1、ICS 11.120.10 C 23 DB22 吉林省地方标准 DB22/T 31422020 地理标志产品 长白虎眼万年青 Products of geographical indication changbai ornithogalum caudatum jacq 2020 - 07 - 22 发布 2020 - 08 - 01 实施 吉林省市场监督管理厅 发布 DB22/T 31422020 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 和 GB/T 17924-2008 给出的规则起草。 本标准由长白朝鲜族自治县长白山中药研究所提出。 本标准由吉林省市场监督管理厅归口。 本标准起
2、草单位：长白朝鲜族自治县长白山中药研究所、吉林省产品质量监督检验院。 本标准主要起草人：韩佳良、许桂竹、宿艳、宋烨、陶红、徐立娜。 DB22/T 31422020 1 地理标志产品 长白虎眼万年青 1 范围 本标准规定了地理标志产品 长白虎眼万年青的术语和定义、保护范围、要求、检验规则和标志、 包装、运输和贮藏。 本标准适用于地理标志产品 长白虎眼万年青。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件 。 GB/T 191 包装储运图示标志 GB/T 6682
3、分析实验室用水规格和试验方法 中华人民共和国药典 2015年版 四部 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 长白虎眼万年青 Changbai huy anwannianqing 产于地理标志保护范围内的百合科多年生草本植物虎眼万年青（ Ornithogalum caudatum Jacq）的干 燥全株。 4 地理标志产品保护范围 吉林省长白朝鲜族自治县现辖行政区域，保护范围见附录 A。 5 种源 百合科多年生草本植物虎眼万年青（ Ornithogalum caudatum Jacq）。 6 立地条件 选择海拔 700 m1000 m 的山区，土壤为灰棕壤土、白浆土，土层厚度 3
4、0 cm，土壤有机质含 量 3%，土壤pH值 7.08.5。 7 栽培管理 DB22/T 31422020 2 7.1 种栽培育 用含有 15%20% 火山灰（或粗砂）的腐殖土以木槽播种育苗，第二年春季移栽。 7.2 种栽要求 选择直径 2 cm 的球茎进行移栽。 7.3 栽植时间 5 月下旬，种苗随起随栽。 7.4 栽植密度 6 万株/hm 2 7 万株/hm 2 。 7.5 施肥 有机肥 3000 kg/hm 2 。 8 采收和加工 8.1.1 采收 种植第 3 年的 9 月中旬 10 月中旬收获全株。 8.1.2 加工 8.1.2.1 清洁 除杂后，常温清水快速洗涤 3 次以上。 8.1
5、.2.2 切制 须根、叶片切成 3 cm5 cm 段，球茎切成 5 mml0 mm 的片。 8.1.2.3 干燥 阳光棚摊平晾晒，干燥至水分 13%。 8.2 贮藏 水分 13%，存放在阴凉干燥处不超过 12 个月。 9 质量 9.1.1 感官 感官应符合表 1 要求。 DB22/T 31422020 3 表1 感官要求 项目 要求 检验方法 外观 多皱缩，有的破碎。根丛生，须状。鳞茎干瘪，黄色至棕黄色， 略为扁平状，有膜质外皮。叶基生，无柄，暗绿色，叶片皱缩， 边缘卷曲，展平后呈带状，长 20 cm80 cm或更长，宽 2 cm 5 cm，平行脉。总状花序，花序轴长 45 cm100 cm。
6、花梗基 部具苞片，条状披针形。蒴果，室背 3裂，种子黑色。 气味 味清香, 软、麻、微甜。 其它要求 无霉变、无异味、无夹杂。 取一定量样品置于干净的白色瓷盘 中， 在自然光线下用肉眼观察其色泽， 用手感觉其质地，用鼻嗅其气味，取 一定量样品置于口中品其口感。 9.1.2 理化指标 理化指标应符合表 2 要求。 表2 理化指标 项目 指标 检验方法 水分/（%） 13.0 中华人民共和国药典2015年版四部 通则 08 32（第二法） 总灰分/（%） 16.0 中华人民共和国药典2015年版四部 通则 2302 酸不溶性灰分/（%） 3.0 中华人民共和国药典2015年版四部 通则 2302
