1、呼吸科主治医师-41 及答案解析(总分:100.00,做题时间:90 分钟)一、论述题(总题数:30,分数:100.00)1.临床诊断肺结核要注意哪些问题? (分数:3.00)_2.肺结核患者日常生活中应采取哪些保健措施? (分数:3.00)_3.肺结核的诊断标准是什么? (分数:3.00)_4.什么是结核病的易感人群? (分数:3.00)_5.如何正确治疗肺结核导致的咯血? (分数:3.00)_6.分枝杆菌家族成员有哪些? (分数:3.00)_7.非结核分枝杆菌致病特点是什么? (分数:3.00)_8.非结核分枝杆菌病的诊断标准是什么? (分数:3.00)_9.结核分枝杆菌是如何传播、如何致
2、病的? (分数:3.00)_10.什么是分枝杆菌的抗酸性?常用的抗酸染色有哪些? (分数:3.00)_11.结核分枝杆菌的基本形态有哪些?有哪些形态变异? (分数:3.00)_12.结核分枝杆菌培养特性有哪些? (分数:3.00)_13.结核分枝杆菌的抵抗力如何? (分数:3.00)_14.什么是菌相学说?结核分枝杆菌依据繁殖代谢分群的临床意义是什么? (分数:3.00)_15.哪些患者需要进行痰涂片检查? (分数:3.00)_16.痰涂片的标本如何分类?正确留取痰标本的方法是什么? (分数:3.00)_17.常用痰涂片检查方法有哪些?痰涂片检查的临床意义是什么? (分数:3.00)_18.什
3、么是结核分枝杆菌耐药性? (分数:3.00)_19.结核杆菌耐药性产生机制是什么? (分数:3.00)_20.结核分枝杆菌耐药性检测目的是什么? (分数:3.00)_21.目前结核分枝杆菌耐药性检测方法有哪些? (分数:4.00)_22.结核分枝杆菌有哪些耐药基因? (分数:4.00)_23.结核分枝杆菌培养的临床意义是什么? (分数:4.00)_24.结核分枝杆菌快速分离培养方法有哪些? (分数:4.00)_25.为什么痰结核杆菌中会出现涂片阳性而培养阴性的现象? (分数:4.00)_26.关于结核病患者易感基因有何研究进展? (分数:4.00)_27.PCR 技术的原理是什么?其在结核病方
4、面的有哪些应用价值? (分数:4.00)_28.定量 PCR 技术的基本原理是什么?它有哪些优点? (分数:4.00)_29.基因芯片技术的原理是什么?其在结核病诊断方面有什么应用价值? (分数:4.00)_30.目前结核杆菌分子药敏试验方法有哪些? (分数:4.00)_呼吸科主治医师-41 答案解析(总分:100.00,做题时间:90 分钟)一、论述题(总题数:30,分数:100.00)1.临床诊断肺结核要注意哪些问题? (分数:3.00)_正确答案:()解析:(1)胸片不能发现或不易发现的结核病:包括早期急性粟粒性肺结核,1.0cm 的肺门、纵隔淋巴结核,早期胸膜炎,缩窄性心包炎,气管支气
5、管结核以及肺外结核病。 (2)合并其他疾病:有伴发疾病者如糖尿病、AIDS 及老年等免疫功能低下者,其下叶或下野肺结核发生频率高于一般单纯肺结核人群。 (3)无反应性结核病(结核败血症):患者常呈急重症临床经过,病变发展迅速,全身性播散,常侵及肝、脾、淋巴结,而肺部病变较迟出现或不明显。2.肺结核患者日常生活中应采取哪些保健措施? (分数:3.00)_正确答案:()解析:(1)活动与休息:指导患者和家属制订合理的休息和活动计划,保证充足的休息和睡眠,避免过劳、情绪波动及呼吸道感染和刺激;指导患者进行有利于身心健康和疾病恢复的有益活动,如保健体操、行走、太极拳等,以促进疾病早日康复;宣传休息、营
