1、 ICS 65.020.01 B 10 备案号： 59984-2018 DB15 内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 1475 2018 加速溶剂萃取 -液相色谱串联质谱法 测定土壤中 13 种除草剂残留量 Detection of 13 herbicide residues in soil by ASE-LC-MS-MS 2018-08-15 发布 2018-11-15 实施 内蒙古自治区质量技术监督局 发布 DB15/T 1475 2018 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草 。 本标准由内蒙古自治区农牧业科学院提出。 本标准由 内蒙古自治
2、区农业 标准化技术委员会 （ SAM/TC20） 归口 。 本标准起草单位：内蒙古 自治区 农牧业科学院 、赤峰市农畜产品质量安全监督站 。 本标准起草人： 张欣昕、张福金、姚一萍、李国 银、 张三粉、 王文 曦 、连海飞、刘广华、 刘建平、 邵海 。 DB15/T 1475 2018 1 加速溶剂萃取 -液相色谱串联质谱法 测定土壤中 13 种除草剂残留量 1 范围 本标准规定了土壤中 砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、莠去津、嗪草酮、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、丁 草胺、异丙草胺、二甲戊乐灵、异丙甲草胺、烟嘧磺隆 残留量的液相色谱 -串联质谱 测定方法。 本标准适用于土壤中 砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、
3、莠去津、嗪草酮、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、丁 草胺、异丙草胺、二甲戊乐灵、异丙甲草胺、烟嘧磺隆 残留量的 测定 。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 NY/T 52 土壤水分测定法 NY/T 1121.1 土 壤检测 第 1部分：土壤样品的采集、处理和贮存 3 原理 用 2 %的甲酸乙腈溶液，通过快速溶剂萃取土壤样品中的砜嘧磺隆等 13种除草剂，经液相色谱 -串联 质谱仪进行测定，外标法定量。 4 试
4、剂和材料 4.1 除另有规定外 ,所有试剂均为分析纯 ,实验 用水应符合 GB/T 6682 一 级水的标准。 4.2 乙腈：色谱纯。 4.3 甲酸：色谱纯。 4.4 2 % 甲酸乙腈溶液（体积分数）：取 2.0 mL 甲酸加乙腈稀释至 100 mL。 4.5 0.1% 甲酸溶液（体积分数）： 0.1 mL 甲酸加水稀释至 100 mL。 4.6 0.1 % 甲酸水 -乙腈溶液（ 90+10，体积比） 。 4.7 标准 品 砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、莠去津、嗪草酮、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、丁草胺、异丙草胺、二 甲戊乐灵、异丙甲草胺、烟嘧磺隆标准品：纯度 均 大于 98%。 4.8 标准溶液 D
5、B15/T 1475 2018 2 4.8.1 标准储备液 准确称取适量的砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、莠去津、嗪草 酮、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、丁草胺、 异丙草胺、二甲戊乐灵、异丙甲草胺、烟嘧磺隆标准品，用甲醇分别配制成 100 g/mL的标准储备液， 保存于 -18 冰箱内，可使用 6个月 。 4.8.2 混合标准储备 液 分别准确吸取 1.00 mL 砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、莠去津、嗪草酮、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、 丁草胺、异丙草胺、二甲戊乐灵、异丙甲草胺、烟嘧磺隆标准储备液至 10 mL容量瓶内，用甲醇稀释至 刻度，配制成 10 mg/L的混合标准储备液，于 -18 冰箱内避光保存，可使
6、用 3个月。 4.8.3 基质混合标准工作液 根据需要，用阴性样品基质系 列稀释混合标准工作液，使用前临时配制。 4.9 硅藻土 ： 二氧化硅含量大于 90% ， 密度 2.0 g/cm3 2.3 g/cm3。 4.10 微孔过滤膜（尼龙）： 13 mm 0.2 m 。 5 仪器和设备 5.1 液相色谱 -串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ ESI）。 5.2 加速溶剂萃取仪 ： 配有 34 mL 萃取池 。 5.3 分析天平：感量 0.01 mg 和 0.01 g。 5.4 旋转蒸发仪 。 5.5 涡旋混合器 。 6 试样制备 按照 NY/T 1121.1 中有关规定采集土壤 ,去杂质后充分混匀
