1、农学硕士联考化学-7 及答案解析(总分：105.00，做题时间：90 分钟)一、B选择题/B(总题数：34，分数：34.00)1.CM-cellulose_。 A.是一种羧甲基纤维素 B.是一种阴离子交换剂 C.可用来分离氨基酸 D.A，B（分数：1.00）A.B.C.D.2.凝胶过滤_。 A.是借助特殊滤膜进行的旨在除去杂质的高级过滤技术 B.可按分子大小分离蛋白质 C.小分子物质易过滤 D.B，C（分数：1.00）A.B.C.D.3.桑格反应_。 A.可用来鉴定多肽链羧基末端氨基酸 B.主要试剂为 2，4-二硝基苯 C.为烃基化反应 D.B，C（分数：1.00）A.B.C.D.4.利用紫外
2、分光光度计测定某些生物分子含量，是根据_。 A.它们在紫外区有光吸收 B.它们在近紫外区有吸收峰 C.它们在特定波长下的光吸收值与其浓度有正相关 D.B，C（分数：1.00）A.B.C.D.5.蛋白质盐析_。 A.是利用蛋白质在低盐溶液中发生沉淀的原理 B.可用于除去蛋白质溶液中的盐成分 C.可对蛋白质进行分级分离 D.可用于蛋白质缓冲液的更换（分数：1.00）A.B.C.D.6.SDS-PAGE_。 A.可以测定氨基酸的分子量 B.可以测定天然蛋白质分子量 C.可以测定蛋白质亚基分子量 D.可以测定蛋白质亚基数（分数：1.00）A.B.C.D.7.进行 SDS-PAGE时，蛋白质_。 A.由
3、负极向正极移动 B.特殊条件下由正极向负极移动 C.移动方向取决于蛋白质的大小 D.移动方向取决于组成蛋白质的氨基酸性质（分数：1.00）A.B.C.D.8.用凝胶过滤柱层析分离蛋白质时_。 A.亚基分子量差别越大，越容易分离 B.蛋白质天然分子量差异越大，越容易分离 C.变性蛋白质比活性蛋白质更容易被分离 D.纤维状蛋白质比球状蛋白质更容易被分离（分数：1.00）A.B.C.D.9.下列哪种方法适合植物种子全蛋白质含量测定? A.茚三酮反应 B.凯氏定氮 C.Folin-酚法 D.双缩脲反应（分数：1.00）A.B.C.D.10.利用葡聚糖凝胶过滤分离蛋白质过程中，柱填料中出现许多气泡_。
4、A.将提高分离效果和分离速度 B.将提高分离效果 C.将降低分离效果 D.表明柱填料不干净，蛋白质有可能已经发酵（分数：1.00）A.B.C.D.11.利用密度梯度分离蛋白质时常用_作为离心介质。 A.蔗糖 B.NaCl C.氯化铯 D.硫酸铵（分数：1.00）A.B.C.D.12.下述哪些方法不能用于蛋白质浓缩? A.硫铵沉淀 B.超滤 C.透析 D.聚乙二醇法（分数：1.00）A.B.C.D.13.鉴定溶液中微量抗原的有效方法是_。 A.免疫荧光标记 B.免疫金标 C.酶联免疫吸附测定 D.紫外分光光度计（分数：1.00）A.B.C.D.14._在变性牛胰核糖核酸酶(天然蛋白含有 4对二硫
5、键)的复性中更有效。 A.高浓度 -巯基乙醇 B.微量 -巯基乙醇 C.高浓度盐酸胍 D.微量盐酸胍（分数：1.00）A.B.C.D.15._可以在蛋白质水平鉴定生物组织器官的基因表达水平。 A.Western blot B.Southern blot C.PCR D.Northern blot（分数：1.00）A.B.C.D.16._蛋白质胶体溶液不稳定。 A.溶液 pH大于蛋白质 pI时 B.溶液 pH小于蛋白质 pI时 C.溶液 pH等于蛋白质 pI时 D.A和 B（分数：1.00）A.B.C.D.17.蛋白质处于等电点时_。 A.溶解度最小 B.胶体稳定性增加 C.整个分子所带净电荷增