6、养、阳光、空气对结核病康复的重要性。有条件的患者可选择在空气新鲜、阳光充足、气候温和、花草茂盛、风景宜人的海滨湖畔疗养。宣传结核病的传播途径及消毒、隔离的重要性,指导患者采取有效的消毒、隔离措施,并能自觉遵照执行。 (2)饮食指导:宣传饮食营养与人体健康及疾病痊愈的关系,在坚持药物治疗的同时,辅以营养疗法的意义。使患者了解结核病是一种慢性消耗性疾病,由于体内分解代谢加速和抗结核药物的毒性反应,使胃肠功能障碍、食欲缺乏,导致营养代谢的失衡和机体抵抗力下降,促使疾病恶化,必须高度重视饮食营养疗法。 (3)心理指导:指导患者了解精神因素与肺结核的发生、发展有一定关系,肺结核病发生明显病理改变以后,患
7、者会产生消极,多疑、恐惧、悲观等心理状态,使病情加重,形成病理、生理之间的恶性循环,要帮助住院患者尽快适应环境,消除焦虑、紧张心理,充分调动人体内在的自身康复能力,增进机体免疫功能,树立信心,使患者处于接受治疗的最佳心理状态,积极配合治疗。 (4)用药指导:督促患者按医嘱坚持规范合理的抗结核治疗,向患者和家属说明不规范用药、过早停药不仅可导致治疗失败,还会诱导结核菌产生继发耐药,增加复治的困难,甚至成为难治病例。 (5)出院指导:指导患者定期随诊,报告用药的反应,接受 X 线胸片检查,以便医师及时调整用药,继续巩固治疗至痊愈。作好结核病的预防工作:控制传染源:对结核患者进行登记、管理,作到早发
8、现、早隔离、早治疗。切断传播途径:加强预防宣传,注意个人卫生,不随地吐痰,患者痰液要进行灭菌处理,实行分餐制,不饮未消毒的牛奶。保护易感人群:对未受过结核菌感染,如新生儿和结核菌素试验阴性的小儿及时接种卡介苗,以获得特异性免疫力。3.肺结核的诊断标准是什么? (分数:3.00)_正确答案:()解析:(1)乏力、体重减轻、发热、盗汗。 (2)咳痰,X 线胸片示肺部浸润性改变。 (3)结核菌素试验阳性。 (4)痰液涂片抗酸染色阳性。 (5)痰培养结核杆菌阳性。4.什么是结核病的易感人群? (分数:3.00)_正确答案:()解析:正常人群均为易感人群。但婴幼儿细胞免疫系统不完善,老年人、HIV 感染
9、者、免疫抑制剂使用者、慢性疾病患者等免疫力低下,更是结核病的易感人群。5.如何正确治疗肺结核导致的咯血? (分数:3.00)_正确答案:()解析:(1)咯血较多时应绝对卧床休息,胸部放置冰袋,并配血备用。取患侧卧位,轻轻将存留在气管内的积血咳出,并给予神经垂体素治疗。神经垂体素可收缩小动脉和毛细血管,使肺血流量减少,促进止血。该药尚可收缩子宫及平滑肌,故忌用于高血压、冠状动脉粥样硬化性心脏病的患者及孕妇。注射过快会出现恶心、有便意、心悸、面色苍白等不良反应。若咯血量过多,可酌情适量输血。大咯血不止者,可经纤维支气管镜止血。必要时行肺叶或肺段切除及支气管动脉栓塞。 (2)咯血窒息是咯血致死的主要
