1、中华人民共和国国家标准精油填克柱气相色谱分析通用法GB/T 14455.9-93 Essential oils-Analysls by gas chromatography on packed columns-General method 本标准系等效采用国际标准ISO7359-1985(精油填充柱气相色谱分析通用法儿1 主题内容与适用范围本标准规定了用填充柱气相色谱分析精泊的通用方法，目的在于测定精泊中一个特定成分的含量和探求一个精泊的特征图象。本标准适用于精泊填充柱气相色谱分析。2 引用标准GB ll538精油毛细管柱气相色谱分析通用法GB/T 14454. 1香料试样制备3 原理小量精泊
2、在装有适当填料的柱上在规定条件下进行气相色谱分析。必要时，用保留指数鉴定不同成分。用测量峰面积的方法对特定成分做定量测定。4 试剂和化学品分析中，除另有规定外，只用认可的分析纯试剂或色谱用试剂和新蒸锚的化学品。4. 1 载气.氢、氮或氮，按照所用检测器的类型选用。如所周检测器需用上述以外的载气，应另说明。注:用氢气时，要严格遵守安全规则。4. 1. 1 辅助气z适合所用检测器的任何气体。4.2 检查柱化学惰性的化学品z乙酸芳梅醋，纯度至少98%。4.3 检查柱效的化学品。注=其他化学品也可用以检查柱效.它们将在每个有关标准中规定。4. 3. 1 芳槽醇g色谱测定的纯度至少99% 4.3.2 甲
3、:烧2色谱测定的纯度至少99%。4.4 参比物质，相当于待测定或检出成分。参比物质将在每个有关标准中规定。4. 5 内标内标将在每个有关标准中规定，它的出峰位置应尽可能地靠近待测的成分峰，不能和精泊中任何成分的峰相重叠。4.6 正构烧怪:包谱测定的纯度至少95%。在一特定的标准中所用的正构烧短的范围取决于试验条件下涉及成分的保留指数。注2正构烧短仅用于测定保留指数。4.7 测试混合物国家技术监督局1993-06-05批准1994-01-01实施288 GB/T 14455.9-93 制备一个含接近务量比例的下列物质的混合物zT=烯苯乙酣芳棒醇乙酸芳梅酶荼桂醇所有上列试剂用色谱测定纯度至少95%
4、。注z其他可用的化学品，将在每个有关标准中规定。5仪器5. 1 色谱仪:具有一个适当检测器和程序升温器。进样系统和检测系统应配有能单独控制各自温度的装置。5. 2 柱.用惰性材料制成(例如玻璃或不锈钢)，内径2.4mm，长24m为宜。担体应尽可能惰性，例如硅烧化和酸洗的白色硅藻土需用特定的颗粒度，将在有关标准中规定。固定相的性质将在每个有关标准中规定。目前最常用的固定相是非极性的，如二甲基聚硅氧烧和极性的聚乙二醇，固定相与担体之比以每100g担体上固定相的克数来表示b柱填料的组成将在每一有关的标准中规定.注:如果用柱填料，不用另外固定相，贝此填料应适当地描述其特征，5.3 记录仪和积分仪s其功
5、能应与仪器的其余部分相适合。6试样ItIJ备如注入的试样需进行特殊制备，将在有关标准中指出。7 操作条件7.1 温度色谱炉、进样系统和检测器的温度在每个有关标准中规定。7.2 载气流速调节流速使得到所需柱效(见8.2条。7.3 辅助气流速参照制造厂说明书以得到检测器的最佳响应值。S 柱效能8. 1 化学惰性试验在试验条件下(见7.1条)注入一定量的乙酸芳楝酶，应只得一个峰(在纯度规定限度内) 8.2 柱效(见图1)在130.C恒温下，芳梅醇峰测定柱效。测定有效塔板数N，至少成为3000，用下列公式之一计算。N=16(会)2 N=5叫苦)2. . ., 式中:dl r 调整保留距离，mm(l30
6、C时芳槽醇峰的保留距离减去空气峰或甲烧峰的保留距离h 芳槽醇峰拐点上两根切线与基线的二个交点间的距离，mm;b 规定化合物芳棒醇半峰高处的宽度，mmo记录仪纸速应使至少为10mm，以使得到适当的精确度.记录仪纸速应使b至少为5mm，以使得到适当的精确度。289 GB/T 14455.9-93 y N 。二48.3 分离度和分离率1 图121 P 著 I 为了测定分离度和(或分离率，在试验条件下注入适量测试混合物(4.7)。8. 3. 1 分离度的测定(见图2)1 II R二UC 4 图2用武(3)计算相邻两峰I和E的分离因子RE式中，d, ( ) 峰I的保留距离gd,( n )一一峰E的保留距
7、离，叫) 峰I的底宽，(们一一峰E的底宽Ld ,( I )-d,( ) R=2一一一一一一一一一( )+(1) 如果( )句(川.R用式(4)计算2( 3 ) R = d, ( 1 ) - d, ( ) =:cd c.o.( .:.1.:.) -;-. .:.d,- (,-,1,-,) =一一一一一一-=一一一一一一一一一(4 ) 4 290 GB/T 14455.9-93 式中z一一标准偏差(见图1)。如果两峰之间的距离d，(I )-d,( 1 )等于4d ,d n时有放。9.2.2 进样起，用线性程序升温时的程序此计算仅在各成分的保留时间包括在线性程序升温的范围内时，方为有效。用式(7)计
