1、ICS 11.120.20 C 30 DB13 河北省 地方标准 DB 13/T 5127.8 2019 植入性医疗器械 高分子材料 浸提液 中有毒有害物质的测定 第 8 部分：对苯 二甲酸迁移量 高效液相色谱 法 2019 - 12 - 27 发布 2020 - 01 - 28 实施 河北省市场监督管理局 发布 DB13/T 5127.8 2019 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 DB13/T 5127植入性医疗器械 高分子材料 浸提液中有毒有害物质的测定共分 16个部分： 第 1部分：柠檬酸钠和乙二胺四乙酸二钾迁移量 原子吸收分光光度法； 第 2部分：二
2、巯基丙醇迁移量 碘量法； 第 3部分：葡萄糖迁移量 碘量法； 第 4部分：柠檬酸迁移量 酸碱中和滴定法； 第 5部分：硫氰酸胍迁移量 分光光度法； 第 6部分：丙酮迁移量 气相色谱法； 第 7部分：丙交酯迁移量 气相色谱法； 第 8部分：对苯二甲酸迁移量 高效液相色谱法； 第 9部分：乙醇迁移量 气相色谱法； 第 10部分：环氧乙烷迁移量 气相色谱法； 第 11部分：戊二醛 迁移量 高效液相色谱法； 第 12部分：异氰酸酯迁移量 高效液相色谱法； 第 13部分：甲醛迁移量 气相色谱质谱联用法； 第 14部分：蛋白质迁移量 可见 -紫外分光光度法； 第 15部分： 铅、砷、镉、铬、铜、锑、钡、铝
3、、锌、锡 迁移量 电感耦合等离子体质谱法； 第 16部分：生物负载 薄膜过滤法。 本部分为 DB13/T 5127的第 8部分。 本部分由河北省药品监督管理局提出并归口。 本部分起草单位：河北省医疗器械与药品包装材料检验研究院。 本部分主要起草人： 刘若锦、邵文亮、王丽、王志 永、刘华、杨光、冯香萍、周丽。 DB13/T 5127.8 2019 1 植入性医疗器械 高分子材料 浸提液中有毒有害物质的测定 第 8 部分：对苯二甲酸迁移量 高效液相色谱法 1 范围 本 标准规定了植入性医疗器械高分子材料浸提液中 对苯二甲酸迁移量 的 高效液相色谱 法 的测定 方 法。 本标准适用于植入性医疗器械高
4、分子材料浸提液中 对苯二甲酸迁移量 的测定。 本方法 对苯二甲酸 的检出限为 0.5 mg/L。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件 的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件，仅 注日期的版本适用于本文 件 。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括 所有的修改单 ）适用 于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和实验方法 GB/T 16886.12 医疗器械生物学评价 第 12部分：样品制备与参照材料 3 方法原理 浸提液 中的 对苯二酸 通过高效液相色谱柱进行分离，采用 紫外 检测器进行检测 。 甲醇 浸提液直接 进样。采用外标法定量 。 4 试剂与 材料 除另有规定，所有
5、试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682规定的一级水。 4.1 对苯二甲酸标准 品：纯度大于 99 %。 4.2 邻苯二甲酸标准 品：纯度大于 99 %。 4.3 甲醇：分析纯。 5 仪器 与 设备 5.1 高效液相色谱仪，配有紫外检测器或二极管阵列检测器 。 5.2 电子天平 ，精度 0.1 mg。 5.3 色谱柱： ODS 250 mm4.6 mm5 m，或相当者 。 5.4 0.45 m 滤膜。 DB13/T 5127.8 2019 2 6 试液制备 6.1 浸提试验 6.1.1 浸提溶液 本标准采用极限浸提方式，以甲醇为浸提介质。 6.1.2 浸提 条件 和方法 6.1.2.1 浸提
6、条件建立在通常可行并经论证为一个标准 化 方法的基础之上，在多数情况下为产品使用 的适当加严的条件 。应 在下列之一的条件下进行浸提 ： a) (371) ,(242) h； b) (371) ,(722)h； c) (502) ,(722) h； d) (702) ,(242) h； e) (1212) ,(10.1)h。 6.1.2.2 可用标准表面积确定所需的浸提介质 的 体积。标准表面积包括样品两面面积 的总和 ，不包括 不确定和不规则面积。当由于样品外形不能确定其表面积时，应使用质量 /浸提液体积。见表 1。 表 1 标准表面积和浸提液体积 材料形态举例 厚度 （ mm） 浸提比例
