 工 贩 运 交 易 兽 医 实 验 室 接 种 疫 苗 ， 型 号 ： 其 他3 可 能 感 染 地 点 ： 在 家 工 作 场 所 （ 如 屠 宰 厂 、 养 殖 厂 、 皮 毛 加 工 厂 等 ） ， 请 注 明 工 作 场 所 具 体名 称 和 地 址 ： 其 他 ， 请 注 明 ：4 可 能 传 染 源 去 向 ：5 是
27、 否 有 共 同 接 触 人 员 ： 是 否 不 清 楚 （ 如 选 “ 否 ” 或 “ 不 清 楚 ” 跳 至 题 目 2）6 共 同 接 触 人 员姓 名 联 系 方 式 住 址 （ 二 ） 您 是 否 食 用 过 未 煮 熟 的 牛 羊 肉 、 奶 ， 或 食 用 过 生 奶 及 奶 制 品 ？ DB50/T 9462019 7 是 （ 深 入 追 问 食 物 来 源 ） 否 不 清 楚 （ 如 选 “ 否 ” 或 “ 不 清 楚 ” 跳 至 题 目 （ 三 ）1.具 体 食 用 了 什 么 ：2.牌 子 、 生 产 厂 家 、 生 产 批 次 等 ：3.食 用 时 间 及 购 买 时
28、间 等 ：4.剩 余 食 物 去 向 ：5.是 否 有 同 食 人 员 ： 是 否 不 清 楚 （ 如 选 “ 否 ” 或 “ 不 清 楚 ” 跳 至 题 目 3）6.同 食 人 员姓 名 联 系 方 式 住 址 （ 三 ） 你 是 否 到 过 布 病 流 行 区 ？ 是 否 不 清 楚三 、 临 床 表 现 ：（ 一 ） 症 状 症 状 体 征 ：1 发 热 有 无 2 发 热 持 续 （ 天 ） 体 温 最 高 3 多 汗 有 无 4 肌 肉 、 关 节 酸 痛 有 无 5 乏 力 有 无 6 肝 肿 大 有 无 7 脾 肿 大 有 无 8 淋 巴 结 肿 有 无 9 睾 丸 肿 大 有
29、无 10 并 发 症 ： 有 ， 请 注 明 ： _ 无 （ 二 ） 实 验 室 检 查 ：1 初 筛 试 验 ：虎 红 平 板 凝 集 试 验 ： 阳 性 阴 性 未 做 胶 体 金 免 疫 层 析 试 验 ： 阳 性 阴 性 未 做 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 ： 阳 性 阴 性 未 做 布 鲁 氏 菌 培 养 物 涂 片 革 兰 染 色 检 出 疑 似 布 鲁 氏 菌 ： 是 否 未 做 2 确 诊 试 验 ：试 管 凝 集 试 验 ： 阳 性 ， 滴 度 1: + 阴 性 未 做 Coomb s 试 验 ： 阳 性 ， 滴 度 1: + 阴 性 未 做 补 体 结 合 试 验 ：
30、阳 性 ， 滴 度 1: + 阴 性 未 做 分 离 出 布 鲁 氏 菌 ： 是 否 未 做 治 疗 :（ 三 ） 抗 生 素 治 疗 有 无 （ 四 ） 转 归 ： DB50/T 9462019 8 痊 愈 好 转 未 愈 死 亡 （ 年 月 日 死 于 ） 四 、 调 查 小 结 ： （ 简 述 基 本 情 况 、 症 状 体 征 与 流 行 病 学 调 查 ， 诊 断 结 果 。 ）调 查 者 单 位 ： 调 查 者 ：审 查 者 ： 调 查 时 间 ： 年 月 日 DB50/T 9462019 9 CC附 录 C（ 资 料 性 附 录 ）人 间 布 鲁 氏 菌 病 采 样 送 检 单姓
31、 名 性 别 年 龄 联 系电 话 接 触史 * 发 病日 期 采 集日 期 送 检日 期 样 本 名称 * 采 样 单位 备 注 注 ： *接 触 史 一 栏 直 接 填 写 序 号 ： 1 家 畜 2 畜 产 品 3 布 氏 菌 培 养 物 4 生 活 在 疫 区 6 布 氏 菌 疫 苗 。*样 本 名 称 填 写 血 、 关 节 液 、 脑 脊 液 等单 位 负 责 人 ： 填 表 人 ： 填 表 时 间 ： 年 月 日送 检 单 位 ： 重 庆 市 县 (区 ) DB50/T 9462019 10 DD附 录 D（ 资 料 性 附 录 ）人 间 布 鲁 氏 菌 病 实 验 室 检 测D
