1、ICS 65.202.20B 31备 案 号 ： 51629-2017 DB46海 南 省 地 方 标 准DB46/T 411 2016台 农 16号 菠 萝 组 培 苗 生 产 技 术 规 程 2016-10-08发 布 2016-12-08实 施海 南 省 质 量 技 术 监 督 局 发 布 DB46/T 4112016 I 前 言本 标 准 按 照 GB/T 1.1 给 出 的 规 则 起 草 。本 标 准 由 海 南 省 质 量 技 术 监 督 局 提 出 。本 标 准 由 海 南 省 农 业 厅 归 口 。本 标 准 起 草 单 位 ： 海 南 省 农 业 科 学 院 热 带 果 树
2、 研 究 所 。本 标 准 起 草 人 ： 范 鸿 雁 、 华 敏 、 何 凡 、 罗 志 文 、 郭 利 军 、 何 舒 、 李 向 宏 。 DB46/T 4112016 1 台 农 16 号 菠 萝 组 培 苗 生 产 技 术 规 程1 范 围本 标 准 规 定 了 台 农 16号 菠 萝 组 培 苗 有 关 的 术 语 和 定 义 、 组 培 工 厂 的 要 求 、 组 培 苗 的 要 求 、 分 组 标 准 、外 植 体 的 选 择 、 处 理 和 接 种 、 初 代 培 养 、 继 代 培 养 、 成 苗 培 养 、 生 根 培 养 、 练 苗 、 移 栽 、 检 测 等 系 列 生
3、产 技 术 要 求 。本 标 准 适 用 于 台 农 16号 菠 萝 组 培 苗 生 产 。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 仅 所 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文 件 。 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。GB 5569 农 业 植 物 调 运 检 疫 规 程NY/T 451 菠 萝 种 苗3 术 语 和 定 义下 列 术 语 和 定 义 和 NY/T 451中 确
4、定 的 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件 。3.1 吸 芽着 生 于 母 株 地 上 茎 叶 腋 间 的 芽 。3.2 芽 培 养将 吸 芽 的 芽 尖 作 为 外 植 体 进 行 组 织 培 养 。3.3 变 异 苗在 组 织 培 养 过 程 中 ， 因 体 细 胞 变 异 而 出 现 的 花 叶 、 叶 片 扭 曲 黄 化 、 幼 苗 茎 部 徒 长 显 弱 、 叶 片 短 小 、生 根 阶 段 出 现 矮 化 株 等 的 表 型 变 异 。4 要 求4.1 组 培 工 厂 要 求 4.1.1 工 厂 组 成 DB46/T 4112016 2 组 培 工 厂 包 括 准 备 室
5、、 接 种 室 、 培 养 室 、 观 察 检 测 室 等 场 所 。4.1.2 环 境 条 件组 培 工 厂 应 建 在 排 水 设 施 、 通 风 条 件 良 好 、 远 离 各 种 污 染 源 ， 环 境 干 燥 ， 空 气 清 新 ， 通 风 透 光 。4.1.3 准 备 室用 于 各 种 药 品 的 贮 备 、 称 量 、 溶 解 、 器 皿 洗 涤 、 培 养 基 配 制 与 分 装 、 培 养 基 和 培 养 器 皿 的 灭 菌 、 培养 材 料 的 预 处 理 等 的 场 所 ， 应 宽 敞 明 亮 、 通 风 良 好 ， 地 面 应 便 于 清 洁 ， 又 可 防 滑 。4.