10、原因,需严加防范,并积极准备抢救。咯血窒息症状包括胸闷、憋气、发绀、面色苍白、冷汗淋漓、烦躁不安,其原因为大量血液阻塞呼吸道;患者体弱,咳嗽反射差,无力将血液咯出;患者极度紧张诱发喉头痉挛。抢救时应特别注意保持患者呼吸道通畅,采取头低脚高 45的俯卧位,轻拍背部,迅速排出积血,并尽快挖出或吸出口、咽、喉、鼻部血块,有条件时用较粗的鼻导管进行负压吸引;给予高浓度吸氧;必要时应用呼吸兴奋剂。6.分枝杆菌家族成员有哪些? (分数:3.00)_正确答案:()解析:分枝杆菌属是一类细长略弯曲的微生物,有时有分枝或出现丝状体。在微生物分类中属于裂殖菌纲,放线菌目,分枝杆菌科,分枝杆菌属。分枝杆菌种类较多,
11、文献报道统计达 100 余种,国际公认的伯杰系统细菌学手册所确认的分枝杆菌有 54 种,可分为结核分枝杆菌复合群、非结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌三类。 (1)结核分枝杆菌:俗称结核杆菌或结核菌,是引起结核病的病原菌,包括结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌和田鼠分枝杆菌。 (2)非结核分枝杆菌:是指结核分枝杆菌复合群与麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌。抗原与结核分枝杆菌有交叉。非结核分枝杆菌从结核样患者分离的阳性率,我国为 3%15%。非结核分枝杆菌的分类目前仍广泛采用 Runyon 分类法,根据菌落色素与生长速度将非结核分枝杆菌分为以下四群。 1)Runyon 群:光产色菌。本群细菌生长缓慢(7
12、日),菌落光滑。在以鸡蛋为基础的培养基上,菌落不见光时为淡黄色,曝光 1 小时后再培养即成橘黄色。本群主要有堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌和猿猴分枝杆菌。 2)Runyon 群:暗产色菌。在 37生长缓慢,菌落光滑。这类细菌在暗处培养时菌落呈橘红色,若一直曝光培养,颜色可逐渐加深,故又称为兼性产色菌。本群主要有瘰疠分枝杆菌、苏加分枝杆菌和戈登分枝杆菌。对人致病的主要为瘰疠分枝杆菌,可引起儿童淋巴结炎。 3)Runyon 群:不产色菌。4042下生长慢,菌落光滑。通常不产生色素。本群主要有鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌、蟾蜍分枝杆菌、溃疡分枝杆菌、玛尔摩分枝杆菌、土地分枝杆菌、不产色分枝杆菌和胃分枝杆菌。
13、鸟-胞内分枝杆菌可引起结核样病变,多见于肺与肾。 4)Runyon 群:迅速生长菌。在 2545生长,生长快,培养 57 日即可见到菌落,菌落粗糙,有的能产色。有偶发分枝杆菌、龟分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、耻垢分枝杆菌等。前三种对人致病,可引起肺部疾病及皮肤感染。耻垢分枝杆菌虽不致病,但经常在外阴部皮脂中存在,检查粪、尿中结核分枝杆菌时应予以注意。 (3)麻风分枝杆菌:俗称麻风杆菌,引起麻风,是一种慢性传染病,流行广泛。目前全世界约有病例 1 200 万,主要分布在亚洲、非洲和拉丁美洲。我国建国前流行较严重,估计约有 50 万例患者。1981 年卫生部提出在 20 世纪末基本消灭麻风的指标是发病率