7、 ,保存在 -18 冷冻冰箱中。按照 NY/T 52 标准要求，取新鲜土壤， 105 2 烘干冷却称重，测定土壤的水分含量 （ a） ,再计算土壤换算至烘干 的水分换算系数 F（ F=1-a） 。 7 测定步骤 7.1 提取 称取 10 g新鲜土壤 试样 (精确到 0.01 g)与 10 g硅藻土 （ 4.8） 充分混匀后，移入加速溶剂萃取仪的 34 mL 萃取池 中，设定加速溶剂萃取仪萃取条件：萃取溶剂为 2 %甲酸乙腈溶液 （ 4.3） ， 80 加热，静态萃 取时间 5分钟，循环次数 2次，冲洗体积为 60 %，氮气吹扫 100 s。 提取结束后，提取液转移至 250 mL梨 形瓶 中
8、， 在 40 水 浴中 ， 旋转浓缩至近干， 用 5.00 mL 0.1 % 甲酸水 -乙 腈 溶液 （ 4.4） 定容 ， 过 0.2 m 微孔过滤膜 后，待测 。 7.2 阴性样品提取液的制备 DB15/T 1475 2018 3 取不含待测物的阴性马铃薯和土壤样品 ， 按 7.1步骤制备阴 性样品提取液，用于配制基质混 合标准 工作液。 7.3 测定 7.3.1 液相色谱 -串联质谱法测定条件 具体如下： a) 色谱柱： C18， 100 mm 2.1 mm（内径），粒径 1.7 m； b) 流动相： 0.1 %甲酸溶液 （ 4.5） ， B：乙腈 （ 4.1） ，梯度洗脱见表 1； 表
9、 1 梯度洗脱表 时间 / min 流速 /（ mL/min） A / % B / % 0.00 0.35 95 5 1.00 0.35 70 30 3.00 0.35 20 80 4.00 0.35 5 95 6.60 0.35 95 5 10 0.35 95 5 c) 柱温： 40 ； d) 进样量： 1 L； e) 离子源 ：电喷雾电离（ ESI） ； f) 扫描方式：正离子扫描模式 ； g) 检测方式：多反应监测（ MRM） ； h) 电离电压： 2500 V； i) 离子源温度： 120 ； j) 雾化温度： 450 ； k) 锥孔气流速： 50 L/h； l) 雾化气流速： 650
10、 L/h； m) 待测物 保留时间、定性定量离子对及锥孔电压、碰撞能量见表 2。 表 2 13种除草剂保留时间、定 性定量离子对及锥孔电压、碰撞能量 待测物名称 保留时间 min 定性离子对 m/z 定量离子对 m/z 锥孔电压 V 碰撞电压 V 烟嘧磺隆 2.36 411.21182.04411.21213.21 411.21182.04 20 15 10 氯磺隆 2.75 358.04140.91358.04166.85 358.04140.91 12 18 16 砜嘧磺隆 2.71 431.99181.97431.99325.20 431.99181.97 25 25 25 苯磺隆 3.
11、62 413.12147.92413 413.12147.92 24 32 DB15/T 1475 2018 4 .12371.97 12 表 2 （续） 待测物名称 保留时间 min 定性离子对 m/z 定量离子对 m/z 锥孔电压 V 碰撞电压 V 扑草净 2.91 242.14157.89 242.14115.76 242.14157.89 52 22 28 莠去津 2.91 216.16174.09 216.16104.20 216.16174.09 40 20 20 嗪草酮 2.65 214.98187.03 214.98130.99 214.98187.03 10 15 20 甲草
12、胺 3.61 286.27253.97286.27176.02 286.27253.97 12 18 22 乙草胺 3.61 270.07147.93270.07237.96 270.07147.93 12 18 10 丁草胺 4.29 312.12162.04312.12238.15 312.12162.04 25 20 20 异丙草胺 3.82 284.15223.97 284.15148.00 284.15223.97 25 10 15 二甲戊乐灵 4.32 282.11211.91 282.11117.90 282.11211.91 16 14 18 异丙甲草胺 3.61 284.01
13、252.00284.01175.95 284.01252.00 16 12 24 7.3.2 定性测定 在 相同实验条件下进行样品测定时，如果样品中待测物质的色谱峰保留时间与标准品色谱峰保留时 间相差在 2.5%以内，且样品色谱图中 定性离子的 相对离子丰度 与浓度相近的基质标准工作液色谱图 中对应的定性 离子相对丰度 进行比较，相对 偏差 不超过表 3 规定的范围，则可判定样品中存在该种待测 物。 表 3 定性确证时相对离子丰度的最大允许误差（ %） 相对离子丰度 K 50 20 K 50 10 K 20 K10 允许最大偏差 20 25 30 50 7.3.3 定量测定 在仪器最佳工作条件