6、加 D.整个分子所带净电荷不变（分数：1.00）A.B.C.D.18.蛋白质胶体溶液呈现稳定性，源于_。 A.蛋白质分子内部的疏水氨基酸残基 B.蛋白质分子表面的水化层 C.蛋白质分子表面的双电层 D.B，C（分数：1.00）A.B.C.D.19.蛋白质电泳凝胶条带常用_显色。 A.溴酚蓝 B.考马斯亮蓝 C.EB D.Folin-酚试剂（分数：1.00）A.B.C.D.20.下述关于抗体的描述哪项是错误的? A.抗体能与抗原特异结合 B.抗体可以作为抗原再制备抗体 C.抗体不等于 IgG D.抗体分子为“Y”字形（分数：1.00）A.B.C.D.21.下述哪种沉淀方法无法获得具有活性的蛋白质
7、? A.三氯乙酸沉淀 B.硫铵沉淀 C.冷丙酮沉淀 D.等点沉淀（分数：1.00）A.B.C.D.22.凝胶过滤和凝胶电泳分离蛋白质的共同点是_。 A.都具有电荷效应 B.都具有浓缩效应 C.都具有分子筛效应 D.A，B，C（分数：1.00）A.B.C.D.23.蛋白质纯度分不同水平。下述哪一个纯度的蛋白质样品更纯? A.PAGE一条带 B.SDS-PAGE一条带 C.双向电泳一个点 D.分子大小均一（分数：1.00）A.B.C.D.24.可用于蛋白质序列测定的现代技术有_。 A.MALDI-TOF-MS B.MS C.MALDI-TOF-TOF D.氨基酸自动分析仪（分数：1.00）A.B.
8、C.D.25.蛋白质沉降系数与蛋白质分子质量_。 A.二者在数值上相等 B.二者呈正相关 C.二者呈负相关 D.二者之间没有关系（分数：1.00）A.B.C.D.26.下述方法哪个不能用于蛋白质定量分析? A.考马斯亮蓝法 B.紫外光分光光度法 C.双缩脲法 D.茚三酮显色法（分数：1.00）A.B.C.D.27.下述哪种方法用于蛋白质定量分析灵敏度最高? A.Folin-酚法 B.紫外光分光光度法 C.双缩脲法 D.凯式定氮法（分数：1.00）A.B.C.D.28.下述哪种方法适于混合蛋白质样品中某一蛋白质的定性分析? A.紫外分光光度法 B.Western blot C.SDS-PAGE
9、D.考马斯亮蓝法（分数：1.00）A.B.C.D.29.下述哪种方法不适于蛋白质的分离纯化? A.纸层析 B.柱层析 C.亲和层析 D.离子交换层析（分数：1.00）A.B.C.D.30.IgG分子在_部位结合抗原。 A.轻链 B.重链 C.高度可变区 D.糖残基（分数：1.00）A.B.C.D.31.抗体常用于疾病诊断，是因为它们_。 A.可以被标记上放射性信号 B.容易纯化 C.能特异结合抗原 D.即便微量存在也可以被鉴定（分数：1.00）A.B.C.D.32.下述有关蛋白质分离技术的阐述错误的是_。 A.除去溶液中的蛋白质可用三氯乙酸沉淀法 B.用三氯乙酸沉淀的蛋白质可进一步进行活性分析
10、 C.用三氯乙酸沉淀的蛋白质可进一步进行 SDS-PAGE分析 D.可用三氯乙酸终止酶反应（分数：1.00）A.B.C.D.33.在进行常规蛋白质 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时，蛋白质样品_。 A.上样量在“L”量级 B.上样量在“mL”量级 C.浓度越低越好 D.浓度越高越好（分数：1.00）A.B.C.D.34.下述蛋白质研究技术中哪项不一定涉及抗体? A.免疫印迹 B.亲和层析 C.免疫共沉淀 D.ELISA（分数：1.00）A.B.C.D.二、B简答题/B(总题数：6，分数：30.00)35.什么是 western blot?指出 23 种用途。（分数：5.00）_36.什么是蛋白质透