14、0.01。目前,发病率已大幅度下降。1996 年统计尚有患者 6 200 余例,患病率为 0.005 6。近 3 年病例已稳定在 2 000 例左右。但治愈后有一定复发率(约 3.7%),应予以重视。7.非结核分枝杆菌致病特点是什么? (分数:3.00)_正确答案:()解析:非结核分枝杆菌曾有许多命名,如非典型分枝杆菌、非分类分枝杆菌等,但均不够确切,目前普遍采用美国微生物学和疾病控制中心的命名,即非结核分枝杆菌。包括致病性及非致病性非结核分枝杆菌。现已证实其中 30%,即 10 余种具有致病性。能引起人类和动物肺部病变和肺外其他部位的疾患。其致病性特点如下。 (1)由于非结核分枝杆菌的毒力比
15、结核分枝杆菌低,对人体的致病强度较结核杆菌弱。但非结核分枝杆菌可与结核分枝杆菌混合感染。 (2)非结核分枝杆菌所导致的非结核分枝杆菌病大都是继发的,原发的只是少部分。 (3)非结核分枝杆菌多属于机会性感染病原体。慢性肺部疾病如慢性阻塞性肺疾病、肺结核残余空洞、硅沉着病、支气管扩张症、肺囊性纤维化、恶性肿瘤等及脏器移植、肾透析、使用肾上腺皮质激素和免疫抑制剂致细胞免疫功能低下者易发病。特别是获得性免疫缺陷综合征(AIDS)并发肺部感染的患者,对非结核分枝杆菌易感性明显增高。 (4)非结核分枝杆菌对多种抗结核药物呈天然耐受。 (5)非结核分枝杆菌所致疾病的全身中毒症状和局部损害与结核病相似,主要侵
16、犯肺部,也可侵犯肺外脏器及组织,不同菌种的侵犯部位趋向性也不尽相同。 1)引起肺部病变的主要菌种是鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、蟾蜍分枝杆菌;次要菌种是猿猴分枝杆菌、苏加分枝杆菌、玛尔摩分枝杆菌、偶然分枝杆菌、龟分枝杆菌。 2)引起淋巴结炎的主要菌种是鸟分枝杆、胞内分枝杆菌、瘰疠分枝杆菌;次要菌种是偶然分枝杆菌、龟分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌。 3)引起皮肤病变的主要菌种是海分枝杆菌、偶然分枝杆菌、龟分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、溃疡分枝杆菌;次要菌种是鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、土地分枝杆菌、耻垢分枝杆菌、嗜血分枝杆菌。4)引起播散性病变的主要菌种
17、是鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、龟分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、嗜血分枝杆菌;次要菌种是偶然分枝杆苗、蟾蜍分枝杆菌。8.非结核分枝杆菌病的诊断标准是什么? (分数:3.00)_正确答案:()解析:非结核分枝杆菌病的诊断标准(美国胸病学会,1997)如下。 (1)临床标准:临床症状、体征:常见咳嗽、乏力,病情较重者有发热、体重减轻、咯血和呼吸急促,有基础病者临床症状恶化。排除其他疾病:如结核、肿瘤、组织胞质菌病。 (2)X 线标准:浸润性病灶伴有或不伴有结节性病灶(持续2 个月,或有进展);空洞性病变;单个或多个结节。HRCT 示多个小结节或多灶性支气管扩张有或不伴有肺部小结节。 (3)细
