1、ICS 65.020 B 16 DB13 河北省 地方标准 DB 13/T 2755 2018 康氏粉蚧检疫鉴定方法 2018 - 07 - 16 发布 2018 - 08 - 16 实施 河北省质量技术监督局 发布 DB13/T 2755 2018 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.12009给出的规则起草。 本标准由河北出入境检验检疫局提出。 本标准起草单位:河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心,河北省食品检验研究院。 本标准主要起草人:娄巧哲、刘红冉、王建昌、李静、孙晓霞、商建成、 李海云、 胡连霞、崔佳 玉、谷青。 DB13/T 2755 2018 1 康氏粉蚧检疫鉴定方法 1 范
2、围 本标准规定了康氏粉蚧 Pseudococcus comstocki (Kuwana)的 检疫鉴定 方法 。 本标准适用于 植物 及其产品 中康氏粉蚧的检疫和鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅 注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 28983-2012 南洋臀纹粉蚧 检疫鉴定方法 3 术语和定义 GB/T 28983界定的 术语和定义适用于本文件。 3.1 蕈状腺 oral rim duct 圆柱状腺的一种,与管 状腺相似,所不同之处在于管筒的腺口周围有一圈突出的角质
3、状的、呈半 球形的突起,很像蘑菇,因此称为蕈状腺。 4 康氏粉蚧 的基本信息 学名: Pseudococcus comstocki (Kuwana) 中文名: 康氏粉蚧 英文名: comstock mealybug 分类地位: 昆虫纲( Insecta)、半翅目( Hemiptera)、粉蚧科( Pseudococcidae)、粉蚧属 ( Pseudococcus)。 康氏粉蚧寄生于 植物 的叶、果、新稍、枝、茎干及根和肉质根上刺吸危害。康氏粉蚧主要分布在 包括中国(东北、华北、华南、 西南、台湾等地)在内的亚洲、大洋洲、美洲和欧洲的多个国家和地 区,是危害苹果、梨、柑、梓、桑、柚、橙等水果和
4、经济作物的重要害虫。(参见附录 A) 5 方法原理 根据康氏粉蚧的分布、寄主及危害状、生物学特性进行寄主检查,依据雌成虫的形态特征进行种 类鉴定。 6 器材和试剂 DB13/T 2755 2018 2 6.1 器材 与用具 放大镜、体视显微镜、生物显微镜、测微尺、离心管、自封袋、温箱、电陶炉、小烧杯、小试管、 小镊子、解剖针、解剖刀、小毛笔、吸管、凹面皿、载玻片、盖玻片、标签 、烘箱 。 6.2 试剂 乙醇 -甘油保存液( 70 %乙醇和甘油以 50: 1的 体积比 配置而成 )、 75%乙 醇、 95%乙醇、 100%乙醇、 氢氧化钠或氢氧化钾、蒸馏水、酸性品红、乳酸、冰醋酸、无水乙醇、丁香
5、油、加拿大树脂。 7 寄主检查 对可能感染康氏粉蚧的 植物及其产品 进行检查 ,重点检查果实的果柄、果蒂及 茎干粗翘皮下、枝 条、 腋芽、叶鞘等处,寄生部位常伴有白色的蜡粉或蜡丝等分泌物。 如发现疑似虫体 , 用小毛笔挑起 放入装有乙醇 -甘油保存液的离心管中,或连同寄主植物 或部分器官、组织 一起置于自封袋中,贴好信 息标签,带回实验室镜检 ,样品传递过程中,要固定好寄主 。 8 标本制作 玻片标本制作方法参见附录 B。 9 形态鉴定 9.1 鉴定方法 首先 观察 蚧 虫田间特征 , 再 使用生物显微镜观察玻片标本的形态特征,使用目镜测微尺或摄像软 件 中 的测量工具测量 长、宽等 。 9.
6、2 粉蚧属( Pseudococcus Westwood)形态鉴定特征 粉蚧属具有以下形态特征 ( 参 见附录 C) : 雌 成虫体外覆盖 白色或淡黄色的蜡粉 , 腹部末端 和 虫体 周 缘 具 蜡刺 呈放射状伸出; 雌成虫虫体宽椭圆形; 尾瓣上无硬化棒; 触角 8节,少数 7节; 足发达,爪无细齿 , 后足常有透明孔; 腹脐有或无 , 有前、后背孔; 刺孔群 12 17对,大多数刺孔群有锥刺 2根,少数刺孔群有锥刺 3根;尾瓣刺孔 群着生在硬化 区上;刺孔群一般具有附毛,有时末前对的前面刺孔群无附毛; 具三格腺、多格腺、 管状腺和蕈状腺, 蕈状 腺 一般在背面,若无,则会在腹面分布 。 9.