32、.1 布 鲁 氏 菌 病 疑 似 病 例 样 本 采 集 、 检 测 、 保 存 及 运 送D.1.1 样 本 的 采 集D.1.1.1 采 集 种 类D.1.1.1.1 血 清 学 检 测 ： 静 脉 血 。 D.1.1.1.2 病 原 分 离 培 养 ： 全 血 、 关 节 液 /滑 囊 液 、 脑 脊 液 等 。 尽 管 从 骨 髓 、 脑 脊 液 、 伤 口 、 脓 液 等 可以 分 离 出 布 鲁 氏 菌 ， 但 病 原 分 离 培 养 用 得 最 多 的 还 是 血 液 ， 建 议 主 要 采 集 疑 似 病 例 全 血 样 本 。D.1.1.2 采 集 方 法D.1.1.2.1
33、血 清 学 检 测D.1.1.2.1.1 用 无 抗 凝 剂 采 血 管 收 集 2 mL 3 mL静 脉 血 ， 在 管 壁 上 做 好 标 记 。D.1.1.2.1.2 血 标 本 不 能 冷 冻 ， 应 1 000 RPM离 心 10 min， 用 于 分 离 血 清 ； 如 果 无 离 心 机 ， 血 标 本 应 冷藏 4 放 置 ， 直 到 血 清 完 全 析 出 。D.1.1.2.1.3 小 心 吸 取 血 清 ， 避 免 吸 到 红 血 球 ， 在 无 菌 条 件 下 ， 移 至 带 外 螺 旋 盖 的 血 清 管 中 ， 在 管 壁上 做 好 标 记 。D.1.1.2.1.4
34、填 写 标 本 送 检 表 ， 包 括 标 本 采 集 日 期 ， 送 检 表 上 要 注 明 病 例 编 号 。D.1.1.2.2 病 原 学 检 测 D.1.1.2.2.1 应 尽 可 能 在 患 者 使 用 抗 生 素 治 疗 前 采 集 样 本 。 急 性 期 发 热 病 例 培 养 出 菌 率 较 高 。D.1.1.2.2.2 血 液 标 本 ： 成 人 推 荐 每 个 血 培 养 瓶 应 加 的 血 量 为 5 ml 10 ml， 血 液 和 肉 汤 比 为 1:10 1:5； 儿 童 一 般 静 脉 采 血 1 ml 5 ml用 于 血 培 养 。D.1.1.2.2.3 关 节
35、液 /滑 囊 液 ： 用 针 穿 刺 法 或 外 科 手 术 引 流 法 采 集 样 本 ， 无 菌 条 件 下 注 入 培 养 瓶 中 ， 尽可 能 采 取 更 多 的 液 体 （ 至 少 1 ml） 。D.1.1.2.2.4 脑 脊 液 ： 用 腰 椎 穿 刺 的 方 法 采 集 脑 脊 液 ， 无 菌 条 件 下 注 入 培 养 瓶 中 ， 尽 可 能 采 取 更 多 的液 体 （ 至 少 1 ml） 。D.1.2 样 本 的 检 测D.1.2.1 血 清 学 检 测基 层 实 验 室 用 布 病 疑 似 病 例 血 清 做 虎 红 平 板 凝 集 试 验 ， 如 为 阳 性 ， 则 做
36、 试 管 凝 集 试 验 确 诊 。D.1.2.2 病 原 学 检 测 D.1.2.2.1 分 离 到 病 原 菌 是 实 验 确 诊 布 鲁 氏 菌 病 的 最 可 靠 的 方 法 。 可 以 从 病 人 血 液 、 骨 髓 、 其 他 体 液及 排 泄 物 等 任 一 种 病 理 材 料 培 养 物 中 进 行 布 鲁 氏 菌 分 离 。 从 患 者 体 内 分 离 到 布 鲁 氏 菌 是 确 定 布 鲁 氏 菌 感染 的 金 标 准 。 推 荐 使 用 双 向 培 养 方 法 进 行 血 液 培 养 ， 培 养 时 间 通 常 为 7天 21天 。 DB50/T 9462019 11 D
37、.1.2.2.2 基 层 实 验 室 采 集 被 检 患 者 样 本 后 ， 无 菌 操 作 加 5 mL 10 mL于 血 培 养 瓶 中 ， 放 置 于 二 氧 化 碳浓 度 为 5% 10%的 37 恒 温 培 养 箱 或 全 自 动 血 培 养 仪 中 进 行 培 养 。 培 养 过 程 中 通 过 全 自 动 血 培 养 仪 自 动报 警 或 肉 眼 每 天 观 察 血 培 养 瓶 有 无 浑 浊 或 菌 落 生 长 情 况 。 如 全 自 动 血 培 养 仪 报 警 或 肉 眼 观 察 发 现 血 培 养瓶 出 现 浑 浊 或 菌 落 生 长 ， 则 进 行 布 鲁 氏 菌 的 分