18、菌学标准:1 年内至少有 3 份痰或支气管灌洗标本,其中 3 次培养阳性,而 AFB 涂片阴性或 2 次培养阳性 1 次 AFB 涂片阳性。若仅得到 1 份支气管灌洗标本而未能得到痰标本,培养阳性应达(+)、(+)或培养阳性,同时涂片阳性达(+)、(+)、(+)。若痰或支气管灌洗液标本提示未能确诊或未排除其他疾病,经支气管活体组织检查或肺活体组织检查做细菌培养及组织病理学检查得到阳性结果。9.结核分枝杆菌是如何传播、如何致病的? (分数:3.00)_正确答案:()解析:结核分枝杆菌可通过呼吸道、消化道或皮肤损伤侵入易感机体,引起多种组织器官的结核病,其中以通过呼吸道引起肺结核为最多。因肠道中有
19、大量正常菌群寄居,结核分枝杆菌必须通过竞争才能生存并和易感细胞黏附。肺泡中无正常菌群,结核分枝杆菌可通过飞沫微滴或含菌尘埃吸入,故肺结核较为多见。此外可通过血液循环到达肺外器官,如肠、肾、骨、关节、淋巴系统、神经系统、泌尿生殖系统等全身各器官组织。结核病的主要传播形式如下。 (1)咳嗽传播:肺结核最主要是通过痰涂片结核菌阳性的传染性肺结核患者,在咳嗽、打喷嚏或大声说话时形成飞沫传播的。在这些微小的、带有大量结核菌的飞沫长时间飘浮在空气中,人们吸入后就会造成感染。咳嗽传播是肺结核传播的主要途径。 (2)尘埃传播:传染性肺结核患者如果随地吐痰,带有结核菌的痰经过干燥后,随空气飞扬,形成微小的漂浮尘
20、埃,人们吸入后也可能造成感染。10.什么是分枝杆菌的抗酸性?常用的抗酸染色有哪些? (分数:3.00)_正确答案:()解析:(1)分枝杆菌本身无色,观察分枝杆菌必须染色后进行。分枝杆菌应为革兰染色阳性菌,其细胞壁脂质含量较高,约占干重的 60%,特别是有大量分枝菌酸(mycolic acid)包围在肽聚糖层的外面,可影响染料的穿入,极不易着色,若经加温或延长染色时间而着色后能抵抗强脱色剂盐酸乙醇的脱色,此种特性被称为抗酸性。 (2)目前常用的抗酸染色方法有萋-尼(zeihl-Neelsen)染色法和荧光染色法。经萋-尼染色法染色后,分枝杆菌,包括结核分枝杆菌呈红色,而标本中其他细菌、细胞、杂质
21、等均呈蓝色;经荧光素染色后,分枝杆菌,包括结核分枝杆菌呈金黄色或橙黄色荧光,故分枝杆菌又称为抗酸杆菌。抗酸染色法能在显微镜下分出抗酸菌和非抗酸菌,即分枝杆菌和非分枝杆菌。11.结核分枝杆菌的基本形态有哪些?有哪些形态变异? (分数:3.00)_正确答案:()解析:(1)结核杆菌基本形态为细长、直或稍弯曲、两端钝圆的杆菌,长 14m,宽 0.30.6m,无芽胞、无荚膜、无鞭毛,在痰中多为单个存在,有时呈 V、Y、人字型排列,有分枝生长倾向,痰菌量多时可排列为束状或积聚成团。 (2)结核分枝杆菌的状态变异是结核分枝杆菌的一项重要特征。除正常典型形态外,受不良生长条件的影响,如物理因素、化学因素,特
22、别是药物因素而呈现异常变化。其形态可归纳为杆菌相(基本形态)、滤过相、颗粒相、球菌相(L 型)四种类型。 1)杆菌相:临床标本中除典型形态外,往往还有长度、弯曲度各异的多种杆菌形态,甚至有串珠状、丝状体、棒状等形态。 2)滤过相:宿主体内的结核分枝杆菌多形态包括滤过型。1991 年 Khomenko 在豚鼠损坏性肺结核模型中证实了滤过型的存在。化疗 3 个月和 6 个月后,空洞仍存在,在电子显微镜下观察发现空洞壁中存在着形态是典型杆菌 1/20 的超小球状微粒体。此球状微粒体可通过细菌滤膜称为滤过型。含滤过型菌体标本在液体培养基中培养 1014 日可出现球状体,被萋一尼抗酸染色检出,注射豚鼠可
