1、DB32/T 1 铁 皮 石 斛 嫩 茎 液 体 培 育 生 产 技 术 规 程Technical regulation of the cultivation for tender stems ofDendrobium officinale in submerged culture 2019-09-19 发 布 2019-10-31 实 施 ICS 65.020.20B 31 DB32江 苏 省 地 方 标 准DB32/T 3652-2019 江 苏 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布 DB32/T3652 2019 2 前 言本 标 准 按 GB/T 1.1-2009 标 准 化 工 作
2、 导 则 第 1 部 分 ： 标 准 的 结 构 与 编 写 规 则 给 出 的 规 则 编 写 。本 标 准 由 江 苏 省 农 业 科 学 院 提 出 并 归 口 。本 标 准 起 草 单 位 ： 苏 州 天 成 新 农 生 物 科 技 有 限 公 司 ， 江 苏 省 农 业 科 学 院 。本 标 准 起 草 人 ： 张 杰 、 周 燕 群 、 关 剑 、 余 向 阳 、 杜 平 、 王 昕 怡 、 吴 红 升 。 DB32/T3652 2019 3 铁 皮 石 斛 嫩 茎 液 体 培 育 生 产 技 术 规 程1 范 围本 标 准 规 定 了 铁 皮 石 斛 嫩 茎 液 体 培 育 的
3、术 语 和 定 义 、 生 产 条 件 、 种 源 培 育 、 培 育 生 产 、 规 模 化 生产 、 日 常 管 理 、 采 收 、 质 量 等 划 分 和 包 装 、 运 输 及 贮 存 。本 标 准 适 用 于 铁 皮 石 斛 嫩 茎 液 体 培 育 。2 规 范 性 引 用 文 件 下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是 注 日 期 引 用 文 件 ， 仅 所 注 日 期 版 本 适 用 于 本 文 件 。凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。GB
4、5749 生 活 饮 用 水 卫 生 标 准GB/T 6682 分 析 实 验 室 用 水 规 格 和 试 验 方 法3术 语 和 定 义下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件 。3.1 铁 皮 石 斛 嫩 茎 液 体 培 育 （ The cultivation for tender stems of Dendrobium officinale insubmerged culture） 从 铁 皮 石 斛 中 分 离 植 物 愈 伤 组 织 ， 经 诱 导 分 化 及 驯 化 筛 选 ， 利 用 离 体 培 养 生 物 技 术 扩 增 培 育 的 无农 药 残 留 、 重 金 属
5、含 量 较 低 、 高 醇 浸 出 物 含 量 铁 皮 石 斛 幼 嫩 茎 的 培 育 技 术 。4 生 产 条 件室 内 环 境 为 十 万 级 以 上 洁 净 度 的 洁 净 间 。 保 持 室 温 25oC28oC。 均 匀 柔 和 人 工 光 ， 增 补 4:1 红 蓝光 ， 光 照 强 度 为 2000Lux， 光 暗 周 期 8h:16h。 空 气 相 对 湿 度 40%70%。 生 产 环 境 、 生 产 用 水 和 过 滤 水应 分 别 符 合 GB 5749 和 GB/T 6682 的 规 定 。5种 源 培 育 与 增 殖5.1培 养 基 配 制 采 用 MS培 养 基 +