7、3 康氏粉蚧 Pseudococcus comstocki (Kuwana)形态鉴定特征 9.3.1 雌成虫 康氏粉蚧雌成虫具有以下形态特征 ( 参 见附录 C和附录 D) : 体呈扁椭圆形,体长 3 6 mm,无翅 ; DB13/T 2755 2018 3 虫体外被白色蜡质分泌物覆盖,体缘具 17对白色蜡刺,腹部末端 1对几乎与体长相等 ; 触角 8节,也有 7节者,第 2、 3和顶端节较长 ; 足细长,后足基节具数量很多的透明 孔,股节和胫节上也有少量透明孔 ; 腹脐 1个,较大,椭圆形 ; 肛环刺 6根 ; 尾瓣发达而突出于虫体末端之外 , 尾瓣腹面具有不显著的硬化片,其顶端生有 1根尾
8、瓣刺,在 尾瓣刺之上方生有几根刺毛 ; 体毛数量很多,分布在虫体背和腹两面,沿背中线着生的体毛较长 ; 刺孔群 17对,分别标记为 C1、 C3、 C4 C18。刺孔群 C1和 C3具 34根刺,刺孔群 C4具 24根刺,刺 孔群 C5和 C9具 23根刺,刺孔群 C6具 23根刺,刺孔群 C7具 25根刺,刺孔群 C8和 C10具 2根刺,刺孔群 C11具 12 根刺,有的个体无刺孔群 C11,刺孔群 C12C15具 2根刺,刺孔群 C17具 2根刺,很少具 3根刺者,刺孔群 C18具 2 根较粗的圆锥形刺,整个 C18均着生在较大的硬化片上,每个刺孔群皆生有附助刺毛 ; 三格腺 分布在虫体
9、背和腹两面,刺孔群 C18所具之 三格腺 在刺的周围密集成群 ; 多格腺 在腹部腹板上常集成横列,除此之外,还在头胸部腹面稀少分布或成小群分布 ; 蕈状腺 10对以上,在虫体背面各节几乎均有分布,在腹面主要沿胸部边缘分布,在第 2腹节边 缘也常有分布 ; 管状腺数量不多,在刺孔群 C17和 C18之间常成群分布,在背面中部常单个分布。 9.3.2 雄成虫 体长约 2.0 mm,翅展约 2.0 mm。紫褐色,触角和胸背中央色淡。前翅发达透明,后翅退化为平衡 棒。尾毛长。 9.3.3 若虫 1龄椭圆形,长 0.5 mm,浅橙黄色 ,非常活泼 。 2龄体长 1.0 mm, 被白蜡粉,体缘出现蜡刺 ,
10、取食 相对固定, 2龄末期出现雌雄分化,雄性体扁,雌性体饱满 , 3龄 雌若虫 体长 1.7 mm, 与雌成虫相似。 雄若虫则分泌白色蜡丝做茧化蛹。 9.3.4 蛹 体长 1.2 mm, 初期淡灰色,后期深灰色 。茧长椭圆形,长 2.0 2.5 mm,白色绵絮状。 9.3.5 卵 椭圆形,长 约 0.3 mm。 浅橙黄被白色蜡粉。 卵囊白色絮状。 10 结 果判定 以雌成虫形态特征为依据,其余特征作参考,符合 9.3.1的描述 即可鉴定为康氏粉蚧。 11 标本保存 玻片右侧粘贴定名标签,注明鉴定结果(学名、中文名、鉴定人和鉴定日期),移入标本柜中保 存。 DB13/T 2755 2018 4
11、附 录 A (资料性附录) 康氏粉蚧的地理分布、寄主和生物学特性 A.1 地理分布 吉林、辽宁、内蒙古、宁夏、西藏、北京、山东、山西、河北、河南、浙江、福建、湖北、湖南、 江西 、广东 、广西、 四川、云南 、香港、 台湾 ;日本,朝鲜,韩国,土库曼斯坦,乌兹别克斯坦,塔 吉克斯坦,吉尔吉斯斯坦,哈萨克斯坦,印度,斯里兰卡,越 南,泰国,柬埔寨,印度尼西亚,亚美 尼亚,伊朗,格鲁吉亚,阿塞拜疆,阿富汗,乌克兰,葡萄牙,摩尔多瓦,俄罗斯,澳大利亚,密克 罗尼西亚联邦,圣赫勒拿,美国,加拿大,墨西哥,阿根廷。 A.2 寄主 表 A.2 寄主 科 属或种 蔷薇科 Rosaceae 栒子属 Coton
12、easter sp., 苹果属 Malus sp.,苹果 Malus pumila,森林苹果 Malus sylvestris , Persica vulgaris, 李属 Prunus sp., 梅 Prunus mume , 梨属 Pyrus sp., 西洋梨 Pyrus communis ,沙梨 Pyrus pyrifolia , Pyrus serotina culta 芸香科 Rutaceae 柑桔属 Citrus sp.,酸橙 Citrus aurantium,柠檬 Citrus limon,柚 Citrus maxima,橙Citrus sinensis 桑科 Moraceae
