1、ICS 65.150 B 51 DB21 辽 宁 省 地 方 标 准 DB21/T 3089 2018 萱藻人工育苗技术规程 Technical specification of artificial seedling of Scytosiphon lomentaria 2018 - 12 - 25 发布 2019 - 01 - 25 实施 辽宁省市场监督管理局 发布 DB21/T 3089 2018 I 前 言 本标准是 按照 GB/T 1.1 2009给出的规则 制定 的。 本文件的某些内容可能涉及专利。本文件 的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由 辽宁省 海洋与渔业厅 提出并
2、归口。 本标准主要起草单位：大连海洋大学 。 本标准主要起草人： 李晓丽、孙丕海、 苏延明 、曹淑青、 张泽宇、邢冬飞 。 DB21/T 3089 2018 1 萱藻人工育苗技术规程 1 范围 本 标准 规定了萱藻 （ Scytosiphon lomentaria） 人工育苗技术的 术语和定义、设施 要求、育苗前的 准备 、 种藻、 合子 采集 、 盘状孢子 体 室内 培养 、 游孢子 采集 、 幼苗 室内 培育、 海区暂养 等 。 本 标准 适用于 中国北方尤其辽宁 地区萱藻人工育苗 。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是 注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于
3、本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 NY 5052 无公害食品 海水养殖用水水质 NY/T 394 绿色食品 肥料使用准则 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本 标准 。 3.1 配子体 gametophyte 由萱藻游孢子萌发形成的大型管状藻体称为配子体，配子体为单倍体，雌雄异体，藻体单条丛生， 幼时中实，成体中空，缢缩成节 。 3.2 配子 gamete 萱藻 成熟配子体释放出配子，配子梨型，侧生两条鞭毛。配子为单倍体，分为雌 配子和 雄配子， 雌 性配子 外形相同，异宗结合。 3.3 合子 zygote 萱藻放散的雌雄配子结合形成合子，合子为
4、二倍体，萌发形成盘状孢子体。 3.4 盘状孢子体 crustose sporophyte 由萱藻合子萌发形成的微观盘状藻体称为盘状孢子体，盘状孢子体为二倍体，成熟后经减 数 分裂可 释放单倍体的游孢子。 DB21/T 3089 2018 2 3.5 游孢子 zoospore 萱藻 盘状孢子体表面细胞形成单室孢子囊，成熟后释放出 梨型 、 侧生两条鞭毛的 游孢子。游孢子 为 单倍体，一半萌发为雌配子体，一半萌发为雄配子体。 3.6 育苗板 seedling plate 用于萱藻合子采苗的 附着 基，一般 由透明塑料板经 表面磨砂处理 制成 。 3.7 采 苗网 seedling net 用于萱藻
5、游孢子采苗的附着基，一般为 维尼纶绳或维尼纶和聚乙烯混纺绳制成的网 帘 。 4 设施要求 4.1 育苗场 选址原则 应在水质清新、水流通畅、远离河口、周围无污染、交通便利、海水获取方便、 夏季水温较低的海 域近岸建立育苗场。 4.2 水质要求 pH值 7.8 8.4，盐度 26 35，溶解氧 5 mg/L，其他理化指标应符合 NY 5052要求 。 4.3 育苗室 育苗室东西走向，采用框架结构，屋顶及框架四周镶嵌保温玻璃或毛玻璃，侧窗面积要 大，屋顶覆 盖玻璃钢瓦，室内的光照强度应在 10000 lx以上。室内屋顶及四周要挂有控制光照的 遮光 布帘。 4.4 育苗池 育苗池应设在地下或半地下，
