1、ICS 65.020B 61黑 龙 江 省 地 方 标 准DB23DB23/T 2536 2019橡 胶 草 组 织 培 养 育 苗 技 术 规 程 2019-12-13发 布 2020-01-12实 施黑 龙 江 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布 DB23/T 2536 2019 I 前 言本 标 准 依 据 GB/T 1.1-2009 的 编 写 规 则 起 草 。本 标 准 由 黑 龙 江 省 科 学 院 提 出 。本 标 准 起 草 单 位 ： 黑 龙 江 省 科 学 院 自 然 与 生 态 研 究 所 。本 标 准 主 要 起 草 人 ： 陈 菲 、 曾 祥 俊 、 曲 彦 婷
2、 、 李 黎 、 沈 光 、 韩 辉 、 熊 燕 、 张 悦 、 唐 焕 伟 、 杨 轶 华 、李 虹 、 曲 线 、 孙 波 。 DB23/T XXXX XXXX 1 橡 胶 草 组 织 培 养 育 苗 技 术 规 程1 范 围本 标 准 规 定 了 橡 胶 草 （ Taraxacum kok-saghyz Rodin.） 组 织 培 养 育 苗 技 术 的 环 境 与 设 备 消 毒 、 培养 基 制 备 、 外 植 体 诱 导 、 继 代 增 殖 、 生 根 培 养 、 炼 苗 移 栽 、 生 产 档 案 。本 标 准 适 用 于 橡 胶 草 组 织 培 养 育 苗 。2 规 范 性 引
3、 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 仅 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文 件 。凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。 GB/T 6001 育 苗 技 术 规 程LY/T 1882 林 木 组 织 培 养 育 苗 技 术 规 程NY/T 2306 花 卉 种 苗 组 培 快 繁 技 术 规 程3 环 境 与 设 备 消 毒3.1 接 种 室 消 毒接 种 室 消 毒 按 NY/T 2306-20
4、13 中 8.6进 行 。3.2 超 净 工 作 台 消 毒超 净 工 作 台 消 毒 按 NY/T 2306-2013 中 8.5、 8.6进 行 。 3.3 培 养 室 消 毒培 养 室 消 毒 按 NY/T 2306-2013 中 8.7进 行 。3.4 接 种 器 具 消 毒接 种 器 具 按 NY/T 2306-2013中 8.4进 行 。4 培 养 基 制 备4.1 母 液 配 制培 养 基 母 液 配 制 按 LY/T 1882-2010中 4.1进 行 。 4.2 培 养 基 配 制 DB23/T XXXX XXXX 2 4.2.1 培 养 基 配 方培 养 基 配 制 成 分
5、 如 下 ：a) 诱 导 培 养 基 ： MS+6-BA 2.0mg/L+2,4-D 1.0mg/L+蔗 糖 30g/L+琼 脂 粉 5.5g/L， pH值 5.8；b) 继 代 增 殖 培 养 基 ： MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗 糖 30g/L+琼 脂 粉 5.5g/L， pH值 5.8；c) 生 根 培 养 基 ： 1/2MS+NAA 0.2mg/L+蔗 糖 30g/L+琼 脂 粉 5.5g/L， pH值 5.8。4.2.2 培 养 基 配 制 方 法培 养 基 配 制 方 法 按 LY/T 1882-2010中 4.2.1 进 行 。4.3 培 养 基 灭