38、 离 培 养 及 鉴 定 。 不 具 备 相 应 生 物 安 全 条 件 或 检 测 能 力 的 实验 室 ， 则 将 该 血 培 养 瓶 放 置 于 4 生 物 安 全 运 输 箱 中 ， 于 24小 时 内 送 至 具 备 检 测 能 力 的 实 验 室 做 进 一 步检 测 。 如 培 养 30天 后 全 自 动 血 培 养 仪 未 报 警 或 肉 眼 未 观 察 到 血 培 养 瓶 出 现 浑 浊 ， 则 报 告 布 鲁 氏 菌 培 养 结果 为 阴 性 。 为 提 高 检 出 率 ， 避 免 漏 检 ， 建 议 基 层 实 验 室 使 用 全 自 动 血 培 养 仪 观 察 结 果
39、。D.1.2.2.3 阳 性 血 清 及 确 诊 阳 性 的 菌 株 送 市 级 实 验 室 进 行 血 清 学 检 测 结 果 复 核 ， 菌 株 的 复 核 鉴 定 、 分子 分 型 、 噬 菌 体 裂 解 等 。D.1.3 样 本 的 保 存D.1.3.1 血 清 学 检 测 ： 采 集 血 清 样 本 后 要 及 时 进 行 检 测 ， 如 果 条 件 不 允 许 ， 可 在 4 8 存 放 3天 、-20 以 下 长 期 保 存 。 标 本 运 送 期 间 应 避 免 反 复 冻 融 。 应 设 立 专 库 或 专 柜 单 独 保 存 标 本 。 D.1.3.2 病 原 分 离 培
40、养 ： 含 样 本 的 培 养 瓶 应 立 即 送 往 实 验 室 ， 放 置 37 温 箱 进 行 培 养 ， 如 不 能 及 时 送检 会 影 响 检 出 率 ， 在 4 8 环 境 下 可 保 存 24小 时 。D.1.4 样 本 的 运 送收 集 单 位 向 上 级 单 位 运 送 样 本 进 行 检 测 需 使 用 生 物 安 全 运 输 箱 ， 并 根 据 中 华 人 民 共 和 国 传 染 病 防治 法 病 原 微 生 物 实 验 室 生 物 安 全 管 理 条 例 和 可 感 染 人 类 的 高 致 病 性 病 原 微 生 物 菌 （ 毒 ） 种 或 样本 运 输 管 理 规
41、定 相 关 要 求 进 行 。D.1.5 布 鲁 氏 菌 实 验 室 检 测 及 生 物 安 全D.1.5.1 所 有 实 验 活 动 依 据 中 华 人 民 共 和 国 传 染 病 防 治 法 , 布 鲁 氏 菌 病 诊 断 标 准 （ WS269-2019） ， 病 原 微 生 物 实 验 室 生 物 安 全 管 理 条 例 和 布 鲁 氏 菌 病 防 治 手 册 进 行 。 根 据 卫 生 部 2006年 发布 的 人 间 传 染 的 病 原 微 生 物 名 录 ， 涉 及 抗 原 制 备 的 大 量 活 菌 操 作 ， 或 易 产 生 气 溶 胶 的 病 原 菌 离 心 、冻 干 以
42、及 活 菌 感 染 的 动 物 等 实 验 需 要 在 生 物 安 全 三 级 实 验 室 操 作 。 布 鲁 氏 菌 样 本 的 病 原 菌 分 离 纯 化 、 药 物 敏 感 性 实 验 、 生 化 鉴 定 、 免 疫 学 实 验 、 PCR核 酸 提 取 、 涂 片 、 显 微 镜 观 察 等 初 步 检 测 在 生 物 安 全 二 级实 验 室 操 作 。 不 含 布 鲁 氏 菌 致 病 性 活 菌 材 料 的 分 子 生 物 学 、 血 清 免 疫 学 等 实 验 在 生 物 安 全 一 级 实 验 室 操作 。D.1.5.2 运 输 包 装 分 类 ： 按 卫 生 部 2005年 第 45号 令 可 感 染 人 类 的 高 致 病 性 病 原 微 生 物 菌 （ 毒 ） 种 或样 本 运 输 管 理 规 定 和 国 际 民 航 组 织 文 件 Doc 9284 危 险 品 航 空 安 全 运 输 技 术 细 则 的 分 类 包 装 要 求 ，布 鲁 氏 菌 病 原 菌 和 标 本 应 按 A类 UN 2814的 要 求 包 装 和 空 运 ； 通 过 其 他 交 通 工 具 运 输 的 可 参 照 标 准 包 装 。_
