1、 ICS 65.150 B51 备案号： 38080-2013 DB46 海南省 地 方 标 准 DB 46/ T 255 2013 马氏珠母贝插核育珠技术规程 Technical regulations for nucleus-inserting and pearl production of pearl oyster Pinctada fuctada martensii (Dunker) 2013 - 07 - 10 发布 2013 - 08 - 01 实施 海南省质量技术监督局 发布 DB46/ T 255 2013 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009给 出的规则起草。
2、本标准由海南省海洋与渔业厅提出。 本标准起草单位：海南大学、海南省海钰珍珠研究院。 本标准起草人：冯永勤、周永灿、谢珍玉、王世锋、方再光。 DB46/ T 255 2013 1 马氏珠母贝插核育珠技术规程 1 范围 本标准规定了马氏珠母贝 Pinctada fuctada martensii (Dunker)插核育珠技术规程的术语和定义、 术前处理、栓口、细胞小片制作、插核、术后休养和育珠。 本规程适用于马氏珠母贝插核育珠技术操作。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改
3、单）适用于本文件。 NY 5052 无公害食品 海水养殖用水水质 DB46/T 13 海水养殖珍珠 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 母贝 壳 长 3 cm以上尚未进行插核手术的贝的统称。 3.2 小片贝 用于制作外套膜细胞小片的母贝。 3.3 育珠贝 经过人工插核手术，在贝体内已植入珠核及细胞小片后用于培育珍珠的成贝。 3.4 插核 在珍珠贝体内植入珠核及细胞小片的操作过程。 3.5 术前处理 母贝性腺发育初期或生理机能过强时，采取抑制性腺发育和减弱生理机能强度； 母贝生殖腺过于饱 满时，采取促进生殖细胞排放等处理措施。 3.6 休养期 母贝插核手术后经过 20 d 30
4、 d的休养恢复期。 3.7 育珠期 DB46/ T 255 2013 2 母贝插核手术后，经过休养、珍珠育成至收获的全过程。 3.8 壳长 由贝壳的前端至后端的最大距离。 3.9 壳高 由贝壳顶端至腹缘的最大距离。 3.10 壳宽 左右两壳间的最大距离。 3.11 体重 贝个体的湿重量。 4 术前处理 4.1 抑制性腺发育及生理机能强度的方法 4.1.1 塑料筐吊养处理法 塑料筐为长方形，规格为长 40 cm、宽 30 cm、高 16 cm，四周有长方形的孔，孔长 1.5 cm、宽 0.8 cm， 每筐装 入母贝 60 80个，吊养水深 3 m 5 m，吊养时间 15 d 30 d。 4.1.
5、2 网笼吊养处理法 用网目 2 mm的聚乙烯网布缝制成长 110 cm、宽 60 cm的网袋，在网袋内套入两个直径 32 cm的锥形贝 笼，每笼装入母贝 40个，吊养水深 3 m 5 m，吊养时间 7 d 15 d。 4.2 促进生殖细胞排放的方法 按照 4.1.1的吊养方法，选择晴天气温较高时将塑料筐提升至水深 0.5 m的水层，第二天再将塑料筐 下降至水深 3 m 5 m水层，以此方法连续操作 3 4次，利用水温变动刺激生殖细胞排放；经检查大部分 生殖细胞已排放之后，将 母贝再次深吊于水深 5 m水层，吊养 3 d 5 d后用于插核施术。 5 栓口 5.1 插核贝的选择 选择 1.5 2.
6、5龄母贝，壳高 6.5 、壳宽 2.3 以上，体重大于 38 g，贝体健壮，植核部位较大并 疏松。 5.2 清贝 先用清贝刀切断母贝足丝和清除贝壳表面的附着生物，再用海水冲洗贝壳表面的污泥。 5.3 排贝 DB46/ T 255 2013 3 将母贝腹缘向上紧密排列于排贝笼内，为使插核贝之间尽可能没有缝隙，把个别贝腹缘向下倒插于 两贝之间，然后将排贝笼吊养于海区 2 h 3 h。 5.4 栓 口 将排贝笼中的母贝稍松开，当母贝自然张壳时 ,用开口器张开贝壳，然后在两壳间塞入宽 1.3 cm 1.5 cm的木塞，或用开口器张开贝壳后直接放于插核台手术。 6 细胞小片制作 6.1 小片贝的选择 选
7、择 1.5龄至 2龄、壳长 6.5 cm以上、贝体健康、贝壳珍珠层呈银白色、外套膜自然伸展至贝壳边缘、 外套膜厚薄适中的母贝作为制作细胞小片的小片贝。 6.2 切取外套膜 剖开小片贝，用剪刀剪取从唇瓣下方至肛门腹面的外套膜，剪取路线为外套膜肌集束端与色线之间。 然后用小片刀以色线为中间，按内、外各占一半比例把外套膜切成长条形。外套膜边缘触手 应 切除干净。 6.3 抹片 把切成长条状的外套膜放置于玻璃板或质地坚实的光滑木板上，用湿棉花 球抹去外套膜两面的粘 液，在分泌珍珠质的一面（称正面，即自然生长时外套膜紧贴贝壳的一面） 应 轻抹，避免损伤分泌珍珠 质的组织细胞。 6.4 切小片 用小片刀将