13、律草属 Humulus sp., 律草 Humulus scandens, 桑属 Morus sp., 桑 Morus alba, 无花果 Ficus carica 葫芦科 Cucurbitaceae 香瓜 Cucumis melo var. makuwa,黄瓜 Cucumis sativus,南瓜 Cucurbita moschata,西瓜 Citrullus lanatus 禾本科 Gramineae 须芒草属 Andropogon sp., 华箬竹属 Sasamorpha sp., 玉蜀黍属 Zea sp., 甘蔗 Saccharum officinarum 樟科 Lauraceae 樟
14、属 Cinnamomum sp.,樟 Cinnamomum camphora, Fiwa japonica , Krauhnia sp. 菊科 Compositae 蒿属 Artemisia sp.,艾 Artemisia argyi, 百日菊 Zinnia elegans 山茶科 Theaceae 山茶属 Camellia sp.,山茶 Camellia japonica,油茶 Camellia oleifera 榆科 Ulmaceae 山黄麻属 Trema sp., 山黄麻 Trema orientalis, Celtis willdenowiana 冬青科 Aquifoliaceae 冬
15、青属 Ilex sp., 枸骨 Ilex cornuta , Ilex crenata microphylla 紫葳科 Bignoniaceae 梓属 Catalpa sp.,梓 Catalpa ovata 豆科 Leguminosae 鹰嘴豆属 Cicer sp., 刺桐 Erythrina variegata 毛茛科 Ranunculaceae 铁线莲属 Clematis sp.,铁线莲 Clematis florida 茜草科 Rubiaceae 咖啡属 Coffea sp., 栀子 Gardenia jasminoides 紫葳科 Bignoniaceae 榅桲 Cydonia obl
16、onga, Cydonia sinensis 虎耳草科 Saxifragaceae 绣球属 Hydrangea sp., Deutzia parviflora typica 天南星科 Araceae 花叶万年青 Dieffenbachia picta, 龟背竹 Monstera deliciosa 木犀科 Oleaceae Forsythia koreana , Ligustrum ibota angustifolium DB13/T 2755 2018 5 表 A.2 寄主 (续) 科 属或种 仙人掌科 Cactaceae 霸王花 Hylocereus undatus , 仙人掌 Opunt
17、ia dillenii 忍冬科 Caprifoliaceae 忍冬属 Lonicera sp., 日本珊瑚树 Viburnum awabuki 桑寄生科 Loranthaceae 桑寄生属 Loranthus sp., 桑寄生 Loranthus parasiticus 石松科 Lycopodiaceae 松属 Pinus sp., Pinus thunbergiana 大戟科 Euphorbiaceae 蓖麻属 Ricinus sp., 蓖麻 Ricinus communis 红豆杉科 Taxaceae 红豆杉属 Taxus sp., 日本榧树 Torreya nucifera 葡萄科 Vi
18、taceae 葡萄属 Vitis sp., 葡萄 Vitis vinifera 槭树科 Aceraceae 槭属 Acer sp. 七叶树科 Hippocastanaceae 七叶树属 Aesculus sp. 楝科 Meliaceae 米仔兰 Aglaia odorata 桦木科 Betulaceae 日本桤木 Alnus japonica 琴钩虾科 Lysianassidae 朱顶红 Amaryllis vittata 藜科 Chenopodiaceae 甜菜 Beta vulgaris 黄杨科 Buxaceae Buxus microphylla 壳斗科 Fagaceae 栗属 Cast
19、anea sp. 景天科 Crassulaceae Crassula tetragona 伞形科 Umbelliferae 胡萝卜 Daucus carota var. sativa 卫予科 Celastraceae 卫矛 Euonymus alatus 五加科 Araliaceae 八角金盘 Fatsia japonica 银杏科 Ginkgoaceae 银杏 Ginkgo biloba 千屈菜科 Lythraceae 紫薇 Lagerstroemia indica 无患子科 Sapindaceae 荔枝 Litchi chinensis 茄科 Solanaceae 番茄 Lycopersi