23、在脏器中分离到典型杆菌型并观察到单核细胞浸润肉芽肿形成。Khomenko 指出经化疗 3 个月和 6 个月时的涂片和培养阴性空洞肺结核病患者,在整体化疗期均可观察到滤过型的存在。滤过型很可能是结核分枝杆菌在宿主体内产生滞留现象的原因之一,具有潜在危险性。 3)颗粒型:1907 年 Much 在结核性冷脓肿、浆液渗出液、干酪性淋巴结等脓液和痰液中,用 Much-Weiss染色法观察到革兰染色阳性颗粒,称为莫赫颗粒。Much 颗粒是结核分枝杆菌发育过程中的特殊阶段:革兰染色阳性颗粒革兰阳性杆菌非抗酸杆菌抗酸和革兰阳性杆菌抗酸杆菌。表现为非抗酸性非细胞型体。感染豚鼠后可从脏器病变中分离出结核分枝杆菌
24、,对豚鼠有致病力。莫赫颗粒的重要意义在于给临床医师与临床实验室细菌学研究者提出结核病的病原体除典型结核分枝杆菌,尚有非抗酸性非细菌细胞性革兰阳性颗粒型体。这些颗粒型体仍有生机与活力,在适宜的营养条件下可重新获得增殖,发育生长出典型结核分枝杆菌。 4)球菌型(L 型):结核分枝杆菌在体内外受物理、化学、免疫等因素的影响,维持菌体固有形态的细胞壁缺损或丧失,产生细胞壁缺陷型。细胞壁缺陷型细菌是 1935 年。Kleneber Notel 在英国 Lister 医学研究院研究念珠状链杆菌时首先发现的,故以 Lister 医学研究院的第一个字母,将细胞壁缺陷型细菌命名为 L 型菌。L 型菌一般呈圆球状
25、,但同时也存在长丝体、膨胀巨大的巨球体等多形态。由于细胞壁缺失时随之失去了胞壁中抗酸性物质分枝菌酸,L 型与野生型结核分枝杆菌相比,其生物学特性发生了许多改变。形态与染色:菌体形态多形性,大小不一,可呈球形体、长丝体、巨球体等形态。抗酸染色后可见菌体着色能力不同程度减退或消失。 培养特性:在常规分枝杆菌培养基上不能生长,只能在渗透压适宜的特殊培养基,如琼脂综合培养基或胰胨大豆蛋白胨琼脂培养基(TAS-L)上生长,菌落微小,呈油煎蛋样,菌体可穿入琼脂层基内生长。 致病性:因细胞壁缺损或缺失而失去了某些与致病性相关的物质,故 L 型菌毒力降低。 抵抗力:对外界环境抵抗力减弱,对高渗和低渗均不耐受,
26、仅在适宜的相对高渗环境才能生存。 药物敏感性:对药物敏感性发生明显变化,对作用部位为细胞壁的药物不敏感,而抑制蛋白质合成的药物,因无细胞壁阻挡,易进入细胞内,故对 L 型菌有较强杀菌力。 免疫原性:随着细胞壁缺损或缺失,细菌的免疫原性发生了改变或减弱,表现为趋化作用和型变态反应减弱;逃逸机体特异性免疫攻击,特别是 MHA 限制性免疫杀伤作用。L 型菌能在宿主体内持续长期存在,多存在于局灶性结核病变、结核性淋巴结炎、迁延性结核病变以及巨噬细胞内,其具有潜在危险性。当机体免疫功能低下时,细菌复活机遇来临,返祖为亲代结核分枝杆菌,能够大量生长繁殖,使结核病恶化与进展。12.结核分枝杆菌培养特性有哪些
27、? (分数:3.00)_正确答案:()解析:(1)结核分枝杆菌是专性需氧菌,空气内加 5%10%CO 2 可刺激其生长,在 3540范围内均可生长,最适温度 3537,最适 pH 6.47.0。生长时尚需一定湿度,固体培养基培养时需有适量的凝固水以保证培养基湿度。 (2)结核分枝杆菌生长缓慢,在人工培养基内需 1520 小时,在静脉感染未经免疫小鼠肺中约需 15 小时,在巨噬细胞内 1520 小时,在家兔角膜中为 2022 小时繁殖一代。早先的理论认为结核分枝杆菌生长缓慢与其疏水性外层有关,因其使得营养物质难以渗入菌细胞内。但有研究表明,使用表面活性剂破坏疏水层后,并未明显增加生长速度,看来此