6、 菌培 养 基 灭 菌 按 LY/T 1882-2010中 4.2.2 进 行 。4.4 培 养 基 保 存 培 养 基 保 存 按 LY/T 1882-2010中 4.2.3 进 行 。5 外 植 体 诱 导5.1 外 植 体 的 选 择从 生 长 健 壮 无 病 虫 害 的 母 株 上 选 取 5cm 6cm长 的 幼 嫩 叶 片 作 为 外 植 体 。5.2 外 植 体 消 毒 处 理将 外 植 体 置 于 烧 杯 中 ， 用 洗 洁 精 溶 液 洗 涤 ， 然 后 用 自 来 水 冲 2h 4h， 在 超 净 工 作 台 上 用 75%酒 精 浸泡 消 毒 30s， 倒 掉 酒 精 ，
7、 用 无 菌 水 冲 洗 3次 4次 ； 再 用 0.1%氯 化 汞 溶 液 浸 泡 6min， 期 间 不 断 摇 动 ， 倒 净氯 化 汞 溶 液 ， 用 无 菌 水 冲 洗 6次 7次 ， 放 在 接 种 盘 内 用 无 菌 滤 纸 吸 干 表 面 水 分 。5.3 外 植 体 接 种 与 诱 导 培 养 将 消 毒 处 理 后 的 外 植 体 切 成 长 1cm 2cm， 接 种 在 诱 导 培 养 基 上 进 行 初 代 诱 导 培 养 。操 作 时 ， 先 将 培 养 瓶 的 瓶 盖 取 下 ， 再 将 培 养 瓶 的 瓶 口 倾 斜 靠 近 酒 精 灯 火 焰 ， 用 镊 子 将
8、 外 植 体 接 种 到诱 导 培 养 基 上 ， 将 培 养 瓶 瓶 口 在 酒 精 灯 外 焰 上 旋 转 灼 烧 后 封 好 瓶 口 。 接 种 完 成 后 ， 在 培 养 瓶 上 标 注 接 种物 名 称 和 日 期 ， 培 养 20d 25d。6 继 代 增 殖外 植 体 经 诱 导 培 养 生 成 愈 伤 组 织 后 ， 分 化 产 生 不 定 芽 ， 将 不 定 芽 不 断 转 接 到 增 殖 培 养 基 中 进 行 培 养 ，20d 25d为 1代 ， 进 行 多 次 继 代 。7 生 根 培 养将 继 代 后 的 组 培 苗 接 种 在 生 根 培 养 基 中 诱 导 生 根
9、 ， 培 养 25d 30d， 当 组 培 苗 基 部 长 出 健 壮 的 不 定 根 3 条 5 条 ， 根 长 为 2cm 3cm时 ， 即 可 出 瓶 移 栽 。8 培 养 条 件培 养 室 白 天 的 温 度 控 制 在 25 2 ， 夜 间 不 低 于 15 ， 相 对 空 气 湿 度 控 制 在 70% 80%， 光 照 强 度 为2000 Lux 3000 Lux， 光 照 时 间 为 12 h/d 14h/d。 DB23/T XXXX XXXX 3 9 炼 苗 移 栽9.1 炼 苗将 培 养 瓶 转 移 到 过 渡 培 养 室 中 ， 自 然 光 照 下 炼 苗 2d 3d，
10、然 后 打 开 瓶 盖 ， 再 炼 苗 2d 3d， 温 度 控 制在 22 25 。9.2 移 栽从 培 养 瓶 中 取 出 生 根 的 小 苗 ， 用 清 水 洗 净 根 部 的 培 养 基 ， 清 洗 培 养 基 时 动 作 要 轻 ， 避 免 伤 根 ， 将 洗净 的 生 根 苗 移 栽 至 装 有 珍 珠 岩 的 穴 盘 中 ， 每 穴 1株 ， 移 栽 后 要 把 苗 周 围 的 基 质 压 实 ， 然 后 浇 透 水 。9.3 苗 期 管 理将 移 栽 后 的 组 培 苗 放 到 温 室 中 ， 保 证 幼 苗 水 分 供 需 平 衡 ， 育 苗 水 分 管 理 按 照 GB/T6001 进 行 。 移 栽 初 期 应 进 行 遮 阴 ， 5d 7d后 发 现 幼 苗 有 生 长 趋 势 ， 可 以 逐 渐 降 低 湿 度 ， 加 强 光 照 。 温 室 环 境 应 保 持 清洁 ， 温 度 控 制 在 22 25 ， 空 气 湿 度 保 持 在 70% 80%， 光 照 强 度 为 2000 Lux 2500 Lux。10 生 产 档 案建 立 橡 胶 草 组 织 培 养 育 苗 技 术 档 案 ， 包 括 环 境 和 设 备 消 毒 、 培 养 基 制 备 、 外 植 体 诱 导 、 继 代 增 殖 、生 根 培 养 、 炼 苗 移 栽 等 。