11、析?有什么用途?（分数：5.00）_37.什么是盐析、盐溶?有何用途?与 KCl、NaCl 等相比。(NH 4)2SO4用作沉淀剂的优点是什么?（分数：5.00）_38.蛋白质凝胶过滤和蛋白超滤是一回事吗?请给予解释。（分数：5.00）_39.比较“等电沉淀”和“等电聚焦”的含义和用途。（分数：5.00）_40.FPLC和 HPLC的中、英文名称是什么?二者在应用上的主要区别是什么?（分数：5.00）_三、B实验题/B(总题数：6，分数：30.00)41.常用于蛋白质化学分析的试剂有：SDS、6mol/L HCl、-巯基乙醇、茚三酮、PITC、胰蛋白酶等。其中 1 适合多肽链的氨基末端分析，
12、2 适合蛋白质二硫键的还原； 3 适合肽键的定点水解， 4 适合蛋白质氨基酸组成分析； 5 适合氨基酸定量反应。 6 和 7 适合蛋白质变性电泳分析。（分数：5.00）填空项 1:_填空项 1:_填空项 1:_填空项 1:_填空项 1:_填空项 1:_填空项 1:_42.凝胶过滤用于鉴定蛋白质的分子量时结果是否和 SDS-PAGE的结果一致?（分数：5.00）_43.用等电聚焦电泳分离某一蛋白质样品，得到的蛋白条带数能否代表蛋白质种类数?为什么?（分数：5.00）_44.PAGE可以用于蛋白质纯度鉴定吗?为什么?（分数：5.00）_45.凝胶过滤、PAGE 和 SDS-PAGE都是分离、分析蛋
13、白质的常见方法。有一个经凝胶过滤分离得到的蛋白质样品(100%纯)，取一部分蛋白质样品进行 PAGE分析时，在电泳胶片上出现 100ku蛋白条带；对蛋白质样品进行 SDS-PAGE分析时，在电泳胶片上出现一条 50ku蛋白质条带；用桑格法对蛋白质样品进行氨基末端分析时，出现两种氨基酸。请解释实验现象，并对蛋白质的天然结构组成给出结论。（分数：5.00）_46.有一组单亚基蛋白质，具有不同的分子量和等电点。分别为：A(45ku，pI5.4)、B(13ku，pI10.6)、C(17ku，pI7)、D(69ku，pI4.8)、E(90ku，pI5.9)。请指出经过 SDS-PAGE后，从凝胶的上样孔
14、到前沿指示剂方向(即从负极到正极方向)蛋白质的条带顺序。并说明原因；指出经过等点聚焦电泳(电泳方向从负极到正极)后，从负极到正极方向蛋白质在凝胶上的排列顺序，并说明原因。（分数：5.00）_四、B论述题/B(总题数：1，分数：11.00)47.为什么 SDS-PAGE可以鉴定蛋白质的分子量?（分数：11.00）_农学硕士联考化学-7 答案解析(总分：105.00，做题时间：90 分钟)一、B选择题/B(总题数：34，分数：34.00)1.CM-cellulose_。 A.是一种羧甲基纤维素 B.是一种阴离子交换剂 C.可用来分离氨基酸 D.A，B（分数：1.00）A. B.C.D.解析：考点
15、阳离子交换剂。解析 CM-cellulose，即羧甲基-纤维素，是一种阳离子交换剂，常用作蛋白质分离柱层析介质。CM-cellulose含有羧基，能解离出阳离子(如 H+)，和带正电荷的蛋白质发生交换，使带正电荷的蛋白质结合在层析介质从而得以分离。由于其孔径较大，只适合分离蛋白质，而不适于氨基酸分离、分析。分离氨基酸的离子交换介质常用离子交换树脂。2.凝胶过滤_。 A.是借助特殊滤膜进行的旨在除去杂质的高级过滤技术 B.可按分子大小分离蛋白质 C.小分子物质易过滤 D.B，C（分数：1.00）A.B. C.D.解析：考点 蛋白质凝胶过滤原理。 解析 凝胶过滤特指分子筛层析，是基于分子大小进行分
