1、ICS 65.020.20B 05 DB14山 西 省 地 方 标 准 DB 14/T 11642015奶牛乳腺炎综合防治技术规程 2015 -12- 20发布 2016- 01-20实施山西省质量技术监督局 发 布 DB14/T 11642015 I 目 次前言 .II1 范围 .12 规范性引用文件 .13 诊断 .14 预防 .25 治疗 .26 牛奶的处置 .3附录 A（资料性附录） 病原微生物实验室诊断方法 .4 附录 B（资料性附录） 加州乳腺炎检测法（CMT） .5 DB14/T 11642015 II 前 言本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。本标准由山西省农业科
2、学院提出并归口。本标准起草单位：山西省农业科学院畜牧兽医研究所、山西汇福科技发展有限公司新威科畜禽服务部。 本标准主要起草人：武守艳、韩一超、杨丽华、董春光、韩文儒、陈剑波。 DB14/T 11642015 1 奶牛乳腺炎综合防治技术规程1 范围本标准规定了奶牛乳腺炎综合防治的诊断、预防、治疗及牛奶的处理的要求。本标准适用于奶牛乳腺炎的综合防治。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 16549 畜禽产地检疫规范 GB 16568 奶牛场卫生规范GB/T
3、 16569 畜禽产品消毒规范NY/T 34 奶牛饲养标准NY 5046 无公害食品 奶牛饲养兽药使用准则NY 5047 无公害食品 奶牛饲养兽医防疫准则NY 5048 无公害食品 奶牛饲养饲料使用准则NY/T 5049 无公害食品 奶牛饲养管理准则3 诊断3.1 流行病学特点3.1.1 奶牛乳腺炎一年四季都有发生，气候潮湿的季节发病率会增高。 3.1.2 饲养环境卫生状况越差发病率越高。3.1.3 与奶牛胎次有关，任何胎次的奶牛均可发生，胎次越高发病率越高。3.1.4 与奶牛遗传因素有关，乳腺炎发病率高的奶牛，下一代发病率也会高。3.1.5 挤奶方式和消毒卫生程序不合适发病率会增高。3.2
4、临床诊断3.2.1 突然发病，乳房发红、肿胀、变硬、疼痛，乳汁显著异常和减少，出现全身症状。病牛体温升高，食欲减退，反刍减少，脉搏增速，脱水，全身衰弱、沉郁。3.2.2 病牛一般没有全身症状，最明显的异常是乳汁中有絮片、凝块，并呈水样。乳房有轻微发热、肿胀和疼痛。有些出现乳房萎缩或者出现硬结。3.3 实验室诊断3.3.1 实验室诊断指标 3.3.1.1 牛奶在培养基上有菌落生长，经全自动微生物分析仪鉴定出细菌种类。 DB14/T 11642015 2 3.3.1.2 用 CMT 法检测，盘底出现少量黏性沉淀物。3.3.2 实验室诊断方法参见附录 A、附录 B。3.4 确诊根据流行病学特点、临床
5、症状可作出初步诊断，经实验室诊断予以确诊 。符合 3.2.1或 3.2.2确诊为临床型乳腺炎。既没有 3.2.1也没有 3.2.2的症状，符合 3.3.1.1或 3.3.1.2确诊为亚临床型乳腺炎（隐性乳腺炎）。4 预防4.1 环境卫生 牛场的环境建设与控制按 NY/T 5049的规定执行。4.2 饲养管理4.2.1 根据奶牛的营养需要饲喂，按照 NY/T 34 的规定执行。4.2.2 挤奶操作应按 GB 16568 的规定执行。4.2.3 奶牛干乳前的处理按 NY 5047 的要求实施，停乳后要随时观察乳房，发现异常应立即处理。4.2.4 在干乳期，每头奶牛每天供应 1.0 g 维生素 E
6、和不超过 0.3 mg/kg 日粮的硒。4.2.5 上机挤奶：奶牛进入挤奶厅后尽快套上奶杯，挤奶过程中观察真空稳定情况和挤奶杯组奶流情况，适当调整挤奶杯组的位置。4.3 监测每月对每头泌乳牛进行奶牛乳腺炎检测。对隐性乳腺炎的监测方法参见附录B，并根据监测结果采取相应措施，监测记录存档；对临床型乳房炎要及时治疗，并保存诊疗记录。 4.4 消毒4.4.1 对牛舍内消毒每周一次，舍外每月两次。4.4.2 选用合适的药物药浴乳头；对病牛污染的场所、用具、物品，特别是挤奶设备进行清洗和严格消毒。4.5 引进监测应符合 GB 16568要求。5 治疗5.1 临床型乳腺炎的治疗5.1.1 隔离 对患病奶牛实
