1、 DB21/T 3193 2019 蛹虫草工厂化栽培技术规程 Technical regulation for of Cordyceps militaris 2019 - 11 - 30 发布 2019 - 12 - 30 实施 辽 宁 省 市场监督管理局 发 布 ICS 65.020.01 B 31 DB21 辽宁省 地 方 标 准 DB21/T 3193-2018 2 前 言 本 标准是 按照 GB/T1.1-2009给出的规则 起草 。 本标准由 辽宁省农业农村厅 提出并 归口管理。 本标准起草单位:沈阳农业大学、辽宁天合生物科技开发有限公司。 本标准起草人: 范文丽、李天来、须 晖、
2、舒黎黎、 魏宝东、王奇颖、刘兴安、赵英明、辛广、 侯俊 、 李晓明 、孙周平、刘义玲、刘在民。 本标准发布实施后,任何单位和个人如有问题和意见建议,均可以通过来电和来函等方式进行 反馈,我们将及时答复并认真处理,根据实际情况依法进行评估及复审。 归口管理部门通讯地址: 辽宁省农业农村厅(沈阳市和平区太原北街 2号),联系电话: 024- 23447862 标准起草 单位通讯地址:沈阳农业大学(沈阳市沈河区东陵路 120号),联络电话: 024- 88487143 DB21/T 3193-2018 3 蛹虫 草 工厂化 栽培技术规程 1 范围 本标准规定了蛹虫草 (Cordyceps milit
3、aris)工厂化栽培中 产地环境、 生产设施、 工厂化栽培技术 流程、菌种 生产 、 接种管理、 环境控制 、 采收 、 烘干与存储 等相关生产工艺技术 要求 。 本标准适用于蛹虫草工厂化栽培。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本 文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本 (包括所有的修改单)适用于本文件。 GB 1886.248 食品安全国家标准 食品添加剂 稳定态二氧化氯 GB 3095 环境空气质量标准 GB 4806食品安全国家标准 食品接触用塑料材料及制品 GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB 7096 食品
4、安全国家标准 食用菌及其制品 GB/T 12728 食用菌术语 GB/T 20783 稳定性二氧化氯溶液 GB 26366 二氧化氯消毒剂卫生标准 GB 50073 洁净厂房设计规范 NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程 NY/T 749 绿色食品 食用菌 NY/T 1742 食用菌菌种通用技术要求 NY/T 1935 食用菌栽培基质质量安全要求 NY/T 2375 食用菌生产技术规范 NY/T 2798.5 无公害农产品 生产质量安全控制技术规范 第 5部分 :食用 菌 NY/T 5010 无公害农产品 种植业产地环境条件 DB21/T 1541 蛹虫草栽培技术 规程 DB21/T 30
5、30 蛹虫草液体菌种生产技术 规程 3 术语和定义 GB/T 12728 界定的术语和定义适用于本文件。 4 产地环境 DB21/T 3193-2018 4 产地环境应符合 NY/T 5010 的规定, 环境空气应符 合 GB 3095 要求,生产用水应符合 GB 5749 要求。 5 工厂化 设施 宜采用大跨度彩钢保温 栽培房进行工厂化生产,栽培房设计符合 GB 50073 一般要求。 外墙 及 屋顶 保温宜采用 聚苯乙烯密度 25kg/m3,栽培 房可采用 “ 非 ” 字形排列,方位南北通透, 可 每 24m 30m设置横过道,每间培养 房 容积( 长 宽 高为 5m8m6m ) 240
6、m3为宜 , 内墙 可 喷厚 度 5cm聚氨 酯保温材料,地面夯实后,铺一层 5cm厚的泡沫板,再浇注 10cm水泥砂浆,墙体地平线上 30cm处每 个 栽培房 等距离开 20cm20cm 通风口 3个,每间 栽培房 开一扇 1.5m2.0m 大门。 6 工厂化栽培技术流程 7 菌种生产 7.1 菌种选择 栽培种选用国家或省级部门审(鉴、认)定或登记的蛹虫草品种 , 其它应符合 NY/T 1742要 求。 7.2 菌种制备 母种的生产应符合 NY/T 528 的规定,原种、栽培种采用液体培养基, 培养基配方 按 DB21/T 3030要求进行。 7.2.1原种 按照原种培养基配方制备培养基,灭