28、因素并非导致结核分枝杆菌生长缓慢的主要原因。近年来有学者经研究提出,结核分枝杆菌生长缓慢与其菌体依赖 DNA 的 RNA 多聚酶缺陷有关。在培养基中结核分枝杆菌mRNA 链的增长速度仅为大肠埃希菌的 1/10,对结核分枝杆菌全细胞渗出物化学分析表明,其 RNA 与 DNA比值也只是大肠埃希菌的 1/10。上述结果提示,结核分枝杆菌依赖 DNA 的 RNA 多聚酶缺陷限制了特异性mRNA 从 DNA 上的转录,转录过程低效率,蛋白质合成也呈低效率,是结核分枝杆菌生长缓慢的主要原因。(3)结核杆菌在大部分培养基上菌落多呈粗糙型,菌落表面干燥、粗糙、隆起、厚、呈结节状或颗粒状,边缘薄且不规则,似菜花
29、状,呈乳灰白色或淡黄色。牛分枝杆菌多为光滑型,在液体培养基内,从管底开始生长,稍显颗粒状沉淀,从管壁延伸,直达培养基表面,最后在表面形成厚膜,在 Dubos 吐温白蛋白培养基内则可呈均匀分散生长。结核杆菌有毒株在液体培养基呈索状生长。在半流体培养基中形成菌膜,中层有颗粒状生长。 (4)结核分枝杆菌营养要求较高且特殊。培养基内应含有足够的营养成分。结核杆菌的独特特征之一是专嗜甘油作为碳源。牛分枝杆菌利用丙酮酸盐作为碳源。天门冬氨酰胺是结核杆菌生长的最好氨源,钾、铁和磷等能促进其生长。长期以来国内外研究者为促进结核杆菌生长,缩短培养时间达到提前分离、鉴定的目的,对结核杆菌的营养、生理代谢、培养基进
30、行了一系列的研究,取得了一些进展。在固体培养基方面,以鸡蛋为基础,常用的培养基有改良罗氏培养基、酸性罗氏培养基、小川培养基等;以琼脂为支持物,制备合成与半合成培养基。在美国,最常用于结核杆菌研究和诊断的固体培养基之一是 Middle-brook7H10或 7H11,还有 Proskauer 和 Belk 琼脂培养基。Belk 琼脂培养基使用简便,但菌落不典型,呈扁平、露滴状,多为光滑型。13.结核分枝杆菌的抵抗力如何? (分数:3.00)_正确答案:()解析:结核分枝杆菌因细胞壁含大量的类脂质,尤其是蜡样物质,具有疏水性,和普通细菌相比较,对物理和化学的消毒与灭菌方法具有较强的抵抗力。 (1)
31、物理因素对结核分枝杆菌的影响: 1)温度:菌悬液中的结核菌在 60,1030 分钟;80以上,5 分钟以内死亡。一般含有结核菌的物品,煮沸 10 分钟以上均可灭菌。对痰纸等均可用火烧灭菌。结核菌有耐低温的特点,3可存活 612 个月。 2)光线:结核菌对太阳光线中的紫外线抵抗力弱,在直射太阳光下,37 小时死亡。5mm 厚度的菌悬液用紫外线 10 瓦,50cm 的距离,照射 3 分钟,即可消灭其内的结核菌。结核患者的衣物、被褥等均可进行日光消毒。 3)干燥及其他:结核菌对干燥或干热的抵抗力特别强。干燥痰中的结核菌在暗处可存活数周。被感染结核菌的图书,可存活 3 个月。在盛夏粪便中所含的结核菌存
32、活 23 日,在冬季可存活 18 日以上。 (2)化学因素对结核分枝杆菌的影响: 1)乙醇:75%乙醇 5 分钟杀死结核菌,可用于手的消毒。由于乙醇能凝固蛋白质,使痰表面形成膜把菌体包裹起来,短时间内不能杀死细菌,故不用于痰的消毒。 2)升汞液:对菌悬液有较强的消毒力。一般用 0.1%升汞液 10 分钟左右就能杀死结核菌。由于升汞液能将痰表面的蛋白质凝固沉淀,所以不能用于痰的消毒。 3)苯酚液:1%2%苯酚液 5 分钟,5%苯酚液 30 秒至 1 分钟杀死结核菌。对于痰中的结核菌,用 5%苯酚与等量痰混合,需 24 小时才能将其杀死。常用 5%苯酚液消毒。 4)煤酚皂溶液(甲酚皂液):菌悬液内