7、（表面积或质量 /体积） 10% 膜、薄片、管壁 0.5 6 cm2/ mL 管壁、厚板、小型模制件 0.5 1.0 3 cm2/ mL 大型模制件 1.0 3 cm2/ mL 弹性 密封件 1.0 1.25 cm2/ mL 粉剂、球体、泡沫材料、无吸收性模制件 不规则形状固体器械 0.2 g/ mL 薄膜、 织物 不规则形状多孔器械（低密度材料） 0.1 g/ mL 注 1： 现在尚无测试吸收剂和水胶体的标准化方法，推荐以下方案： 注 2： 测定材料浸提介质吸收量（ 每 0.1 g或 1.0cm2 材料所 吸收的量） ； 注 3： 在进行浸提时，对浸提混合物按每 0.1 g或 1.0 cm2
8、 额外 加入该浸提介质吸收量。 6.1.2.3 对于 弹性体 、涂层 材料、复合材料、多层材料等，由于完整表面与切割表面存在潜在的浸提 性能差异 ，因此应尽量完整地进行浸提。 6.2 标准工作液制备 对苯二甲酸标准储备溶液（ 500 mg/L）：准确称取 50 mg（精确至 0.1 mg）对苯二甲酸标准品，加 入 90 mL甲醇使其溶解，将溶液加热至 50 ，持续 1 h，使对苯二甲酸充分溶解。待溶液冷却后转移至 100 mL容量瓶，用甲醇定容。 邻苯二甲酸内标储备溶液（ 1 000 mg/L） ：准确称取 0.1 g（精确至 0.1 mg）邻苯二甲酸标准品， 用 10 mL甲醇溶解，然后将溶
9、液转移至 100 mL容量瓶中并以 异丙醇定容。 对苯二甲酸标准中间溶液：分别于 6只 25 mL容量 瓶中加入 0 mL、 1.0 mL、 2.0 mL、 5.0 mL、 10.0 mL、 20.0 mL对苯二甲酸标准储备溶液，再分别加入 5 mL邻苯二甲酸内标储备溶液，用甲醇定容。对苯二甲 DB13/T 5127.8 2019 3 酸标准中间溶液的浓度分别为 0.0 mg/L、 20 mg/L、 40 mg/L、 100 mg/L、 200 mg/L、 400 mg/L。内标 邻苯二甲酸的浓度均为 200 mg/L。应当天配制。 邻苯二甲酸内标中间溶液：取 5 mL邻苯二甲酸内标储备液于
10、25 mL容量瓶中，用甲醇定容，浓度为 200 mg/L。 6.3 空白液制备 以同批浸提介质作为空白试 验液。 7 测定 7.1 仪器 参考 条件 根据所用仪器型号 选择最佳测定条件。 参考条件 ： 流动相： 0.1 mol/L磷酸二氢铵， 10%的乙腈， pH 4.3； 流速： 1.0 mL/min； 进样量： 10 L； 检测波长： 242 nm； 柱温：室温 。 7.2 标准曲线和 样品测定 按照上述所列测定条件， 对 标准工作溶液 和浸提液 进行 测定。以标准工作溶液中对苯二酸浓度为 横坐标，以对苯二酸的峰面积与邻苯二甲酸峰面积的比值为纵坐标，绘制标准工作曲线，得到线性方 程。 浸提
11、液中对苯二甲酸参考色谱图见附录 A。 8 结果 计算 浸提液中 对苯二甲酸的 含量按 公式（ 1） 计 算 。 （ 1） 式中： C 浸提液中对苯二甲酸的浓度，单位为毫 克每升（ mg/L） ； y 浸提液中苯二酸的峰面积与邻苯二甲酸峰面积的比值； a 回归曲线的斜率； b 回归曲线的截距； 稀释倍数。 样品中 对苯二甲酸 的特定迁移量按公式（ 2）计算。 1000 A CM （ 2） 式中： M 特定迁移量， mg/cm2或 mg/g； A 浸提比例， cm2/ mL或 g/mL。 计算结果以平行测定值的算术平均值表示，保留三位有效数字。 DB13/T 5127.8 2019 4 9 确证试
12、验 若对苯二甲酸的特定迁移量超过了限量要求，可采用离子交换色谱柱，将 浸提 液和标准溶液重新 进行高效液相色谱分析、验证。 色谱 参考 条件：离子交换色谱柱：三甲基铵交换剂，或相当者 ； 流动相：溶解氯化铵 10.7 g于 500 mL水中，用 5 %四硼酸二钠调 pH值 7.8 8.0，加水至 1 L； 流速： 2 mL/min。 10 精密度 浸提液中 目标物 在重复性条件 下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 10%。 DB13/T 5127.8 2019 5 附 录 A （资料性附录） 浸提液中对苯二甲酸参考色谱图 浸提液中对苯二甲酸参考色谱图 见 图 A.1。 说明： 1-邻苯二甲酸； 2-对苯二甲酸。 图 A.1 浸提液中对苯二甲酸参考色谱图 _