6、1.4 接 种 室用 于 植 物 材 料 的 消 毒 和 接 种 、 培 养 物 的 继 代 转 移 等 的 场 所 ， 应 无 尘 、 无 对 流 空 气 的 洁 净 环 境 。 工 作人 员 进 入 室 内 前 ， 应 换 上 洁 净 的 工 作 服 、 工 作 帽 和 拖 鞋 ， 避 免 带 入 杂 菌 引 起 空 气 污 染 接 种 工 具 。 4.1.5 培 养 室培 养 室 应 具 备 控 制 湿 度 、 温 度 、 光 照 等 设 施 条 件 ， 保 持 清 洁 卫 生 。4.1.6 观 察 检 测 室 要 求方 便 观 察 、 检 测 组 培 苗 是 否 干 净 不 受 污 染
7、 。4.2 苗 木 要 求4.2.1 基 本 要 求4.2.1.1 瓶 苗 种 源 来 自 品 种 纯 正 、 优 质 高 产 的 母 本 园 或 母 株 ； 品 种 纯 度 98%； 无 污 染 ； 继 代 培 养 不 超 过 12 代 ， 时 间 不 超 过 2025 个 月 ； 根 系 有 分 杈 、 侧 根 及 根 毛 ； 茎 叶 生 长 正 常 ； 变 异 率 2%。4.2.1.2 袋 装 苗 种 源 来 自 品 种 纯 正 的 瓶 苗 ； 苗 龄 6 个 月 9 个 月 ； 品 种 纯 度 98%； 植 株 粗 壮 ， 生 长 正 常 ， 根 系 生 长 良 好 ； 无 检 疫 性
8、 病 虫 害 ； 变 异 率 5%。 4.2.2 分 级 标 准4.2.2.1 瓶 苗 分 级 标 准台 农 16号 菠 萝 组 培 苗 瓶 苗 除 符 合 4.2.1.1外 ， 分 级 应 符 合 表 1的 规 定 。 DB46/T 4112016 3 4.2.2.2 袋 装 苗 分 级 标 准台 农 16号 菠 萝 组 培 苗 袋 装 苗 除 符 合 4.2.1.2外 ， 分 级 应 符 合 表 2的 规 定 。表 1 台 农 16 号 菠 萝 组 培 苗 瓶 苗 分 级 指 标项 目 级 别 变 异 苗一 级 二 级 三 级种 苗 高 (h),mm h 19.5 15.4 h 19.5
9、9.4 h 15.4 h 8.3种 苗 茎 粗 (d),mm d 5.4 4.2 d 5.4 3.5 d 4.2 d 2.7最 长 叶 长 (l),mm l 17.6 14.3 l 17.6 8.2 l 14.3 l 4.3最 长 叶 宽 (w),mm w 6.4 4.8 w 6.4 4.5 w 4.8 w 2.6 品 种 纯 度 (p), % p 98.0 p 95.0 p 92.0 -表 2 台 农 16 号 菠 萝 组 培 苗 袋 装 苗 分 级 指 标项 目 级 别一 级 二 级 三 级种 苗 高 (h),mm h 400 250 h 400 165 h 250种 苗 茎 粗 (d),
10、mm d 23.5 17 d 23.5 10.5 d 17最 长 叶 长 (l),mm l 325 200 l 325 140 l 200最 长 叶 宽 (w),mm w 18.9 19.3 w 18.9 15.2 w 19.3品 种 纯 度 (p), % p 98.0 p 95.0 p 92.05 台 农 16 号 菠 萝 组 培 苗 生 产 流 程 外 植 体 的 选 择 外 植 体 的 处 理 接 种 初 代 培 养 继 代 培 养 壮 苗 生 根 培 养 炼 苗 移 栽 。5.1 外 植 体 的 选 择5.1.1 母 本 园 的 选 择母 本 园 必 须 是 无 检 疫 性 病 虫 害