7、浸出物/（%） 23.0 中华人民共和国药典2015年版四部 通则 2201 （热浸法 60%乙醇为溶剂） 总多糖（以无水葡萄糖计）/（mg/g） 56 附录B 总皂苷（以人参皂苷Re计）/（mg/g） 7.2 附录C 10 检验规则 10.1 组批规则 同一生长期、同一采收期、同一地带，同一加工方法、包装的产品为同一批产品。 10.2 取样方法 按照中华人民共和国药典2015年版四部 通则 0211 规定的方法执行。 10.3 出厂检验 DB22/T 31422020 4 每批产品在出厂前生产厂家应进行出厂检验，出厂检验应包括感官、理化指标的检验、以及标志、 标签和包装的检验。检验合格并附有
8、合格证及检验报告的产品方可出厂。 10.4 型式检验 型式检验的项目包括标准对产品的全部要求。当出现下列情况之一时，应进行型式检验： a) 两次交收检验结果差异很大时； b) 因人为或自然因素使生产环境发生很大变化时； c) 国家质量监督机构或主管部门提出型式检验要求时。 10.5 判定规则 10.5.1 一项指标不合格，则该产品不合格。 10.5.2 凡检验不合格的项目，应另取一份样品进行复测，如仍不合格，则判定该项目不合格。如复测 合格，则应再取一份样品进行第二次复测，以第二次复测结果为准。 11 标志、包装、运输、贮存 11.1 标志 11.1.1 包装贮运图示标志 应符合 GB/T 1
9、91 规定。 11.1.2 专用标志使用 使用“地理标志产品专用标志”的生产者，可向地理标志产品归口部门提出使用“地理标志产品专 用标志”的申请，经审核报国家知识产权局公告批准。企业使用地理标志专用标志时，根据实际情况， 采用加贴、吊挂和直接印刷等形式标示在销售包装上。 11.2 包装 包装和规格可以根据生产和市场的实际需要而定。包装的材质应牢固、清洁、干燥和无污染。 11.3 运输 运输工具应清洁、干燥、无毒无害并有防雨设施，不得与有毒有害、有腐蚀性、易发霉、发潮的货 物混装运输。 11.4 贮存 贮存于阴凉、通风、干燥库房内，注意防虫蛀和霉变。 DB22/T 31422020 5 A A
10、附 录 A （规范性附录） 地理标志产品 长白虎眼万年青保护范围 地理标志产品 长白虎眼万年青保护范围见图 A.1。 图A.1 地理标志产品 长白虎眼万年青保护范围 DB22/T 31422020 6 B B 附 录 B （规范性附录） 总多糖含量的测定方法 B.1 原理 试样经浸泡回流充分提取多糖，取提取液加入盐酸将样品中多糖水解为还原糖。还原糖在碱性条件 下加热被氧化成糖酸及其他产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的 3-氨基-5-硝基水杨酸。在一 定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计，在 520 nm波长下测定 吸光度。查标准曲线并计算出样品中多糖含
11、量。 B.2 试剂与材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为 GB/T 6682 规定的三级水。 B.2.1 盐酸（HCl） 。 B.2.2 乙醇（95%） 。 B.2.3 氢氧化钠（NaOH） 。 B.2.4 酚酞（C 20H14O4） 。 B.2.5 3,5-二硝基水杨酸（C 7H4N2O7） 。 B.2.6 亚硫酸氢钠（NaHSO 3） 。 B.2.7 酒石酸钾钠（C 4H4KNaO6） 。 B.2.8 结晶酚（C 6H6O） 。 B.2.9 无水葡萄糖对照品（C 6H12O6） 。 B.3 试剂配制 B.3.1 标准溶液的配制：精密称取 105 干燥至恒重的无水葡萄糖对照品（
