1、ICS 65.020.20 B 05 DB37 山东省地方标准 DB 37/ T 16252010 植株全磷的测定 钒钼黄比色法 Determination of total phosphorus in plant Vanadium molybdate yellow colorimetric method 2010 - 06 - 03 发布 2010 - 08 - 01 实施 山东省质量技术监督局 发布 DB37/T 1625-2010 I 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由山东省农业厅提出。 本标准由山东省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：山东省
2、土壤肥料测试中心。 本标准主要起草人：泉维洁、侯小芳、赵建忠、祝红伟、李建伟、许小芳。 DB37/T 1625-2010 1 植株全磷的测定 钒钼黄比色法 1 范围 本标准规定了植株全磷测定方法。 本标准适用于小麦、玉米、水稻的籽粒与秸秆全磷含量测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 601 化学试剂 标准滴定溶液的制备 GB/T 602 化学试剂杂质测定用标准溶液的制备 GB/T 603 化学试剂 试验方法中所用制剂及制品的制备 GB
3、/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 DB37/T xxx 植株实验室样品制备 DB37/T xxx 植株全氮的测定 凯氏定氮法 3 方法原理 样品经硫酸加过氧化氢消煮使各种形态的磷转变成正磷酸。待测液中的正磷酸与偏钒酸和钼酸能生 成黄色的三元杂多酸，其吸光度与磷浓度成正比。用分光光度计在波长440nm处测定其吸光度，以定量 分析样品中磷的含量。 4 试剂和溶液 所有试剂除注明者外，均为分析纯。分析用水应符合GB/T 6682中至少三级水的规格要求。试验中 所需标准溶液、制剂及制品，在没有注明其它要求时均按GB/T 601、GB/T 603之规定制备。 4.1 硫酸： （H 2SO4）
4、=1.84g/mL。 4.2 过氧化氢：(H 2O2)30%。 4.3 硝酸： (HNO3）=1.4g/mL。 4.4 钒钼酸铵溶液 A液：称取25.0g钼酸铵溶于400mL水中； B液：称取1.25g偏矾酸铵溶于300mL沸 水中，冷却后加250mL硝酸（4.3），冷却至室温。 在搅拌下将A液缓缓注入B液中，用水稀释至1L，混匀，贮于棕色瓶中。 4.5 氢氧化钠溶液： (NaOH)=20g/L 称取20g氢氧化钠溶于水中，定容至1L。 4.6 硫酸溶液：50mL/L 吸取硫酸（4.1）50mL，缓慢加入到100mL水中，搅拌，冷却后定容至1L。 DB37/T 1625-2010 2 。 4.
5、7 磷标准溶液：50mg/L 0.2195g干燥的KH 2PO4（优级纯）溶于水，加入5mL HNO 3（4.3），转移到1000mL的容量瓶（5.8） 中，定容 4.8 二硝基酚指示剂：0.2%溶液 称取0.2g 2,6 二硝基酚或2,4 二硝基酚溶于20mL乙醇（体积分数为95%），用水定容至100mL。 5 仪器设备 5.1 消煮炉：温度可达 400，200400温度范围内，温差不大于 3。 5.2 分光光度计。 5.3 分析天平：感量 0.1mg。 5.4 弯颈小漏斗：直径 2cm。 5.5 移液管：10mL。 5.6 容量瓶或比色管：50mL。 5.7 容量瓶：100mL。 5.8
6、容量瓶：1000mL。 6 分析步骤 警告使用本标准的工作人员应有正规实验室工作的实践经验。本标准未指出所有可能的安全问 题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件。 6.1 试样溶液制备 按照DB37/T xxx植株全氮的测定 凯氏定氮法6.1条款执行。 6.2 标准曲线绘制 用移液管（5.5）分别吸取0.00mL，1.00mL，2.50mL， 5.00mL，7.50mL，10.00mL，12.50mL ，15.00mL 磷标准溶液 （4.7） 置于50mL容量瓶或比色管 （5.6） 中， 加水至30mL左右， 加两滴二硝基酚指示剂 （4.8） ， 用氢氧化钠
7、溶液（4.5）或硫酸溶液（4.6）调节溶液呈微黄色，加10mL钒钼酸铵溶液（4.4）摇匀，定 容至50mL， 得到磷含量为0.00mg/L， 1.00mg/L，2.50mg/L，5.00mg/L，7.50mg/L， 10.00mg/L，12.50mg/L， 15.00mg/L的标准溶液。室温15以上放置30min后（最长不超过4h），用分光光度计在波长440nm处进 行比色，读取吸光度值。根据溶液中磷的浓度和相应的吸光度值绘制标准曲线。 6.3 测定 吸取按DB37/T xxx植株全氮的测定 凯氏定氮法6.1操作得到的消煮液10.00mL放入50mL容量瓶 或比色管中，加水至30mL左右，加两
8、滴二硝基酚指示剂，用氢氧化钠溶液（4.5）或硫酸溶液（4.6）调 节呈微黄色，加10mL钒钼酸铵溶液（4.4）摇匀，定容至50mL，室温15以上放置30min后比色。根据标 准曲线求出样品中磷的浓度。 6.4 空白试验 除不加试样外，试剂用量和操作与测定试样时相同。 7 分析结果的表述 DB37/T 1625-2010 3 全磷（P）含量 以克每千克（g/kg）表示，按式（1）计算： 3 0 () 10VD m gg （）1 式中： 从标准曲线求得的显色液中磷的浓度，单位为毫克每升（mg/L）； 0 从标准曲线求得的空白试样中磷的浓度，单位为毫克每升（mg/L）； V测定体积，单位为毫升（mL）； D分取倍数（定容体积与分取体积之比），本标准中为10； 10 -3 mL与L换算系数； m样品质量单位为克（g）。 所得结果应保留到小数点后三位。 8 允许差 实验室内平行测定结果的允许相对相差应符合表1的要求。 表1 实验室内测定结果允许相对相差 全磷含量（g/kg） 平行测定允许相对相差（%） W5 10 w5 5 不同实验室间测定结果允许相对相差应符合表2要求。 表2 不同实验室间测定结果允许相对相差 全磷含量（g/kg） 测定允许相对相差（%） W5 35 w5 20 _