7、施隔离，对病牛接触过的一切用具及环境按 NY T 5049执行。5.1.2 治疗 DB14/T 11642015 3 对已经确诊的病牛，应根据致病因素采取有效治疗措施，按照对因治疗辅以对症治疗相结合的原则，防止病原扩散。兽药的使用应符合 NY 5046的要求。5.1.2.1 对因治疗应依据采集的乳汁样品病原培养、药敏实验结果为高度敏感药物选用抗生素药物。5.1.2.2 对症治疗急性病例乳腺发热和疼痛感严重的患牛，需采用乳房外冷敷疗法。5.1.2.3 辅助性治疗对于亚急性和慢性病例，采取缓解乳房的肿胀，改善乳房局部血液循环，乳房按摩、增加挤乳次数、外敷透皮药物等方法。 5.2 亚临床型乳腺炎（隐
8、性乳腺炎）治疗隐性乳腺炎患牛是本病重要的传染源。对已诊断为亚临床型乳腺炎的病牛应隔离观察，长期CMT阳性、乳汁表现异常、产奶量低、反复发作的病牛，应及时淘汰。干乳前10d进行隐性乳房炎监测，对阳性反应在 “ ”以上的牛及时治疗，干乳前3 d再监测1次，阴性反应方可停乳。6 牛奶的处置临床型和隐性乳腺炎患牛的奶要挤入专用容器内，集中销毁，应严格执行休药期和弃奶规定；对发病区的奶源进行严格监测，防止病原污染牛奶进入制冷罐、乳品加工企业和消费市场。 A DB14/T 11642015 4 附 录 A（资料性附录）病原微生物实验室诊断方法A.1.奶样的采集采样时先用温水冲洗乳房，然后用0.1%的新洁尔
9、灭溶液清洗整个乳房，最后用75%酒精擦拭乳头，采样者同时进行手指擦拭消毒，待干后，每个乳头先挤去前3把乳汁，然后以无菌操作的方法每个乳区挤取奶样约10 mL，放入灭菌试管中，标明牛号、乳室、日期，立即送回实验室检测（不超过4h）。A.2.病原菌的分离培养试验将样品摇匀后，取 5 mL置于灭菌离心管中 3 000r/min离心 10 min，弃去离心管中的上层液体，留取底部沉淀物，无菌操作吸取沉淀物 0.1 mL，分别接种于鲜血琼脂培养基、普通琼脂培养基、 SS琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基， 37 恒温箱内培养 24 h，观察生长情况和菌落特征，挑取菌落进行涂片，革兰 氏染色，镜检，根据菌落特征
10、、溶血情况、染色特性及菌体形态，初步判定细菌类属，并将其进一步纯化培养。A.3.病原菌的鉴别培养及形态观察 根据细菌生长情况，菌落的形态特征及染色特性，将可疑单菌落接种于血清琼脂平板、伊红美蓝培养基、麦康凯培养基中进行鉴别培养，于 37 恒温箱中培养 24 h，进一步观察其生长特性并再次纯化培养，直到平板培养的为单个纯菌落，将其保存待菌种鉴定。A.4.病原菌的鉴定将保存的细菌使用VITEK全自动微生物分析仪进行生化分析。A.5.药敏试验选取典型的分离菌株用纸片法进行药物敏感性试验，参考世界临床实验室标准委员会（NCCLS）推荐的纸片扩散标准判定结果。药物敏感试验参照下表 表 A.1 药物敏感试
11、验判定标准抑菌圈直径（mm） 敏感度20以上 极敏1520 高敏1014 中敏10以下 低敏0 不敏 DB14/T 11642015 5 AB附 录 B（资料性附录）加州乳腺炎检测法（CMT）CMT是加州奶牛乳腺炎试验的简称，即首先在美国加利福尼亚州使用的一种乳腺炎检测试验。它是通过间接测定乳中体细胞数 (SCC)来诊断隐性乳腺炎的方法。其原理是在表面活性物质和碱性药物作用下，乳中体细胞被破坏，释放出 DNA，进一步作用，使乳汁产生沉淀或形成凝胶。体细胞数越多，产生的沉淀或凝胶也越多，从而间接诊断乳腺炎和炎症的程度。该法是国际通用的隐性乳腺炎诊断方法， 其特点是简便、快速。B.1.试剂和方法
12、CMT检测中用到的试剂和方法如下：十二烷基磺酸钠 30 g溶解于 1 000 mL蒸馏水，用 2 mol/L的氢氧化钠调节 pH等于 6.4，加入溴甲酚紫 0.1 g，即成 CMT检验液，取乳腺炎诊断盘 1只，滴加被检乳 2 mL，诊断液 2 mL，缓缓作同心圆状摆。市售成品 CMT诊断试剂或者其他方法的成品试剂，按照说明操作。B.2.判定标准表B.1给出了奶牛乳腺炎CMT法的判定方法及标准。 表 B.1 CMT法的判定方法及标准反应状态 被检乳 反应判定 体细胞数 (千 mL)混合物呈液体状，倾斜检验盘时，流动流畅，无凝块。 阴性 0200混合物呈液体状，盘底有微量沉淀物，摇动时消失 可疑 200500盘底出现少量黏性沉淀物，非全部形成凝胶状，摇动 时，沉淀物散布于盘底，有一定的黏性。 弱阳性 500800全部呈凝胶状，有一定黏性，回转时向心集中，不易散开。 阳性 8005 000混合物大部分或全部形成明显的胶状沉淀物，黏稠，几乎完全黏附与盘底，旋转摇动时，沉淀集于中心，难以散开。 强阳性 5 000_