11、 的 台 农 16号 菠 萝 种 植 园 。5.1.2 母 株 的 确 定选 择 品 种 纯 正 、 农 艺 性 状 优 良 、 生 长 健 壮 、 无 病 虫 害 的 植 株 ， 并 逐 株 编 号 及 跟 踪 观 察 ， 果 实 性 状 良好 的 确 定 为 母 株 。5.1.3 外 植 体 的 采 集选 择 连 续 3 d以 上 晴 天 ， 在 13:0016:00之 间 采 取 母 株 的 吸 芽 。 5.2 外 植 体 的 处 理5.2.1 预 处 理从 母 本 园 采 取 的 健 康 吸 芽 用 自 来 水 冲 洗 20 min， 剥 除 最 外 层 叶 片 后 用 饱 和 肥 皂
12、 水 浸 泡 30 min， 取 出用 自 来 水 冲 洗 干 净 ， 再 去 掉 外 围 几 张 叶 片 后 ， 将 叶 片 剪 短 ， 放 入 灭 过 菌 的 容 器 内 待 用 。 DB46/T 4112016 4 5.2.2 消 毒在 无 菌 操 作 台 上 进 行 无 菌 操 作 ， 用 1%KMnO4浸 泡 经 预 处 理 的 外 植 体 5 min， 无 菌 水 冲 洗 3 5次 ； 75%酒 精 处 理 30 s， 无 菌 水 冲 洗 2次 ， 0.1% HgCl2消 毒 15 min， 无 菌 水 冲 洗 3 5 次 ， 用 灭 菌 纸 吸 干 水 待 用 。5.3 初 代
13、培 养5.3.1 培 养 基 配 方MS+6-BA 0.5mg/L + NAA0.1mg/L + KT 0.05 mg/L+蔗 糖 30 g/L+卡 拉 胶 6 g/L， pH 5.8pH 6.0。5.3.2 培 养 条 件培 养 温 度 25 28 ， 初 期 34 d暗 培 养 ， 15天 以 后 ， 光 照 时 间 10 h/d 12 h/d， 光 照 强 度 1500 Lx。5.3.3 接 种 按 5.2.2消 毒 后 的 外 植 体 在 无 菌 条 件 下 ， 在 无 菌 滤 纸 上 剥 除 外 部 叶 片 ， 切 除 多 余 的 叶 伤 口 部 分 ， 直 至露 出 1.5 cm2
14、 cm的 芽 点 ， 再 纵 剖 成 两 块 外 植 体 ， 接 种 于 初 代 培 养 基 上 。5.4 继 代 培 养5.4.1 培 养 基 配 方3/2MS+ 6-BA 0.25 mg/L+ NAA0.5 mg/L +蔗 糖 30 g/L+卡 拉 胶 6 g/L， pH 5.86.0。5.4.2 培 养 条 件培 养 温 度 25 28 ， 光 照 时 间 10 h/d 12 h/d， 光 照 强 度 1500 Lx2000 Lx。5.4.3 接 种将 初 代 培 养 获 得 的 丛 生 芽 ， 到 继 代 培 养 基 中 培 养 ； 切 成 若 干 小 层 芽 ， 每 层 含 有 23
15、个 小 芽 ， 同 时 切 除 抽 生 过 高 的 叶 片 、 枯 死 老 叶 及 基 部 愈 伤 组 织 ， 剔 除 不 正 常 芽 ， 以 23个 小 芽 转 接 到 继 代 培 养 基 上 ， 周期 为 35 d。5.5 生 根 培 养5.5.1 培 养 基 配 方1/2MS+6-BA0.1 mg/L+IBA 2.0 mg/L+蔗 糖 30 g/L+卡 拉 胶 6 g/L， pH 5.86.0。5.5.2 培 养 条 件培 养 温 度 25 28 ， 光 照 时 间 8 h/d10 h/d， 光 照 强 度 500Lx1000 Lx。5.5.3 接 种继 代 获 得 的 丛 芽 长 高
16、至 4cm6cm时 ， 切 取 生 长 健 壮 、 叶 色 舒 展 、 叶 色 正 常 生 根 的 丛 芽 ， 接 种 到 生 根 培 养 基 上 。5.5.4 炼 苗生 根 培 养 15 d后 ， 组 培 苗 高 度 达 到 9.4 cm以 上 ， 长 至 6cm8 cm， 生 根 率 达 100%， 每 株 3条 以 上 不 定根 时 ， 根 系 发 达 完 整 ， 可 置 于 75%遮 光 率 的 荫 棚 内 炼 苗 ， 15 d后 可 移 栽 。 DB46/T 4112016 5 5.6 移 栽 与 管 理5.6.1 生 根 苗 洗 净 消 毒 后 分 级 放 置 ， 分 块 移 栽