33、加入 0.5%甲酚皂 60 分钟可杀灭结核菌,1%需 45 分钟,2%需 5 分钟。常用 5%10%甲酚皂痰液消毒。多用于带菌标本与动物尸体的浸泡消毒。玻璃器材用苯酚消毒。 5)过氧乙酸:0.1%1.0%过氧乙酸 12 小时均可杀死尿液、粪便、痰内的结核菌。 6)甲醛:痰内结核菌需 24 小时才能杀死。在带菌器材、物品或废弃物较多时或处理实验动物尸体时,用121高压灭菌,2060 分钟是最彻底的灭菌措施。实验室终末处理用甲醛熏蒸。14.什么是菌相学说?结核分枝杆菌依据繁殖代谢分群的临床意义是什么? (分数:3.00)_正确答案:()解析:1956 年 Mccune 等从小白鼠实验结核病中已观察
34、到顽固菌的存在,1980 年经 Mitchison 等进一步研究,首次提出了菌相学说。菌相学说认为,按结核杆菌繁殖代谢速度及状态,病灶中结核分枝杆菌可分为以下几种。 (1)快速繁殖菌群(A 群):生长繁殖旺盛,主要存在于巨噬细胞外,致病力强、传染性大,多在疾病早期的活动性病灶内、空洞壁内或空洞内,易被抗结核药杀灭。尤以异烟肼(INH)效果好,起主要杀菌作用,链霉素(SM)和利福平(RFP)亦有效。 (2)间歇繁殖菌群(B 群):多存在于干酪病灶中,细胞内外均可存活。这种菌处于低代谢状态,接近休眠,偶尔突然“苏醒”,间歇生长繁殖,但时间很短暂,也许仅持续数小时。在中性环境里,只有利福平能迅速杀灭
35、它们。 (3)缓慢繁殖菌群(C 群):多存在于巨噬细胞内或结核空洞酸性与缺氧环境中,繁殖代谢缓慢,接近休眠状态。吡嗪酰胺(PZA)对此菌群有独特的杀菌作用,异烟肼(INH)和利福平(RFP)只有一定的杀菌作用,SM在酸性环境下不发挥作用。 (4)休眠菌群(D 群):常在细胞内,完全处于休眠状态,无繁殖代谢,目前尚无特别有效的药物,其结局是自然死亡。 细菌繁殖代谢分群是结核病化疗方案制订的重要依据。药物对繁殖代谢旺盛的菌群杀菌作用强;对繁殖代谢缓慢的菌群杀菌作用较弱;对不繁殖、不代谢的菌群无杀菌作用。B 群、C 群菌处于代谢低下、暂时休眠状态,不易被药物消灭,而存活数月、数年,又称为“持续存活菌
36、”或“持留菌”,化疗药物必须应用较长时间才能消灭。若化疗方案不当,疗程不够,停药后有可能又生长繁殖,是结核病内源性复发的病源。15.哪些患者需要进行痰涂片检查? (分数:3.00)_正确答案:()解析:(1)凡因有结核症状求诊和转诊的可疑肺结核患者,均应进行痰涂片检查。一般包括持续咳嗽、咳痰超过 3 周;咯血或伴有血痰;发热或胸痛超过 2 周;胸部 X 线检查异常。涂片检查应采集 3 个合格标本,就诊当时在门诊留取一份“即时痰”标本送检,同时嘱患者留取“夜间痰”和“晨痰”,于次日送检。 (2)凡已确诊、登记、治疗的肺结核患者,在化疗期间应定期查痰。初治涂阳患者在疗程强化期末、继续期满 3 个月和继续期结束时,复治涂阳患者在强化期末、巩固期满 3 个月和巩固期结束时,各查 1 次晨痰。初治、复治涂阳患者在强化期结束时,痰菌仍为阳性者,应在 1 个月时增加 1 次晨痰检查;若复治涂阳患者治疗满 3 个月时痰菌仍阳性,