20、con esculentum 芭蕉科 Musaceae 芭蕉属 Musa sp. 芸香科 Rutaceae 日本常山 Orixa japonica 露兜树科 Pandanaceae 露兜树属 Pandanus sp. 杨柳科 Salicaceae 杨属 Populus sp. 石榴科 Punicaceae 石榴 Punica granatum 鼠李科 Rhamnaceae 鼠李属 Rhamnus sp. 杜鹃科 Ericaceae 迎红杜鹃 Rhododendron mucronulatum A.3 生物学特性 康氏粉蚧寄生于 植物 的叶、果、新稍、枝、茎干及根和肉质根上 , 常严重危害。在河
21、北一生可发 生 3代,以卵在各种缝隙及土缝中越冬。 寄主萌动发芽时卵开始孵化分散为害,第 1代若虫盛发期为 5 月中下旬, 6月上旬至 7月上旬陆续羽化,交配产卵 。第 2代若虫 6月下旬至 7月下旬孵化,盛期为 7月中 下旬, 8月上旬至 9月上旬羽化,交配产卵。第 3代若虫 8月中旬开始孵化, 8月下旬至 9月上旬进入盛期, 9月下旬开始羽化 , 交配 后 产卵越冬 。雌雄虫交配后,雌成虫爬到枝干粗皮裂缝中或果实萼洼、梗洼等 DB13/T 2755 2018 6 处产卵,有的将卵产在土内。产卵时,雌虫分泌大量白色絮状蜡丝,形成卵囊,卵产于其中,每雌可 产卵 200 400粒,产卵完毕雌虫体
22、逐渐干瘪死亡。成虫和若虫为害叶、果、新稍、枝、茎干等,套袋 梨危害较重,若虫常聚集或单个在柄洼及萼洼处危害,分泌蜜露造成霉菌滋生。梨入冷库后若虫不耐 低温,数 十天后即 死亡。 DB13/T 2755 2018 7 附 录 B (资料性附录) 粉蚧玻片标本制作方法 B.1 标本固定 挑取样品上的蚧虫置入 75%乙醇中固定 2 h,以备制作玻片标本。如需长期保存,则保存于乙醇 - 甘油保存液中。 B.2 脱脂透明 选取经固定的成熟虫体,用解剖刀在虫体背部中央纵向切开 1/2体长的口子,若为较干燥的虫体, 加热回软后再切开,移入加有 10%氢氧化钠或 10 %氢氧化钾溶液的敞口小试管中,小试管放入
23、装有蒸馏 水的小烧杯中,用电陶炉加热小烧杯至蒸 馏水沸腾,沸腾持续 5 min 10 min,直至体表和虫体内含物 分离,内含物将近融化,使用吸管将虫体移入盛有蒸馏水的凹面皿中,用解剖针、小镊子、小毛笔等 轻轻挤压、清理虫体,直至彻底清除内含物、虫体变为清澈透明。加热还可用水浴、温箱等方法,脱 脂时间以标本透明为准。 B.3 脱碱 把脱脂透明的虫体移入装有热蒸馏水的小试管中再次水浴 5 min,以清除虫体表面和内部的碱液。 B.4 染色 将脱碱后的虫体移入酸性品红饱和溶液(蒸馏水:甘油:乳酸为 1:1:1的酸性品红饱和溶液)中染 色,也可用其他染料使虫体着色,染色 时间视标本着色情况而定,一般
24、在 1 h以上;用 75%乙醇洗掉多 余染色剂,再依次移入 95%、 100%乙醇中脱水,视染色程度浸泡 1 min 3 min,洗去浮色,但不能停留 过久。 B.5 固色 移入冰醋酸中 1 h,再移入丁香油中 1 h以固色。 B.6 封片 在载玻片上加一滴加拿大树脂,移入虫体,用解剖针整姿,用盖玻片封片。玻片置 40 50烘 箱干燥 2 3 d。玻片制成后置生物显微镜观察鉴定,并在盖玻片左侧粘贴记录标签,注明标本号、寄 主植物、采集(截获)时间、采集地点(原产地)、采集人等信息。 DB13/T 2755 2018 8 附 录 C (资料性附录) 康氏粉蚧雌成虫形态特征图 图 C.1 康氏粉蚧
25、 Pseudococcus comstocki (Kuwana)(仿王子清, 2001) DB13/T 2755 2018 9 附 录 D (资料性附录) 粉蚧属常见近似种雌成虫检索表 a) 多格腺数量较少分布限于阴门周围拟长尾粉蚧 Pseudococcus longispinus (TargioniTozzetti) 多格腺数量较多分布不限于阴门周围 2 b) 多格腺只分布在虫体各腹节之腹板 上橘小粉蚧 Pseudococcus citriculus Green 多格腺不仅在腹部腹板上分布,还在头胸部腹面稀少分布或成小群分布 3 c) 刺孔群 C18 所具之三格腺数量较少,稀疏、彼此远离的分散分布 柑栖粉蚧 Pseudococcus calceolariae (Maskell) 刺孔群 C18 所具之三格腺在刺的周围密集成群 康氏粉蚧 Pseudococcus comstocki (Kuwana) _