16、离的一种蛋白质层析技术，并非一般意义上的过滤。通过凝胶介质时，比凝胶网孔小的蛋白质容易进入凝胶颗粒内部，受到的阻滞作用大，经过的路径长。3.桑格反应_。 A.可用来鉴定多肽链羧基末端氨基酸 B.主要试剂为 2，4-二硝基苯 C.为烃基化反应 D.B，C（分数：1.00）A.B.C. D.解析：考点 桑格反应实质。 解析 桑格反应为烃基化反应。在弱碱性反应条件下，2，4-二硝基氟苯与氨基酸的 -氨基反应，生成黄色 2，4-二硝基苯基氨基酸。4.利用紫外分光光度计测定某些生物分子含量，是根据_。 A.它们在紫外区有光吸收 B.它们在近紫外区有吸收峰 C.它们在特定波长下的光吸收值与其浓度有正相关
17、D.B，C（分数：1.00）A.B.C.D. 解析：考点 生物分子特征吸收。5.蛋白质盐析_。 A.是利用蛋白质在低盐溶液中发生沉淀的原理 B.可用于除去蛋白质溶液中的盐成分 C.可对蛋白质进行分级分离 D.可用于蛋白质缓冲液的更换（分数：1.00）A.B.C. D.解析：考点 蛋白质盐析的原理与应用。 解析 盐析是指蛋白质在高浓度中性盐中发生沉淀的现象。大量中性盐的加入会使蛋白质溶液中水的活度降低，这不仅使大部分水转变为盐离子的水化水，而且蛋白质分子表面的水化层也被破坏，使蛋白质分子表面的疏水残基充分暴露，从而发生聚集而沉淀下来。盐析常用于目标蛋白的初级分离和蛋白质浓缩。6.SDS-PAGE
18、_。 A.可以测定氨基酸的分子量 B.可以测定天然蛋白质分子量 C.可以测定蛋白质亚基分子量 D.可以测定蛋白质亚基数（分数：1.00）A.B.C. D.解析：考点 SDS-PAGE 的用途。 解析 SDS-PAGE 为蛋白质变性电泳，用于测定蛋白质亚基分子量。如果一个蛋白质含的亚基大小差异不大，SDS-PAGE 无法将它们分开。7.进行 SDS-PAGE时，蛋白质_。 A.由负极向正极移动 B.特殊条件下由正极向负极移动 C.移动方向取决于蛋白质的大小 D.移动方向取决于组成蛋白质的氨基酸性质（分数：1.00）A. B.C.D.解析：考点 SDS 在电泳中的作用。 解析 SDS，即十二烷基硫
19、酸钠，常用作蛋白质变性剂。在 -巯基乙醇存在下，蛋白质亚基分离，二硫键断裂，多肽链充分伸展，SDS 以其烃链与蛋白质分子的侧链通过疏水相互作用结合成复合体。由于 SDS是阴离子，被大量引入 SDS的蛋白质分子便带上大量负电荷，在电泳时必然由负极向正极移动。8.用凝胶过滤柱层析分离蛋白质时_。 A.亚基分子量差别越大，越容易分离 B.蛋白质天然分子量差异越大，越容易分离 C.变性蛋白质比活性蛋白质更容易被分离 D.纤维状蛋白质比球状蛋白质更容易被分离（分数：1.00）A.B. C.D.解析：考点 凝胶过滤的应用对象。 解析 凝胶过滤是基于天然蛋白质分子大小进行分离的一种柱层析技术。变性蛋白质通常
20、为沉淀物，不易分离；纤维状蛋白质由于可能部分进入凝胶网孔中，也无法按照分子大小分离。凝胶过滤最适合球状蛋白质的分离。9.下列哪种方法适合植物种子全蛋白质含量测定? A.茚三酮反应 B.凯氏定氮 C.Folin-酚法 D.双缩脲反应（分数：1.00）A.B. C.D.解析：考点 不溶性蛋白质的含量测定。 解析 种子蛋白有的可溶于水，有的不溶。凯氏定氮法是通过测定全氮量，然后根据蛋白质含氮比例 16%，粗略计算蛋白质含量的。除了凯氏定氮法，其他三种均用于可溶性蛋白质的定量分析。10.利用葡聚糖凝胶过滤分离蛋白质过程中，柱填料中出现许多气泡_。 A.将提高分离效果和分离速度 B.将提高分离效果 C.