8、算保留指数1，1=100生王+100n川. . . (7) /:y 式中，/:，.x-待测保留指数峰峰顶与具有n个碳原子的正构烧短峰峰顶之间在间线上的距离，mm(见9. 1. 2条h/:y一一一具有n个碳原子的正构烧经峰峰顶与具有n十1个碳原子的正构烧短峰峰顶之间在间线上的距离，mm(见9.1.2条)。注2如果进行非线性程序升温，就不可能计算保留指数.10 测定方法10. 1 通用条件10. 1. 1 精泊的色谱图按有关标准记录色谱图。温度和流速条件应和测试柱效时所用的一样(见8.2条)。测定某些特定成分，有关标准将规定用指定温度的恒温条件。在此情况下，流速应控制使达到有关标准中规定的分离率。
9、柱温稳定后，注入适量试样。得包谱图A1叩O.2 内标法在同样操作条件下，记录精油的色谱图及内标(见4.5条的色谱图.检查色谱图，待测成分和精泊的其他成分应分开，内标不与精泊的任何成分相干扰。10.2.1 响应因子的测定定量测定中，如果一个成分相对于内标的响应因子必须测定，可称取适量内标(见4.5条)和参比物质(见4.4条)，使相应的峰面积大致相等。如果需要溶剂，将在有关标准中规定。柱温稳定后，注入适量的此混合物，按10.1. 1条规定条件进行分析。得色谱图F。用式(8)计算相对于内标的成分的响应因子K，K=金三旦旦.(8) ARXmE 293 GB/T 14455.9-93 式中，AR一需计算
10、其响应因子的参比物质的峰面积积分单位号AE一一内标峰面积的积分单位，mR一一参比物质的质量，mg.mE一一内标的质量，mgo10.2.2 测定如有关标准规定用一内标，称取精确至0.001g的适量精油和内标，制备成一个混合物。内标量的选择应使待测成分的峰面积和内标的峰面积大致相等.柱温稳定后，注入适量的上述混合物:按10.1.1条规定条件进行分析。得色谱图C。10.3 叠加法如在一个特定测定中不能用内标法，则可用叠加法。首先注入适量精泊，其中x是待测成分.y是所得色谱图D上出峰位置靠近x的成分。然后称取精确至0.001g的m克精油和mR克相当于待测成分x的参比物质(4.4)。制备成一混合物。注入
11、此混合物，得色谱图吧。10.4 内部归一化法此法不是一个精确的测定方法，只是用峰面积比较方法对从一个混合物中流出的不同成分的相对含量作粗略的估计，它不是测定这些成分的质量百分率。11 结果的表示11. 1 内标法用式(9)计算待测成分的含量C.以质量百分率表示gA.Xm.XK C，=一一一一且一.:.:X 100 . . . . (9) A,Xm 式中A裹一一待测成分的峰面积积分单位(见10.2. 2条), AE一一内标的峰面积积分单位见10.2. 2条hm一一精泊的质量，mg.mE 内标的质量，mg，K一一待测成分相对于内标的响应因子(见10.2.1条)。11.2 叠加法用式(10)计算待测
12、成分含量Cz，以质量百分率表示g经呈寸王一X100(r) .0 . . . ( 10 ) m r一，式中:mR-参比物质(4.4)的质量.g，m一一精泊的质量.g0 294 A军卢互;GB/T 14455.9-93 A.-色谱图D(见10.3条)上成分x的峰面积3A, 鱼谱图D上靠近x的成分y的峰丽积。尘rA 一一-色谱图E(见10.3条)上相当于成分x的峰面积gA , 包谱图UE上靠近x，相当于成分y的峰面积。11. 3 内部归一化法当试样在试验条件下全部挥发并能全部出峰(精油无残渣)，可用式(11)汁算待测成分的含量C以百分率表示。主王X100 . . . . . . . . . . .
13、. . . . ( 11 ) A 式中.Ax一一待测成分的峰面积积分单位;A 所有峰面积的积分单位之和。11.4 结果和重复性用同一样品几次至少三次)测定所得结果的平均值作为响应因子K和待测成分的含量Cu计算中所用数值不应偏离平均值的某一百分率(一般为土2.5%)。该百分率和测定次数将在不同方法或有关标准中规定。12 试验报告试验报告应包括下列内容za. 试样的鉴定$b. 本标准用的参考资料$ 所用仪器型号;d. 包谱柱的特性(材料、填料、温度he. 进样系统的特性(型式和温度hf. 检测器的特性(型式和温度), g. 载气和流速gh. 记录仪特点(最大信号高度、纸速、满刻度响应时间hi 所得结果。附加说明:本标准由中华人民共和国轻工业部提出、。本标准由全国香料标准化中心归口。本标准由轻工业部香料工业科学研究所负责起草。本标准主要起草人万被磐、李美蓉、张新君、吴瑞混。自本标准实施之日起，原轻工业部发布的专业标准ZBY 41 001-86精泊填充柱气相色谱分析一一通用法作废。295