14、下，对基质混合标准工作液（ 4.8.3）进行色谱分析，以峰面积为纵坐标，基 质混合标准工作液浓度为横坐标绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，基质混合标准工 作液和试样中响应值均应在仪器测定的线性范围内。在上述色谱和质谱条件下，基质混 合标准工作液中 的各特征离子多反应监测（ MRM）色谱图参见附录 A中的图 A.1。 7.4 平行试验 按上述步骤，对同一试样进行平行试验测定。 DB15/T 1475 2018 5 7.5 空白试验 除不称取试样外，均按上述分析步骤进行。 8 结果计算 试样中待测组分的测定结果可由仪器工作软件计算，也可按式（ 1）计算： FmVcX 10001000
15、 （ 1） 式中： X 试样中待测组分 残留量， g/kg； c 从标准曲线得到的试样中 待 测组分的浓度， g /L； V 试样溶液定容体积， mL； m 试样的 质量 ， g ； F 土壤水分换算系数 ； 计算结果应扣除空白值，保留两位有效数字。 9 检出限、回收率和精密度 9.1 检出限 砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、莠去津、嗪草酮、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、丁草胺、异丙草胺、二 甲戊乐灵、异丙甲草胺、烟嘧磺隆在土壤中的检出限和定量限 参见附录 B中的 表 B.1。 9.2 回收率 在 10 g/kg 200 g/kg 添加浓度范围内，本标准土壤试样中砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、莠去 津、嗪草酮
16、、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、丁草胺、异丙草胺、二甲戊乐灵、异丙甲草胺、烟嘧磺隆残留 量的平均回收率参见附录 C中的 表 C.1。 9.3 精密度 在实验室内重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算数平均值的 10 %，在实验室 间再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算数平均值的 20 %。 DB15/T 1475 2018 6 附 录 A （资料性附录） 13种除草剂多反应监测（ MRM）色谱图 13种除草剂多反应监测（ MRM）色谱图 A.1如下： 1.砜嘧磺隆 2.氯磺隆 3.扑草净 4.莠去津 5.苯磺隆 6.甲草胺 7.丁草胺 8.异丙草胺 DB15/T 147
17、5 2018 7 图 A.1 13种除草剂多反应监测（ MRM）色谱图 9.二 甲戊乐灵 10.异丙甲草胺 11.烟嘧磺隆 12.乙草胺 13.嗪草酮 图 A.1 13种除草剂多反应监测（ MRM）色谱图 （ 续 ） DB15/T 1475 2018 8 附 录 B （资料性附录） 13种除草剂 检出限和定量限 数据表 13种除草剂检出限 和定量限 数据表见表 B.1。 表 B.1 13 种除草剂中文与英文名称、方法检出限和定量限数据 序号 中文名称 英文名称 检出限 g/kg 定量限 g/kg 1 砜嘧磺隆 rimsulfuron 0.4 4.0 2 氯磺隆 chlorsulfuron 1.
18、0 10 3 扑草净 prometryne 1.0 10 4 莠去津 atrazine 2.4 24 5 苯磺隆 tribenuron-methyl 3.0 30 6 甲草胺 alachlor 10 100 7 丁草胺 butachlor 6.0 60 8 异丙草胺 propisochlor 3.5 35 9 二甲戊乐灵 pendimethalin 9.0 90 10 异丙甲草胺 metolachlor 5.0 50 11 烟嘧磺隆 nicosulfuron 3.0 30 12 乙草胺 acetochlor 1.0 10 13 嗪草酮 metribuzi 0.5 5.0 DB15/T 1475
19、 2018 9 附 录 C （资料性附录） 13种除草剂 平均回收率 数据表 13种除草剂平均回收率数据表见表 C.1。 表 C.1 13 种除草剂 平均回收率 数据 序号 名称 添加浓度 g/kg 平均回收率 % 添加浓度 g/kg 平均回收率 % 1 砜嘧磺隆 20 82.0 100 97.6 2 氯磺隆 20 75.3 100 91.6 3 扑草净 20 88.3 100 93.0 4 莠去津 20 89.7 100 96.8 5 苯磺隆 20 84.0 100 85.0 6 甲草胺 20 82.3 100 88.0 7 丁草胺 20 83.1 100 89.2 8 异丙草胺 20 86.2 100 93.6 9 二甲戊乐灵 20 72.5 100 73.0 10 异丙甲草胺 20 95.2 100 93.6 11 烟嘧磺隆 20 91.2 100 93.6 12 乙草胺 20 87.3 100 92.0 13 嗪草酮 20 88.0 100 88.2
