1、ICS 65.020B 62黑 龙 江 省 地 方 标 准DB23DB23/T 2539 2019针 叶 天 蓝 绣 球 组 培 繁 殖 技 术 规 程 2019-12-13发 布 2020-01-12实 施黑 龙 江 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布 DB23/T 2539 2019 I 前 言本 标 准 依 据 GB/T 1.1-2009 的 编 写 规 则 起 草 。本 标 准 由 黑 龙 江 省 科 学 院 提 出 。本 标 准 起 草 单 位 : 黑 龙 江 省 科 学 院 自 然 与 生 态 研 究 所 、 五 常 市 桂 丹 园 艺 有 限 公 司 。本 标 准 主 要 起
2、 草 人 : 曲 彦 婷 、 孟 凡 娟 、 马 游 、 唐 焕 伟 、 陈 菲 、 李 黎 、 韩 辉 、 熊 燕 、 刘 畅 、 张 革 燕 、张 悦 、 李 虹 、 张 天 姝 。 DB23/T 2539 2019 1 针 叶 天 蓝 绣 球 组 培 繁 殖 技 术 规 程1 范 围本 标 准 规 定 了 针 叶 天 蓝 绣 球 ( Phlox subulata L.) 组 培 繁 殖 的 环 境 与 设 备 消 毒 、 培 养 基 配 制 、 外植 体 选 择 与 消 毒 、 外 植 体 接 种 、 继 代 增 殖 、 壮 苗 培 养 、 生 根 培 养 、 培 养 条 件 、 移 栽
3、 及 生 产 档 案 。本 标 准 适 用 于 针 叶 天 蓝 绣 球 的 种 苗 生 产 。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 , 仅 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文 件 。凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 , 其 最 新 版 本 ( 包 括 所 有 的 修 改 单 ) 适 用 于 本 文 件 。 GB/T 6001 育 苗 技 术 规 程LY/T 1882 林 木 组 织 培 养 育 苗 技 术 规 程NY/T 2306 花 卉 种 苗 组 培 快 繁 技 术
4、 规 程3 环 境 与 设 备 消 毒3.1 接 种 室 消 毒接 种 室 消 毒 按 NY/T 2306-2013 中 8.6进 行 。3.2 超 净 工 作 台 消 毒超 净 工 作 台 消 毒 按 NY/T 2306-2013中 8.5、 8.6进 行 。 3.3 培 养 室 消 毒培 养 室 消 毒 按 NY/T 2306-2013 中 8.7进 行 。3.4 接 种 器 具 消 毒接 种 器 具 按 NY/T 2306-2013中 8.4进 行 。4 培 养 基 配 制4.1 母 液 配 制培 养 基 母 液 配 制 按 NY/T 2306-2013 中 7.3执 行 。4.2 培
5、养 基 配 制 4.2.1 培 养 基 配 方培 养 基 配 制 成 分 如 下 : DB23/T 2539 2019 2 a) 接 种 培 养 基 : MS NAA0.5 mg/L+6BA1mg/L+蔗 糖 30g/L 琼 脂 粉 5g/L, pH值 6.0。b) 继 代 增 殖 培 养 基 : MS+ NAA0.5 mg/L+6BA2mg/L+蔗 糖 30g/L 琼 脂 粉 5g/L, pH值 6.0。c) 壮 苗 培 养 基 : MS+蔗 糖 30g/L 琼 脂 粉 5g/L, pH值 6.0。d) 生 根 培 养 基 : 1/2MS+IBA1mg/L NAA0.5mg/L+蔗 糖 30
6、g/L 琼 脂 粉 5g/L+活 性 炭 3g/L, pH值 6.0。4.2.2 培 养 基 配 制 方 法培 养 基 配 制 方 法 按 NY/T 2306-2013中 7.4执 行 。4.3 培 养 基 灭 菌 及 保 存培 养 基 灭 菌 及 保 存 方 法 按 LY/T 1882-2010 中 4.2 进 行 。5 外 植 体 选 择 、 消 毒 与 接 种5.1 外 植 体 选 择 春 季 从 生 长 健 壮 无 病 虫 害 的 母 株 上 剪 当 年 生 的 粗 壮 嫩 茎 作 为 外 植 体 , 应 晴 天 进 行 。5.2 外 植 体 消 毒将 外 植 体 置 于 500mL