17、， 不 合 格 苗 沙 培 假 植 ；5.6.2 消 毒 时 ， 可 选 用 用 50%百 菌 清 可 湿 性 粉 剂 或 50%多 菌 灵 可 湿 性 粉 剂 1000 倍 液 消 毒 5 min， 即 可移 栽 至 混 合 基 质 中 ；5.6.3 混 合 基 质 配 方 为 ： 下 层 基 质 （ 红 土 、 椰 糠 、 泥 炭 土 按 3:1.5:0.5） ， 上 层 基 质 泥 炭 土 ；5.6.4 移 栽 后 马 上 淋 水 定 根 ； 移 栽 2d3 d 后 开 始 喷 杀 菌 剂 ， 如 多 菌 灵 、 百 菌 清 等 ； 第 1 周 内 每 天 喷 雾水 34 次 ， 使 相
18、 对 湿 度 保 持 在 80%左 右 ， 温 度 控 制 在 26 32 ， 遮 光 率 为 75%以 上 ； 15 d 后 ， 叶 面 喷施 0.1%0.2%的 KH 2PO4。6 检 疫初 代 培 养 后 取 1个 增 殖 芽 作 好 标 记 ， 送 有 关 植 检 部 门 进 行 病 毒 血 清 学 检 测 （ ELISA） 。 经 验 证 无 病株 号 的 增 殖 芽 方 能 继 续 增 殖 培 养 ， 用 以 生 产 大 量 组 培 苗 ； 而 有 病 株 号 的 增 殖 芽 则 应 全 部 销 毁 。 如 需 调 运 ，种 苗 应 符 合 GB 15569的 规 定 。7 包 装
19、 、 标 志 、 运 输 和 贮 存7.1 包 装瓶 苗 可 保 留 在 组 培 容 器 中 ， 并 用 木 箱 或 纸 箱 包 装 ； 袋 装 苗 应 用 木 箱 、 塑 料 箱 等 硬 质 包 装 箱 包 装 。 7.2 标 志种 苗 应 附 有 标 签 。 标 签 内 容 包 括 类 型 （ 瓶 苗 或 袋 装 苗 ） 、 品 种 、 检 验 证 书 编 号 、 等 级 、 数 量 （ 株 数 ） 、育 苗 单 位 、 出 厂 （ 圃 ） 日 期 。 包 装 箱 外 应 贴 标 签 ， 注 明 品 种 、 等 级 、 规 格 、 数 量 、 产 地 、 出 苗 日 期 等 。标 签 样
20、式 详 见 附 录 A。7.3 运 输按 不 同 品 种 、 级 别 装 车 。 用 蓬 车 辆 运 输 ， 并 保 持 通 风 透 气 ； 运 输 途 中 避 免 日 晒 、 雨 淋 ； 装 车 时 应 小心 轻 放 。7.4 贮 存种 苗 出 厂 （ 圃 ） 后 应 在 当 日 装 运 ， 到 达 目 的 地 后 要 立 即 卸 车 ， 并 置 于 荫 棚 或 阴 凉 处 。 瓶 苗 应 及 时 炼苗 ， 袋 装 苗 应 及 早 定 植 ， 若 有 特 殊 情 况 无 法 及 时 定 植 时 ， 贮 存 时 间 不 应 超 过 6 d， 贮 存 时 置 于 荫 棚 中 ， 保 持 通 风
21、， 并 经 常 喷 水 保 持 基 质 湿 润 。 DB46/T 4112016 6 AA附 录 A（ 资 料 性 附 录 ）菠 萝 组 培 苗 标 签附 录 B菠 萝 组 培 苗 标 签 单 位 ： cm 1.50 8.00菠 萝 组 培 苗2.00 瓶 苗 袋 装 苗品 种 等 级2.00 2.00 2.00 2.00 a） 正 面1.50 2.00 6.00育 苗 单 位 1.202.00 证 书 编 号 1.20数 量 (株 ) 出 圃 日 期 1.20 b） 反 面注 ： 标 签 用 厚 度 为 0.3 mm的 白 色 聚 乙 烯 塑 料 薄 片 。 标 签 孔 用 金 属 包 边图 A.1 菠 萝 组 培 苗 标 签_