21、将降低分离效果 D.表明柱填料不干净，蛋白质有可能已经发酵（分数：1.00）A.B.C. D.解析：考点 凝胶过滤技术。 解析 一个合格的葡聚糖凝胶柱床，不应该出现气泡、分层、裂缝等，它们的出现会降低蛋白质分离效果。干燥葡聚糖在溶胀处理过程中如果吸水不充分很容易出现气泡。装柱过程出现干燥也会导致气泡产生。11.利用密度梯度分离蛋白质时常用_作为离心介质。 A.蔗糖 B.NaCl C.氯化铯 D.硫酸铵（分数：1.00）A. B.C.D.解析：考点 密度梯度离心介质。 解析 离心介质必须满足两个基本条件：一是具有化学性质稳定性，不会影响蛋白质结构和性质；二是能形成比较稳定的密度梯度，且黏度合适，
22、在一定离心力场下，允许密度不同的蛋白质颗粒以不同速度下沉。蔗糖密度很适合蛋白质密度梯度离心分离，此外，还有聚蔗糖(商品名称为 Ficoll)或其他合成材料。NaCl 和硫酸铵溶解度大，易扩散，无法形成比较稳定的密度梯度。氯化铯适合作为核酸超离心密度梯度介质。12.下述哪些方法不能用于蛋白质浓缩? A.硫铵沉淀 B.超滤 C.透析 D.聚乙二醇法（分数：1.00）A.B.C. D.解析：考点 蛋白质浓缩技术。 解析 蛋白质稀溶液可以浓缩，常见技术有：超滤、硫酸铵盐析、聚乙二醇法、冷冻干燥法等。透析是根据分子大小、利用半透膜选择性除去某些小分子物质的技术。蛋白质溶液透析后往往浓度降低。13.鉴定溶
23、液中微量抗原的有效方法是_。 A.免疫荧光标记 B.免疫金标 C.酶联免疫吸附测定 D.紫外分光光度计（分数：1.00）A.B.C. D.解析：考点 酶联免疫吸附测定技术。 解析 酶联免疫吸附测定借助抗体反应和酶反应，能更有效地鉴定溶液中的微量抗原。免疫荧光标记和免疫金标适合细胞中目标蛋白质的标记和显微观察；紫外分光光度计测定蛋白质浓度，结果是粗略的，因为其原理建立在芳香族氨基酸残基在“280nm”处有特征吸收的基础上。14._在变性牛胰核糖核酸酶(天然蛋白含有 4对二硫键)的复性中更有效。 A.高浓度 -巯基乙醇 B.微量 -巯基乙醇 C.高浓度盐酸胍 D.微量盐酸胍（分数：1.00）A.B
24、. C.D.解析：考点 蛋白质复性。 解析 变性蛋白质原则上能复性，但需要一定条件。牛胰核糖核酸酶为单条多肽链，分子中有 4个二硫键。在变性剂和巯基乙醇存在下，该酶所有的二硫键发生断裂，形成 8个巯基。对这样的酶进行复性时，需要残留微量巯基乙醇。其原因是：8 个巯基相互之间可形成 105种二硫键组合形式，但只有一种是具有完全活性的天然形式；在复性的反应系统中保持微量巯基乙醇，可以为错配的二硫键提供纠错机会，最终形成稳定的天然构象。15._可以在蛋白质水平鉴定生物组织器官的基因表达水平。 A.Western blot B.Southern blot C.PCR D.Northern blot（分
