1、ICS 65.120 B 25 DB37 山东省 地方标准 DB37/T 4045.1 2020 饲草中主要农药残留及真菌毒素的测定 第 1 部分：饲草中 10 种杀虫剂农药残留量 的测定 气相色谱 -串联质谱法 Determination of main pesticide residues and mycotoxin in fodder grass Part1： Determination of 10 pesticide residuesin fodder grassby gas chromatography-tandem mass spectrometry 2020 - 07 - 09
2、发布 2020 - 08 - 09 实施 山东省市场监督管理局 发布 DB37/T 4045.1 2020 I 前 言 DB37/T 4045 饲草 中主要农药残留及真菌毒素的测定分为三个部分： 第 1 部分：饲草中 10 种杀虫剂农药残留量的测定 气相色谱 -串联质谱法； 第 2 部分：饲草中脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮的测定 液相色谱 -串联质谱法； 第 3 部分：饲草中伏马毒素的测定方法 液相色谱 -串联质谱法。 本部分为 DB37/T 4045的第 1部分。 本部分按照 GB/T 1.1 2009给出的规则起草。 本部分由山东省畜牧兽医局提出并组织实施。 本部分由山东省畜牧业标准化
3、技术 委员会归口。 本部分起草单位：山东省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所。 本部分 主要起草人：王峰恩、邓立刚、官帅、李霞、李增梅、陈璐、孙启帆、郑雯雯。 DB37/T 4045.1 2020 1 饲草中主要农药残留及真菌毒素的测定 第 1 部分：饲草中 10 种杀 虫剂农药残留量的测定 气相色谱 -串联质谱法 1 范围 本部分规定了饲草中 10种杀虫剂（敌敌畏、乐果、马拉硫磷、毒死蜱、倍硫磷、六六六、氯氰菊酯、 甲萘威、异丙威、抗蚜威）农药多残留的气相色谱 -串联质谱测定方法。 本部分适用于饲草中 10种杀虫剂（敌敌畏、乐果、马拉硫磷、毒死蜱、倍硫磷、六六六、氯氰菊酯、 甲萘威、异丙
4、威、抗蚜威）农药残留量的测定。 本方法敌敌畏、乐果、马拉硫磷、毒死蜱、 倍硫磷、抗蚜威检出限为 0.005 mg /kg，定量限为 0.01 mg/kg；六六六、异丙威检出限为 0.001 m/kg，定量限为 0.002 mg/kg；甲萘威、氯氰菊酯检出限为 0.02 mg/kg，定量限为 0.05 mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试样经乙腈提取，提取液经分散固相萃取净化，
5、气相色 谱 -串联质谱联用仪测定，外标法定量。 4 试剂或材料 除非另有说明，在分析中仅使用分析纯的试剂，水符合 GB/T 6682一级水的规定。 4.1 乙腈：色谱纯。 4.2 乙酸乙酯 : 色谱纯。 4.3 氯化钠。 4.4 标准品：敌敌畏、乐果、马拉硫磷、毒死蜱、倍硫磷、六六六、氯氰菊酯、甲萘威、异丙威、抗 蚜威，含量 98.0 %。 4.5 标准溶液配制： a) 标准储备液（ 100 mg/L）：准确称取适量标准品（精确至 0.01 mg），用丙酮溶解，配制成浓 度为 100 mg/L 的标准储备溶液，敌敌畏、乐果、马拉硫磷、毒死蜱、倍硫磷、六六六、氯氰 菊酯、甲萘威、异丙威 、抗蚜威
6、，避光 -18 保存，有效期 1 年； b) 中间标准溶液：准确移取 1 mL 标准储备溶液）于 10 mL 容量瓶中，用乙酸乙酯定容至刻度， 配制成浓度为 10 mg/L 的中间标准溶液， 4 冷藏避光保存； c) 混合标准工作溶液：根据需要用乙酸乙酯把中间标准溶液稀释成适合浓度的混合标准工作溶 液，现用现配。 DB37/T 4045.1 2020 2 4.6 净化包： 900 mg 无水 MgSO4、 150 mg PSA（ N-丙基乙二胺）、 15 mg GCB（石墨化炭黑）。 4.7 微孔滤膜：有机相， 0.22 m。 5 仪器设备 5.1 气相色谱 -三重四级杆质谱联用仪：配电子轰击
7、源（ EI）。 5.2 分析天 平：感量 0.01 g 和 0.01 mg。 5.3 高速匀浆机：转速不低于 10 000 r/min。 5.4 离心机：转速不低于 4 000 r/min。 5.5 氮吹仪，可控温。 5.6 粉碎机。 5.7 涡旋振荡器。 6 样品 样品粉碎后充分混匀，于 18 下保存。 7 分析步骤 7.1 前处理 7.1.1 鲜样 称取平行 5 g试样（精确至 0.01 g）试样于 50 mL具塞塑料离心管中，加入 5 g 7 g氯化钠，振荡摇 匀，准确加入 20 mL乙腈匀浆提取 1 min， 4 000 r/min离心 3 min；取 6 mL上清液加到内含净化包（