6、一般长 6 m 8 m、宽 2 m 3 m、深 1 m，全池涂刷白色瓷漆。进水管 在育苗池的上方，排水口设在池底， 池底平整，并向排水口成一定坡度。 4.5 供水设施 包括海水的抽取、沉淀、过滤、输送、排放等过程的设备。 沉淀池设于高位处，加盖密封使海水处于黑暗中，蓄水量不少于育苗室日用水量的 1/2。 过滤器使用沙滤罐或沙滤塔，其下方要设有反冲装置。 视海况要及时洗刷沉淀池的池底及池壁，过 滤罐也要定时反冲洗刷。 4.6 其它设施 具备与育苗、培养相配套的供气、供电等系统设施。 5 育苗前的准备 DB21/T 3089 2018 3 5.1 育苗池的处理 新池待白瓷漆完全干透 、 换水浸泡
7、5 d 7 d以后才可以使用 ， 旧池消毒洗刷干净后即可使用。 5.2 海水处理 抽取海面下中层海水，沉淀 24 h以上，经过滤后作为育苗用的清洁海水 。 5.3 附着 基 选用透明硬质塑料，制作成 60 cm40 cm的 育苗 板，正反两面经过打磨处理，上下各打两个孔，穿 上吊绳。 6 种藻 6.1 选择标准 选取健壮、藻体大、中空、节溢缩明显、深褐色、表面具有 配子囊斑 的 个体做种藻 。 6.2 选择方法 采集种藻，用目 测法观察藻体的形态和色泽，用尺子测量藻体的长度，选取藻段用刀片切碎后镜检 配子囊成熟情况，将藻体放入水中进行配子放散，目测有烟雾状配子放出，取放散配子液，镜检视野 （
8、100）中 配子放散量超过 30 个 50 个即可进行配子的采集。 6.3 种藻用量 1 kg种藻可采 5 个育苗板，每个育苗板可采 10 m2的 采苗 网 。 7 合子 采集 7.1 采苗时间 海区自然 水温为 5 9 萱藻配子放散高峰期时进行采苗， 辽宁 地区一般为 4月上中旬。 7.2 阴干刺激 将挑选好的种藻在遮阳、通风处的水泥地面上阴干 2 h 3 h，藻体失水达 50 %以上时即可进 行配子 放散。 7.3 采苗方法 将阴干后的种藻装入 200目的筛 绢 网中 ， 放入装有海水的水槽或放散池内进行配子放散，搅动及光 照刺激有利于配子的放散。用吸管吸取配子液镜检配子的放散量，当每个视
9、野（ 100）配子的数量达 到 30 个 50 个以上时，捞出种藻放入 育苗板 及检查附着密度的载玻片，遮盖黑布防止附着不均。常温 下附着时间为 4 h 5 h，镜检每个视野（ 100）经雌雄配子结合形成的合子附着数量达到 20 个 30 个 以上，且附着牢固后即可将 育苗板 移入培育池培养。 8 盘状孢子体 室内 培养 DB21/T 3089 2018 4 8.1 培育期 从 4月上中旬合子 采集 至 10月份 游孢子 采集 ，持续约 6个月左右。 8.2 培养条件 8.2.1 水温 水温为 5 24 ，夏季连续高温期间可采取晚上换水，白天防爆晒，晚上开窗通风等措施降温， 单室孢子囊形成后，
10、应注意保温，换水时水温变化控制在 1 内 ，防止水温剧烈变化 。 8.2.2 光照 不同 发育时期光照调节见表 1，要避免直射光。 表 1 不同发育时期的光照调节 Tab.1 Light adjustment of different developmental stages 合子萌发期 盘状孢子体生长期 盘状孢子体成熟期 游孢子放散期 光时 （ h） 光强 （ lx） 光时 （ h） 光强 （ lx） 光时 （ h） 光强 （ lx） 光时 （ h） 光强 （ lx） 自然日照 800 1000 12 2500 3000 8 10 1000 1500 6 8 800 1000 8.2.3 营
11、养盐 不同时期营养盐需求量见表 2，保持育苗水体中 NaNO3为 10 mg/L 40 mg/L， KH2PO4为 5 mg/L 20 mg/L，盘状孢子体成熟期增加 KH2PO4的施肥量，施用的肥料符合 NY/T 394要求。 表 2 不同发育时期的 营养盐 调节 Tab.2 Nutrient adjustment of different developmental stages 营养盐（ mg/L） 合子萌发期 盘状孢子体生长期 盘状孢子体成熟期 游孢子放散期 NaNO3 10 15 30 40 10 15 0 5 KH2PO4 5 10 10 15 20 25 10 15 8.3 管理