12、B.2.9） 0.1000 g，加水 溶解并定容至 100 mL 容量瓶中。 B.3.2 10%氢氧化钠：称取氢氧化钠（B.2.3）100 g，用新煮沸放冷的水溶解并稀释至 1000 mL。 B.3.3 酚酞指示液：取酚酞（B.2.4）1 g, 溶于乙醇（B.2.2） ，再用乙醇（B.2.2）稀释至 100 mL。 B.3.4 1%3,5-二硝基水杨酸溶液：称取3,5-二硝基水杨酸（B.2.5）10 g，用水溶解并定容于 1000 m L容量瓶。 B.3.5 3,5-二硝基水杨酸溶液配制：甲液：称取结晶酚（B.2.8） 6. 9 g，加 10%氢氧化钠（B.3.2）1 5.2 mL，使溶解，加
13、水 54 mL，并在此溶液中加入亚硫酸氢钠（B.2.6） 6.9 g，使溶解。乙液：称取 酒石酸钾钠（B.2.7） 255 g，加 10%氢氧化钠溶液（B.3. 2） 300 mL，使溶解,再加 1% 3,5-二硝基水 杨酸溶液（B.3.4） 880 mL。甲液与乙液混合，贮于棕色瓶中，放置七天后使用。 B.3.6 饱和氢氧化钠：称取氢氧化钠（B.2.3）60 g，用新煮沸放冷的水溶解并稀释至 100 mL。 B.3.7 3 mol/L盐酸溶液：取盐酸（B.2.1）5 0 mL加水稀释至 200 mL。 B.4 仪器设备 DB22/T 31422020 7 B.4.1 紫外-可见分光光度计。
14、B.4.2 分析天平：感量为 0.0001 g。 B.5 分析步骤 B.5.1 标准曲线的制备 准确吸取无水葡萄糖标准溶液（B.3.1） 0.5 mL 、0.6 mL、0.7 mL、0. 8 mL、1.0mL（对应无水葡 萄糖含量 0.5 mg、0.6 mg、0.7 mg、0.8 mg、1.0 mg），分别置 25 mL容量瓶中，加水补至 2.0 mL， 分别准确加入 3,5-二硝基水杨酸溶液（B.3.5） 1.5 mL，混匀，在沸水浴中加热 5 min，立即冷却至 室温，用水稀释至刻度，摇匀。另准确量取水 2.0 mL，置 25 mL量瓶中，同法操作，作为对照品空白 溶液。在 520 nm波
15、长处测定各点吸光度，以吸光度为纵坐标，含量为横坐标，绘制标准曲线。 B.5.2 供试品溶液的制备 称取本品粉末（过三号筛）3 g（精确至0.0001 ），置具塞锥形瓶中，精密加入水 50 mL，称定重 量，浸泡 12 h，加热回流 3 h，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，离心，准确量取上清液 2 mL 2份，分别置于 25 mL量瓶中，1 份加 3 mol/L 盐酸（B.3.7）溶液 10 mL，置沸水浴中加热 30 min， 取出，冷却，加酚酞指示液（B.3.3）1滴，用饱 和氢氧化钠溶液（B.3.6）调至近红色，再滴加氢氧化 钠溶液（B.3.2 ）使其呈红色，加水定容至 25 mL，
16、摇匀。另 1 份用 10 mL水代替 3 mol/L盐酸溶液 （B.3.7），同法操作，作为供试品空白溶液。 B.5.3 测定 准确量取供试品溶液及供试品空白溶液各 2 mL，置 25 mL量瓶中，准确加入 3,5-二硝基水杨酸溶 液（B.3.5） 1.5 mL，混匀，在沸水浴中加热 5 min，立即冷却至室温，用水稀释至刻度，摇匀。以供 试品空白溶液作为空白溶液，在 520 nm波长处测定供试品吸光度，通过标准曲线计算供试品溶液中无 水葡萄糖的含量。 B.6 分析结果计算 分析结果计算见公式（B.1）。 143 211 1 mVV VVA X . (B.1) 式中： 1 X 样品中总多糖（以
17、无水葡萄糖计）含量，mg/g； 1 A 通过回归方程计算出的供试品溶液中无水葡萄糖的含量，mg； 1 V 浸泡样品加水体积，50 mL； 2 V 供试品溶液定容体积，25 mL； 3 V 吸取浸泡液体积，2 mL； DB22/T 31422020 8 4 V 吸取供试品溶液体积，2 mL； 1 m 称取样品质量，g。 计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留至整数。 DB22/T 31422020 9 C C 附 录 C （规范性附录） 总皂苷含量的测定方法 C.1 原理 试料中的总皂苷经溶剂提取，层析柱净化和富集，在酸性条件下总皂苷与香草醛发生显色反应，用 分光