8、4.6） 的离心管中，涡旋混匀 1 min， 4 000 r/min离心 3 min。准确吸取 2 mL上清液于 10 mL离心管中， 40 水浴下氮气吹至近干，残留物乙酸乙酯定容至 1 mL，过微孔滤膜，用于测定。 7.1.2 干样 称取平行 2 g试样（精确至 0.01 g）试样于 50 mL具塞塑料离心管中，加 10 mL水浸泡 10 min 15 min， 其他操作同 7.1.1。 7.2 测定 7.2.1 仪器参考条件 仪器参考条件如下： a) 色谱柱： 5 %苯基 -95 %甲基聚硅氧烷石英毛细管柱，柱长 30 m，柱内径 0.25 mm，填料内径 0.25 m，或相当者； b)
9、梯度升温程序： 60 保持 2 min，然后以 15 /min 程序升温至 150 ，再以 6 /min 升温 至 280 ，保持 5 min； c) 载气：氦气，纯度 99.999 %，流速 1.0 mL/min； d) 进样口温度： 280 ； e) 进样量： 2.0 ； f) 进样方式：不分流进样； DB37/T 4045.1 2020 3 g) 电子轰击源： 70 eV； h) 离子源温度： 280 ； i) 传输线温度： 280 ； j) 溶剂延迟： 3 min； k) 多反应监测（ MRM），监测模式见表 1。 表 1 多反应监测（ MRM）条件 序号 中文名称 保留时间 定量离子
10、对 碰撞电压 定性离子对 碰撞电压 1 敌敌畏 8.319 136 94 14 109 79 5 2 甲萘威 11.670 144 116.1 10 166.0 55.1 10 3 异丙威 11.878 136 121.1 10 121 77.1 10 4 -六六六 14.317 218.9 183.0 5 217 180.8 5 5 乐果 14.685 86.9 46 15 142.9 111 10 6 -六六六 15.023 181 145 15 217 180.9 5 7 -六六六 15.288 181 145 15 217 181.0 5 8 -六六六 16.111 217 181.1
11、 5 181.1 145.1 15 9 抗蚜威 16.373 166 71.1 25 166 55.1 20 10 马拉硫磷 18.261 126.9 99.0 5 172.9 99.0 15 11 毒死蜱 18.493 196.9 169 15 198.9 171.0 15 12 倍硫磷 18.620 278.0 109.0 15 278.0 169.0 15 13 氯氰菊酯 29.805 29.985 30.070 30.155 163.0 91.0 10 163.0 127.0 5 7.2.2 混合基质标准溶液的制备 称取空白试样，按 7.1和 7.2操作制得空白基质，氮气吹至近干，按照
12、标准曲线最终定容浓度分别加 入标准工作溶液（ 4.5.3）复溶，过微孔滤膜，供气相色谱 -串联质谱仪测定。以农药定量离子峰面积为 纵坐标，以农药基质标准溶液质量浓度为横坐标，绘制标准曲线。 7.3 定性及定量 7.3.1 定性测定 通过试样色谱图的特征离子与相应对照溶液各色谱峰的特征离子相对照定性。试样与标准品保留时 间的相对误差不大于 2.5 %；试样特征离子的相对离子丰度与标准品特征离子的相对离子丰度一致，相 对 离子丰度偏差不超过表 2的规定，则可判断试样中含有农药残留。 表 2 定性确证时相对离子丰度的最大允许误差 相对离子丰度 50 % 20 % 50 %（含） 10 % 20 %（
13、含） 10 % 允许的相对偏差 20 25 30 50 7.3.2 定量 外标法定量。 7.4 试样溶液的测定 DB37/T 4045.1 2020 4 将基质标准工作溶液和试样溶液依次注入气相色谱 质谱联用仪中，保留时间和定性离子定性，测 定定量离子峰面积，待测样液中农药残留的响应值应在仪器检测的定量测定线性范围之内，超过线性范 围时应根据测定浓度进行适当倍数稀释后再进行分析。 7.5 空白试 验 除不加试料外，按照 7.1 7.4规定进行平行操作。 8 分析结果的表述 试料中被测农药残留量以质量分数计，单位以毫克每千克（ mg/kg）表示，按公式（ 1）计算： 2 31Vm VV . (1
14、) 式中： 试料中被测物残留量，单位为毫克每千克（ mg/kg）； 从基质混合标准曲线上得到的样液中农药的质量浓度，单位为毫克每升（ mg/L）； V1 样品提取液体积，单位为毫升（ mL）； V2 待浓缩的上清液体积（ mL）； V3 试样液最终定容体积（ mL）； m 试料的质量，单位为克（ g）。 计算结果扣除空白值，保留两位有效数字，当结果大于 1 mg/kg时保留三位有效数字。 9 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于这两个测定值的算数平均值的 15 %。 DB37/T 4045.1 2020 5 A A 附 录 A （资料性附录） 标准物质色谱图 各农药残留特征离子质量色谱图见图 1。 说明： 1 敌敌畏； 2 甲萘威； 3 异丙威； 4 -666； 5 乐果 ； 6 -666； 7 -666； 8 -666； 9 抗蚜威； 10 马拉硫磷； 11 毒死蜱； 12 倍硫磷； 13 氯氰菊酯。 图 A.1 有机磷、有机氯、拟除虫菊酯以及氨基甲酸酯类农药气相色谱 -串联质谱总离子流色谱图（标准 品的浓度为 0.1 mg/L） _