12、 8.3.1 换水 合子采苗后每隔 5 d 7 d进行倒池换水，并且倒置育苗板。 8.3.2 光照调节 利用侧窗和天窗的窗帘和遮阳网进行光照的调节，夏季连续高温期及采苗前 1个月要降低光强和光 时。 8.3.3 洗刷 DB21/T 3089 2018 5 每次倒池换水时要洗刷培育池池底和池壁，合子采苗 25 d 30 d后，用软毛 刷或海绵轻轻刷洗采苗 板表面以清除附着的硅藻等杂藻，盘状 孢子体 进入成熟期后停止洗刷育苗板。 8.3.4 盘状体检查 a) 观察合子的萌发、盘状孢子体的生长、单室孢子囊形成的时间和数量、游孢子释放的时间和数 量、杂藻等。 b) 记录池水的水温、光照、营养盐、盐度；
13、 盘状孢子体发育情况；杂藻防治情况 及 倒池、洗刷、 换水等操作。 9 游孢子 采集 9.1 采苗 网处理 采苗 网 大小为 2 m 2 m， 孔径 6 cm 10 cm，直径 5 mm 8 mm， 新网使用前需要烤掉细毛，换水 浸泡 5 d 7 d后使用。 9.2 采苗时间 水温降至 18 以下， 辽宁 地 区一般为 10月 末 至 11月初。 9.3 采苗 9.3.1 刺激方法 采苗前黑暗处理盘状孢子体 6 d 7 d，然后在光 照 3000 lx 5000 lx、 水 温 降 低 2 3 及流水刺 激的条件下，可以使游孢子大量同步放散。 9.3.2 采苗 方法 将育苗室光线调至 3000
14、 lx以上，将采苗网和育苗板相间均匀铺至采苗池中，加入 15 16 降温 海水。采苗时搅动池水，保持池水的流动，并翻动、拉匀、对调上下网帘。 9.3.3 采苗密度 用吸管吸取孢子水，镜检每个视野（ 100）游孢子数量应达到 30 个 50 个，附着时间为 12 h 48 h， 剪取网绳，附着密度 达到 3 个 /mm 5 个 /mm以上 且附着牢固后 ， 将采苗网 移入培育 池 培育 。 10 幼苗室内培育 10.1 培育期 从 10月 末 采 游孢子 至 11月 中下旬幼苗出库 ，持续约 10 d 15 d左右。 10.2 培育方式 2 个 4 个 采苗 网重叠平挂在培育池培养。 10.3
15、培育条件 DB21/T 3089 2018 6 水温 10 18 ， 自然 光强 1000 lx 3000 lx， 添加 NaNO3， 30 mg/L 40 mg/L， KH2PO4， 10 mg/L 20 mg/L。 10.4 管理方法 采苗后每隔 3 d 5 d倒池换水 1次，并且上下对调 网 帘 ；幼苗出库前流水刺激 2 d 3 d。 10.5 出库规格 幼苗 平均长度达到 5 mm以上，且海水温度稳定在 18 以下时，幼苗可出海暂养。 11 海区 暂养 11.1 运输方法 少量、长途运输可以采用湿运法，即 将采苗网放到装有海水的塑料袋中，扎紧袋口后放入装有冰袋 的泡沫箱内，盖上箱盖并密
16、封后进行运输，将温度控制在 5 10 之间， 幼苗可存活 2 d 3 d；大量、 短途运输采用干运法，多使用汽车在气温较低的早上或傍晚进行，车厢用苫布封闭，如条件允许 可 使用 冷藏车，车厢内的温度控制 10 左右。 11.2 海区选择 暂养 海区以 风浪较小、水流通畅 为宜 。 11.3 暂养方法 11.3.1 暂养方式 暂养 网 帘 平挂在 浮筏 上 。 11.3.2 水 层 调节 在海区透明度 6 m 10 m的情况下，初挂水层为 1.5 m左右，暂养 10 d后将 网 帘的水层提高 0.5 m，暂 养 20 d左右再将水层提高 0.5 m。 11.3.3 暂养管理 勤摆动 和洗刷 网帘 ， 清除浮泥 、 杂藻 等 。 _