8、经抹片的长条形外套膜切成方形或近方形的小片，小片边长根据拟植入的珠核大小而 定，直径 7.5 mm 8.5 mm的珠核，小片边长为 2.6 mm 3.0 mm；直径 6.5 mm 7.5 mm的珠核，小片边长 为 2.3 mm 2.6 mm；直径 5.0 mm 6.5 mm的珠核，小片边长为 2.0 mm 2.3 mm。 6.5 消毒与染色 使用医用红汞药水配成 3海水溶液，然后滴于小片上染色与消毒。 6.6 小片使用时间 小片制作完成后，应在 20 min以内使用完。 7 插核 7.1 切口 将插核贝安放于插核台后，先判别是否适宜进行插核手术。对适宜手术的插核贝，用开口刀在其足 基部黑白处切
9、开一弧形切口，切口宽度以稍小于珠核直径为宜，刀口深度应不伤及足丝腺。 7.2 通道 使用通道针往“左袋”（腹嵴与肠管之间部位）和“右袋”（围心腔与泄殖孔之间部位）进行通道， 通道路径紧靠表皮下面前进，不应伤及肠管和消化肓囊。 DB46/ T 255 2013 4 7.3 插核 7.3.1 核位 核位包括“左袋”和“右袋”，“左袋”位于缩足肌腹面， 腹嵴与肠管之间；“右袋”位于围心腔 与泄殖孔之间。 7.3.2 珠核规格 拟植入珠核的规格根据插核贝的壳高来确定，具体见表 1： 表 1 插核贝的壳高与植入珠核规格 插核贝壳高 cm 植入单核规格 mm 植入双核规格 mm 左袋 左袋 右袋 6.5
10、7.0 6.6 7.2 6.0 6.5 5.0 6.0 7.0 7.5 7.2 7.5 6.5 7.0 6.0 6.5 7.5 8.0 7.5 8.0 7.0 8.0 6.5 7.0 8.0 9.0 8.0 8.5 8.0 8.5 7.0 7.5 7.3.3 送核 先向“左袋”部位送 核，用送核器吸住珠核 1/3面积部位，沿着通道向“左袋”核位前进，当珠核 到核位时，用送核器向核位轻压珠核，使珠核埋植于核位内，埋植深度以从腹嵴表皮观察珠核不造成表 皮隆起为准。“右袋”部位送核，只用送核器沿通道送至“右袋”核位即可。一个插核贝只植单核部位 为“左袋”，植双核为部位为“左袋”和“右袋”。 7.4
11、送小片 送小片有“先送小片法”和“后送小片法”两种，“先送小片法”为先送小片后送核 ; “后送小片 法”为先送核后送小片。“先送小片法”应把分泌珍珠质的细胞面向上，用小片针把小片分别送至左袋 和右袋核位即可；“后送小片法 ”是将分泌珍珠质的细胞向下，用小片针把小片送至珠核表面后，沿着 珠核把小片移至珠核后端下方，使珠核紧压住小片。 7.5 暂养 完成插核手术后的育珠贝先放于休养笼中，然后放置于插核室水槽中或吊养于插核室附近的贝架上 暂养。 8 术后休养 8.1 休养笼具 休养笼具有锥形休养网笼和方型塑料笼两种，锥形笼底部直径 32 cm、高 20 cm，网笼底部用网目 2 mm 的聚乙烯网布包
12、住，上方为 3 cm网目的聚乙烯网；塑料笼规格长 40 cm、宽 35 cm、高 16 cm，其四周有 长方形孔，孔长 1.5 cm、宽 0.8 cm。 8.2 放养密度 DB46/ T 255 2013 5 锥形休养笼放养手 术贝 40个；方型塑料休养笼放养手术贝 60个。休养贝选择风平浪静、潮流缓慢的 海区吊养，吊养水深 3 m 4 m。 8.3 休养期管理 插核手术后第 2 d至第 7 d，每天检查死亡情况。检查时把贝笼提至表层，如发现死亡个体应尽快捡 出，并清除贝笼中的污物，记录死亡贝数及吐出的珠核数。检查操作过程速度应快、轻，尽量减少对插 核手术贝的刺激。 8.4 贝体康复判定 休养
13、贝体康复时，贝壳腹缘生长出新鳞片，有新的足丝分泌，贝体软体部黑色素恢复到手术前的状 态。 8.5 休养时间 休养时间一般为 20 d 30 d。 9 育珠 9.1 育珠海区条件的要求 育珠贝养殖场 所应选择风浪比较小，潮流比较畅通的海区，水深 5 m以上，底质为沙、砾石或沙泥， 受台风影响较小的海区；且要求养殖海区的海水盐度 25 35，冬季水温不低于 13 ，夏季水温不高于 30 。海水水质应符合 NY 5052 的规定。 9.2 育珠贝笼具 聚乙烯锥形网笼，筐底直径 32 、高 20 ，网目长度 3 ；聚乙烯片状网笼，长 70 cm、宽 40 cm， 网目 4 cm。 9.3 育珠贝放养密
14、度 聚乙烯锥形网笼，每笼放养休养期结束后的育珠贝 30个；聚乙烯片状网笼，每笼放养育珠贝 40 45 个。 9.4 育珠贝的管理 9.4.1 清贝 根据贝笼附着物情况， 每 1 4个月换笼和清除育珠贝体表附着物 1次。清贝时应避免阳光曝晒及露 空时间过长，清除的附着物不应倒入海中。 9.4.2 调节吊养深度 夏季高温期、暴雨季节和冬季低温期吊养于 4 m 5 m水层，温度适宜时，吊养于 2 m 3 m的水层。 9.5 育珠期 育珠期 12 18个月。 9.6 收珠 DB46/ T 255 2013 6 珠层厚度 0.4 mm以上，抽样检查珍珠层形成的厚度符合 DB46/T 13的要求后方可收珠。 _