25、数：1.00）A. B.C.D.解析：考点 蛋白质免疫印迹技术。 解析 Western blot，即蛋白质免疫印迹技术，可在蛋白质水平鉴定基因表达水平。Southern blot 用于分析 DNA；Northern blot 用于分析 RNA；PCR 是聚合酶链式反应，用于基因扩增。16._蛋白质胶体溶液不稳定。 A.溶液 pH大于蛋白质 pI时 B.溶液 pH小于蛋白质 pI时 C.溶液 pH等于蛋白质 pI时 D.A和 B（分数：1.00）A.B.C. D.解析：考点 蛋白质溶液稳定性与蛋白质等电点的关系。 解析 蛋白质溶液属于胶体溶液。胶体溶液中的蛋白质分子具有一定的稳定性，一般不会发生
26、聚集而形成沉淀，这是因为：蛋白质分子表面有许多极性基团，可以吸附水分子，迫使水分子在蛋白质分子表面形成一个连续的水化层，从而阻止蛋白质分子彼此靠近、形成沉淀；在 pH值远离蛋白质 pI的溶液中，同种蛋白质分子带有同种电荷，这会增加分子间的彼此排斥，进一步阻止蛋白质发生聚集。如果破坏了蛋白质胶体颗粒的水化层或者使蛋白质溶液处于等电点 pH，蛋白质胶体稳定性下降，蛋白质容易发生沉淀。17.蛋白质处于等电点时_。 A.溶解度最小 B.胶体稳定性增加 C.整个分子所带净电荷增加 D.整个分子所带净电荷不变（分数：1.00）A. B.C.D.解析：考点 蛋白质等电点与溶解度的关系。 解析 蛋白质在等电点
27、时溶解度最小。18.蛋白质胶体溶液呈现稳定性，源于_。 A.蛋白质分子内部的疏水氨基酸残基 B.蛋白质分子表面的水化层 C.蛋白质分子表面的双电层 D.B，C（分数：1.00）A.B.C.D. 解析：考点 蛋白质胶体稳定性。 解析 正是由于蛋白质分子内部疏水性氨基酸残基的相互聚集，才使得大部分亲水性氨基酸残基位于分子表面而使蛋白质分子出现水化层。在含有低浓度盐离子的蛋白质溶液中，蛋白质分子会出现明显的双电层，从而增加蛋白质稳定性。19.蛋白质电泳凝胶条带常用_显色。 A.溴酚蓝 B.考马斯亮蓝 C.EB D.Folin-酚试剂（分数：1.00）A.B. C.D.解析：考点 蛋白质电泳胶染色技术
28、。 解析 考马斯亮蓝分子通过疏水作用和静电力可与蛋白质进行物理性结合，结合后的考马斯亮蓝颜色发生变化，故可显色蛋白质。有不同类型考马斯亮蓝，R-250 比 G-250灵敏度高，常用于电泳凝胶上的蛋白质条带染色。G-250 用于溶液中蛋白质的定量。溴酚蓝是电泳前沿指示剂，EB 是核酸荧光指示剂，Folin-酚试剂用于定量水溶性蛋白质。20.下述关于抗体的描述哪项是错误的? A.抗体能与抗原特异结合 B.抗体可以作为抗原再制备抗体 C.抗体不等于 IgG D.抗体分子为“Y”字形（分数：1.00）A.B.C.D. 解析：考点 抗体的多样性和不均一性。 解析 IgG 是抗体的一种类型，分子为“Y”字
29、形。抗体具有三个基本特性：特异性。某一种抗体只能与相应的抗原发生结合。多样性。抗原不同，产生的抗体就不同；有多个抗原决定簇的抗原产生的抗体也不相同。不均一性。由同一个抗原决定簇产生的抗体有多种类型，如人体主要有五类：IgA、IgD、IgE、IgG 和 IgM。21.下述哪种沉淀方法无法获得具有活性的蛋白质? A.三氯乙酸沉淀 B.硫铵沉淀 C.冷丙酮沉淀 D.等点沉淀（分数：1.00）A. B.C.D.解析：考点 蛋白质沉淀技术。 解析 硫铵沉淀、等电点沉淀，或低温下的丙酮沉淀，都可以获得活性蛋白质。三氯乙酸沉淀往往导致蛋白质变性。22.凝胶过滤和凝胶电泳分离蛋白质的共同点是_。 A.都具有电