7、烧 杯 中 , 烧 杯 口 套 纱 网 , 加 2 滴 4 洗 洁 精 , 先 用 自 来 水 浸 泡 8min 10min 后 ,再 冲 洗 30min, 倒 净 水 , 在 超 净 工 作 台 上 用 75%酒 精 清 洗 10s 15s 后 取 出 , 浸 泡 于 0.1%氯 化 汞 溶 液 中6min 8min, 轻 摇 , 倒 掉 消 毒 液 后 用 无 菌 水 冲 洗 3 次 5次 , 再 用 无 菌 滤 纸 吸 干 表 面 的 水 分 备 用 。5.3 接 种 与 诱 导 培 养将 消 毒 后 的 外 植 体 切 成 1cm 2cm 的 茎 段 , 每 段 至 少 带 有 1 个
8、 2 个 叶 芽 , 将 切 好 的 外 植 体 接 种 到诱 导 培 养 基 中 , 注 明 接 种 物 名 称 和 日 期 , 培 养 21d 28d, 记 录 诱 导 情 况 。6 继 代 增 殖 、 壮 苗 与 生 根 培 养6.1 继 代 增 殖 培 养 切 分 诱 导 分 化 的 不 定 芽 接 入 继 代 增 殖 培 养 基 中 , 约 8 个 /瓶 , 培 养 28d 35d, 每 个 茎 段 萌 发 出 5个 8个 不 定 芽 , 分 割 新 长 出 的 不 定 芽 , 可 按 需 求 重 复 继 代 。6.2 壮 苗 培 养切 取 继 代 增 殖 培 养 中 长 1.0cm
9、以 上 的 不 定 芽 , 转 接 至 壮 苗 培 养 基 中 , 约 8 个 /瓶 , 培 养 14d 21d。6.3 生 根 培 养壮 苗 培 养 基 中 组 培 苗 长 到 2.0cm 以 上 高 度 时 , 将 小 苗 转 入 生 根 培 养 基 中 , 约 10 株 /瓶 , 培 养 7d 10d,当 小 苗 基 部 长 出 健 壮 的 不 定 根 3 条 以 上 , 大 部 分 苗 根 长 为 0.5cm 2.0cm 时 , 即 可 进 行 移 栽 。7 培 养 条 件无 菌 培 养 室 白 天 的 温 度 控 制 在 23 2 , 夜 间 不 低 于 15 , 相 对 空 气 湿
10、 度 控 制 在 60% 80%, 光 照 强 度 为 2000Lux 3000Lux, 光 照 时 间 为 12h/d 14h/d, 黑 暗 时 间 为 10h/d 12h/d。8 移 栽 DB23/T 2539 2019 3 8.1 炼 苗将 生 根 培 养 瓶 转 移 到 过 渡 培 养 间 , 半 开 瓶 口 1d 2天 后 , 敞 开 瓶 口 炼 苗 2d 3d后 可 移 栽 。8.2 移 栽 基 质 的 制 备基 质 选 择 草 炭 、 珍 珠 岩 和 蛭 石 混 合 , 体 积 比 约 为 2:2:1, 栽 植 前 用 0.5%的 高 锰 酸 钾 溶 液 浇 透 消 毒 24h。
11、8.3 组 培 苗 移 栽在 温 室 取 出 生 根 的 小 苗 , 用 清 水 洗 净 根 部 培 养 基 , 清 洗 时 应 避 免 伤 根 。 将 洗 净 的 生 根 苗 移 栽 至 装 基质 的 128穴 盘 , 移 栽 后 压 实 小 苗 周 围 的 基 质 , 浇 透 水 , 覆 70%遮 阳 网 。8.4 移 栽 苗 管 理保 证 温 室 内 幼 苗 水 分 供 需 平 衡 , 育 苗 水 分 管 理 按 GB/T 6001执 行 。 移 栽 5d 7d后 , 去 掉 遮 阳 网 , 浇 1/2 MS营 养 液 1次 , 温 度 22 28 , 相 对 空 气 湿 度 60% 80%, 温 室 环 境 应 保 持 清 洁 , 21d 28d新 生 根系 长 出 , 将 穴 盘 苗 装 入 营 养 钵 , 常 规 管 理 即 可 。9 生 产 档 案建 立 针 叶 天 蓝 绣 球 组 织 培 养 繁 殖 技 术 档 案 , 包 括 繁 殖 培 养 条 件 、 培 养 基 配 制 、 外 植 体 接 种 、 增 殖 数量 、 种 苗 驯 化 移 栽 及 管 理 等 。