18、光度法比色定量。 C.2 试剂与材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为 GB/T 6682 规定的三级水。 C.2.1 甲醇（CH 3OH） 。 C.2.2 无水乙醇（CH 3CH2OH） 。 C.2.3 高氯酸（HClO 4） 。 C.2.4 冰醋酸（CH 3COOH） 。 C.2.5 香草醛（C 8H8O3） C.2.6 人参皂苷Re对照品：纯度98%。 C.2.7 Amberlite-XAD-2大孔吸附树脂。 C.2.8 中性氧化铝:层析用粒径为 148 m 200 m C.3 试剂配制 C.3.1 标准溶液：称取人参皂苷Re对照品（C.2.6） 10 mg，精确 到 0.0
19、0001 g，加甲醇（C.2.1）溶 解并定容于10 mL 容量瓶中。配成 1 mg/mL 标准储备液，在 4 可保存 6 个月。 C.3.2 70%乙醇溶液：取无水乙醇（C.2.2） 70 mL加水定容至 100 mL。 C.3.3 香草醛溶液：取香草醛（C.2.5） 0.5 g 加冰醋酸（C .2.4）溶解并定容至 100 mL。 C.4 仪器设备 C.4.1 紫外-可见分光光度计。 C.4.2 分析天平：感量为 0.00001 g 与 0.0001 g。 C.5 分析步骤 C.5.1 标准曲线的制备 取人参皂苷Re标准溶液（C.3.1） 0 L、20 L、40 L、60 L、80 L、1
20、00 L(相当于0 g、20 g、40 g、60 g、80 g、100 g)分别置于 10 mL比色管中，在 60 水浴上蒸干。残渣分别准确 加入香草醛溶液（C.3.3） 0.2 mL，混匀，使残渣溶解，再加 0.8 mL高氯酸（C.2.3），混匀，于 60 水浴中加热 10 min，立即取出，于冰浴中冷却后，加入冰醋酸（C.2.4）定容至 5.0 mL，摇匀，以 1 cm DB22/T 31422020 10 比色皿于 560 nm 波长处测定吸光度值，以人参皂苷含量为横坐标，以吸光度值为纵坐标，绘制标准曲 线，计算回归方程。 C.5.2 供试品溶液的制备 准确称取经粉碎过三号筛的样品 2
21、g，用中性滤纸包好置于索氏提取装置中，加入乙醚，回流提取 1 h，弃取乙醚，滤纸包挥干，继续置索氏提取装置中，加入甲醇浸泡过夜，再回流至提取液无色，提 取液置水浴上蒸干。残渣用水溶解，定容至 250 mL 容量瓶中，备用。 C.5.3 净化 用 15 mL层析管，内装大孔吸附树脂（C.2.7） 8 mL,加上中性氧化铝（C.2.8） 1 cm。先用乙醇 （C.3.2）25 mL 洗柱，弃 去洗脱液，再用水 25 mL 洗柱，弃去洗脱液，精确加入供试品溶液（C.5.2） 1.0 mL，用水 25 mL 洗脱，弃去洗脱液， 再用乙醇（C.3.2）洗脱，收集洗脱液25 mL于比色管中，在 60 水浴
22、上蒸干，残渣准确加入香草醛溶液（C.3.3）0.2 mL，混匀，使残渣溶解，再加高氯酸（C.2.3） 0.8 mL，混匀，于60 水浴中加热 10 min，立即取出，于冰浴中冷却后，加入冰醋酸（C.2.4）定容 至 5.0 mL，摇匀，以 1 cm 比色皿于 560 nm 波长处测定吸光度值，通过标准曲线与回归方程，计算 供试品溶液中皂苷的含量。 C.6 分析结果计算 1000 26 52 2 mV VA X . (C.1) 式中： 2 X 样品总皂苷含量含量，mg/g； 2 A 通过回归方程计算出的供试品溶液皂苷的含量， g； 5 V 供试品溶液总体积，250 mL； 6 V 吸取供试品溶液的体积，1.0 mL； 2 m 称取样品质量， g； 1000 g 与 mg 换算系数。 计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留至 1 位小数。 _