7、菌后,在无菌条件下从母种试管中取 5块 6块 0.5cm2的菌 种块接种到 2500mL的三角瓶中 , 装液量为容量 的 40%, 202 黑暗静置 24h,然后振荡培养 72h 96h。 7.2.2 栽培种 7.2.2.1 装罐 采用液体菌种平板检测法和 显微镜检测 法对菌种纯度进行检测 ,将符合标准的原种在无菌条件 下接入 已灭菌 发酵罐中 , 发酵罐装液量为总容量 的 80%。 7.2.2.2 发酵条件 进入发酵罐的 净化空气系统通气压力为 0.065Mpa 0.1Mpa,罐内压力为 0.035Mpa 0.05Mpa, 发酵罐温度控制在 ( 202 ) 。 DB21/T 3193-201
8、8 5 7.2.2.3 观察与检测 每天 经发酵罐视窗观察,菌液澄清透明,菌丝呈球形、片状和丝状均匀分布 ;出气口气体无异 味; 每间隔 24h从取样口取样进行杂菌检测,即将取样菌液 在超净工作台上 均匀涂布到 平板 中, 分 别 置 于 281 和 361 培养箱中 , 培养 8h 12h后 显微镜 检查 杂菌 。 7.2.2.4 下罐 若显微镜观察无杂菌,则 培养 至 72h, 及时下罐,进行大生产接种。 8 接种管理 8.1 接种环境消毒 8.1.1 消毒剂选择 消毒剂 宜 选用二氧化氯,质量符合 GB26366、 GB 1886.248 和 GB/T 20783 的规定,其使用浓 度为
9、 0.1 L/m3。 选用其它消毒剂种类及使用方法按 NY/T 2798.5 执行。 8.1.2 消毒方法 8.1.2 1清理 接种前 3d 5d,将工厂化栽培 房 打扫干净,并用清水清洗地面 。 8.1.2.2 环境条件 栽培房内 温度控制在 15 40 ,空气湿度保持在 RH85 % 。 8.1.2.3 清毒处理 栽培房内 每隔 5m 在 距离地面高 1m 处 设置 1 个熏蒸点,按消毒体积将药剂均匀分装,置于敞口 塑料容器内,按产品说明书要求反应释放二氧化氯气体,人员迅速撤离现场,密闭工厂化栽培 房 , 并启动内循环风机,密闭 24h 48h。达到密闭要求时间后,打开通风换气风机换气,直
10、到栽 培 房 内无 刺激性气味 为止。 8.2 栽培用 培养基制作及接种 8.2.1 栽培用培养基 栽培用培养基主要以小麦或大米为主 ,质量安全 应符合 NY/T 1935 的规定。 8.2.2 培养基制作 将小麦或大米等装入栽培容器中再加水,小麦料水比 1:1.2,大米料水比 1:1,用高压聚丙烯薄 膜和皮筋封口,采用高压灭菌法,灭菌压力 0.13MPa0.01 MPa ,灭菌时间 1 h。灭菌后将栽培容器 放于消毒的接种室内,冷却至 24 以下即可接种。栽培容器及相关用品均符合 GB 4806.7的要求。 8.2.3接种 DB21/T 3193-2018 6 在接种隧道中接种, 严格按照无
11、菌操作进行,每 500g麦子或大米接菌量为 60mL3m L,菌液均 匀喷洒到培养 基表面。 9 环境控制 9.1发菌期 菌丝生长阶段避光培养,栽培室温度 控制在 202 , 空气相对湿度控制在 65%5% ,空间 CO2 浓度控制 在 0.01% 0.02%,培养 6d1d ,菌丝长满整个栽培容器料面。 9.2 原基分化期 菌丝长满培养基后,增加散射光照射,采用 LED灯带进行补光,光质可以选择白光、蓝光,光 照强度 20050lux ,每天光照时间 101h ,并进行 5 昼夜温差刺激 ,空气相对湿度保持 70%5% 。 3d1d 后 菌丝由白色转为橘黄色, 101d 后 原基出现。 9.
12、3 出菇期 现原基时第一次进行放气,即将栽培容器上封口膜刺孔放气,栽培室内 CO2浓度控制在 0.3% 0.4%,容器内 CO2浓度控制在 3% 4%。温度控制在 181 ,空气湿度 85% 90%。每天定期开启内循 环通风和外循环风机,保持栽培室空气新鲜,每天光照时间 8h,当蛹虫草子实体长到 1cm时,进行 第二次放气,即在封口膜上增加刺孔数量,栽培容器内 CO2浓度控制 在 1.5% 2.5%。 10 采收 蛹虫草生长 60d5d 即可采收。从蛹虫草基部拔取,按大小等级分别排列,进行保鲜或烘干。 生产记录按 DB21/T 1541规定执行 。 采收后应及时清理栽培房,并进行消毒。 11 烘干与储存 采用热风干燥方法, 温度 40 50 ,蛹虫草 烘至 含水量 13%以下 即可。 烘干 后 子实体用薄膜 袋密封 ,置 5 10 避光 干燥的储存 库 内, 防 吸潮 霉变。 蛹虫草商品 符合 GB 7096和 NY/T 749 要 求。 12 病虫害防控 栽培房消毒前 建议先 用 5%火碱清洗地面 , 控制 “吃草菌”即虫草生齿梗孢, 其它病虫害防治按 照 NY/T 2375要求进行。