30、荷效应 B.都具有浓缩效应 C.都具有分子筛效应 D.A，B，C（分数：1.00）A.B.C. D.解析：考点 利用凝胶过滤和电泳分离蛋白质的原理差别。 解析 所有的电泳分离都有电荷效应和分子筛效应；不连续电泳还有浓缩效应。凝胶过滤柱层析是依据分子大小分离的，只有分子筛效应。23.蛋白质纯度分不同水平。下述哪一个纯度的蛋白质样品更纯? A.PAGE一条带 B.SDS-PAGE一条带 C.双向电泳一个点 D.分子大小均一（分数：1.00）A.B.C. D.解析：考点 蛋白质纯度有不同层次。 解析 PAGE 是普通聚丙烯酰胺凝胶电泳，蛋白质迁移率与分子大小、电荷、形状有关，同一条带上可能有多种蛋白
31、质；SDS-PAGE 只按照蛋白质亚基分子量分离，SDS-PAGE电泳一条带显示纯度高一些，但大小相似、序列不同的亚基可能出现在一条带中；双向电泳先根据蛋白质等电点分离，再依据亚基分子量分离，分辨率最高。分子大小均一，不等于序列相同。24.可用于蛋白质序列测定的现代技术有_。 A.MALDI-TOF-MS B.MS C.MALDI-TOF-TOF D.氨基酸自动分析仪（分数：1.00）A.B.C. D.解析：考点 质谱技术。 解析 MS，是质谱(mass spectrometry)的缩写。MALDI-TOF-MS(matrix-assisted laset desorption/ionizat
32、ion-time of flight-MS)是基质辅助激光解吸离子化-飞行时间-质谱。MALDI-TOF-TOF 是指两个飞行质谱串联在一起，即串联质谱。串联质谱可用于蛋白质序列测定。25.蛋白质沉降系数与蛋白质分子质量_。 A.二者在数值上相等 B.二者呈正相关 C.二者呈负相关 D.二者之间没有关系（分数：1.00）A.B. C.D.解析：考点 蛋白质沉降系数。 解析 蛋白质分子量和沉降系数不同。Svedberg 方程描述了蛋白质分子量(M)与沉降系数(S)的关系：* 式中：R 为气体常数，T 为绝对温度，D 为扩散系数， 为溶剂密度，*为蛋白质分子的微分比体积。由该方程可以看出，蛋白质沉
33、降系数越大，分子量越大，成正比关系。26.下述方法哪个不能用于蛋白质定量分析? A.考马斯亮蓝法 B.紫外光分光光度法 C.双缩脲法 D.茚三酮显色法（分数：1.00）A.B.C.D. 解析：考点 蛋白质定量方法。 解析 茚三酮常用于显色氨基酸，而非蛋白质。27.下述哪种方法用于蛋白质定量分析灵敏度最高? A.Folin-酚法 B.紫外光分光光度法 C.双缩脲法 D.凯式定氮法（分数：1.00）A. B.C.D.解析：考点 蛋白质定量方法。 解析 双缩脲法基于肽键反应，操作简便，但灵敏度较低，适于测定蛋白质浓度较高的样品(110mg/mL)；Folin-酚试剂法(Lorry 法)是在双缩脲反应