6、0.5mg/L NAA+0.5mg/L KT+20 g/L葡 萄 糖 +10g/L琼 脂 固 体 培 养 基 进 行 种 源 细 胞 固体 培 养 。 采 用 MS 培 养 基 +0.5mg/L NAA+0.5mg/L KT+20g/L 葡 萄 糖 培 养 液 进 行 种 源 细 胞 液 体 培 养 。5.2种 源 细 胞 增 殖 DB32/T3652 2019 4 将 成 熟 铁 皮 石 斛 茎 段 插 入 固 体 培 养 基 中 培 养 ， 获 得 愈 伤 组 织 细 胞 。 在 相 同 固 体 培 养 基 条 件 下 增 殖种 源 细 胞 。5.3种 源 细 胞 培 育按 照 鲜 重 2
7、0g/L30g/L 接 种 量 ， 采 用 无 菌 操 作 ， 将 种 源 细 胞 转 接 至 2L5L 玻 璃 瓶 中 进 行 液 体 培 养 。培 养 过 程 中 向 培 养 液 中 通 入 无 菌 空 气 ， 空 气 流 速 为 0.75L/min1L/min， 培 养 周 期 为 30d45d。6培 育 生 产6.1培 养 基 配 制采 用 MS 培 养 基 +0.5mg/L NAA+1mg/L KT+20g/L 葡 萄 糖 +5%麦 芽 糖 培 养 基 进 行 培 养 。 6.2培 育 操 作按 40g/L50g/L 接 种 量 ， 将 种 源 细 胞 转 接 至 10L 玻 璃 瓶
8、 中 。 在 培 养 过 程 中 ， 将 无 菌 空 气 通 入 培 养瓶 中 ， 空 气 流 速 为 0.75L/min1L/min， 培 养 周 期 为 30d45d。 待 嫩 茎 生 长 总 体 积 至 培 养 瓶 总 体 积 的 2/3时 ， 采 收 或 留 做 下 一 阶 段 种 源 。7 规 模 化 生 产按 40 g/L50 g/L 接 种 量 ， 将 采 收 的 种 源 细 胞 转 接 至 50L100L 生 物 反 应 器 中 培 养 生 产 ， 其 它 按 本标 准 第 6 章 的 规 定 执 行 。8 日 常 管 理 一 旦 发 现 细 菌 或 真 菌 的 污 染 ， 立
9、 即 将 污 染 品 移 出 培 育 生 产 间 并 进 行 湿 热 高 温 灭 菌 。9 采 收采 收 时 剔 除 褐 化 植 株 ， 用 过 滤 水 缓 慢 冲 洗 嫩 茎 3min5min， 300rpm/min 脱 水 离 心 3min， 甩 脱 浮 水后 可 直 接 制 备 成 铁 皮 石 斛 嫩 茎 鲜 品 ， 或 65 烘 干 制 备 为 干 品 。10质 量 等 级 划 分铁 皮 石 斛 嫩 茎 质 量 等 级 划 分 要 求 见 表 1。表 1 铁 皮 石 斛 嫩 茎 质 量 等 级 划 分 要 求 等 级 要 求特 一 级 足 干 ， 形 态 规 则 ， 长 度 大 于 6
10、mm， 嫩 茎 分 枝 簇 状 均 一 排 列 ， 翠 绿 色 。特 级 足 干 ， 形 态 基 本 规 则 ， 长 度 在 36mm， 嫩 茎 偶 见 小 嫩 叶 ， 黄 绿 或 翠 绿 色 。 DB32/T3652 2019 5 一 级 足 干 ， 形 态 相 似 ， 长 度 在 13mm， 嫩 茎 混 有 嫩 叶 ， 黄 绿 或 翠 绿 色 。工 业 级 足 干 ， 形 态 相 似 ， 长 度 小 于 1mm， 嫩 茎 混 有 嫩 叶 ， 黄 绿 或 翠 绿 色 。11 包 装 、 运 输 、 储 存11.1 包 装分 级 后 分 别 密 封 包 装 ， 包 装 上 应 标 注 品 名 、 规 格 、 产 地 、 生 产 批 号 、 合 格 标 志 。11.2 运 输 运 输 工 具 应 清 洁 、 卫 生 ， 无 毒 、 无 污 染 。 运 输 时 应 防 潮 、 防 暴 晒 、 防 污 染 。11.3贮 存贮 存 于 阴 凉 、 通 风 、 清 洁 、 干 燥 室 内 ， 不 得 与 有 毒 、 有 害 和 有 异 味 的 物 品 同 仓 存 放 。