34、基础上再加入酚试剂进一步反应，蛋白质酪氨酸酚羟基将酚试剂还原成蓝色化合物，因而可使反应灵敏度提高一个数量级。紫外法基于 280nm光吸收，不灵敏；凯氏定氮测定结果偏高，因为测定的是全有机氮，不仅包括所有蛋白质，还包括核苷酸、氨基酸等28.下述哪种方法适于混合蛋白质样品中某一蛋白质的定性分析? A.紫外分光光度法 B.Western blot C.SDS-PAGE D.考马斯亮蓝法（分数：1.00）A.B. C.D.解析：考点 混合样品蛋白质定性分析技术。 解析 紫外分光光度法和考马斯亮蓝法可用于定量蛋白质；SDS-PAGE 可以分离蛋白质亚基，结合分子量标准还可以确定亚基分子量，但不能定性蛋白
35、质，因为分子量相同，不一定是同一种蛋白；免疫印迹分析是一种利用凝胶电泳分离和抗原-抗体特异结合原理对蛋白质进行分析的生物化学技术，由于抗原-抗体反应的专一性和酶反应的高效性，可以有效鉴定出混合样品中某蛋白质是否存在。29.下述哪种方法不适于蛋白质的分离纯化? A.纸层析 B.柱层析 C.亲和层析 D.离子交换层析（分数：1.00）A. B.C.D.解析：考点 蛋白质层析技术。 解析 常见蛋白质层析技术有：离子交换柱层析、亲和层析、金属离子层析、吸附柱层析等。纸层析是利用滤纸作为支持介质进行的分配层析，按照溶解度差异有效分离氨基酸等小分子物质，不适合蛋白质分离。30.IgG分子在_部位结合抗原。
36、 A.轻链 B.重链 C.高度可变区 D.糖残基（分数：1.00）A.B.C. D.解析：考点 抗原-抗体结合。 解析 IgG，即免疫球蛋白 G，含有两条重链、两条轻链，在这 4条链的 N端可变结构域是抗原结合部位。31.抗体常用于疾病诊断，是因为它们_。 A.可以被标记上放射性信号 B.容易纯化 C.能特异结合抗原 D.即便微量存在也可以被鉴定（分数：1.00）A.B.C. D.解析：考点 抗体功能特点。 解析 抗体的应用价值主要在于它能够特异识别、结合抗原。与疾病相关的特异生物大分子(或称抗原)即便微量存在，也可以得到鉴定，这是因为抗体分子通常被连接上酶或荧光基团，从而大大提高信号灵敏度。
37、32.下述有关蛋白质分离技术的阐述错误的是_。 A.除去溶液中的蛋白质可用三氯乙酸沉淀法 B.用三氯乙酸沉淀的蛋白质可进一步进行活性分析 C.用三氯乙酸沉淀的蛋白质可进一步进行 SDS-PAGE分析 D.可用三氯乙酸终止酶反应（分数：1.00）A.B. C.D.解析：考点 蛋白质变性沉淀技术。 解析 蛋白质沉淀技术不同，获得的蛋白质样品活性不同。利用“等电沉淀”、“盐析”、“有机溶剂沉淀”可以获得有活性的蛋白质，但三氯乙酸沉淀的蛋自质处于变性状态。33.在进行常规蛋白质 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时，蛋白质样品_。 A.上样量在“L”量级 B.上样量在“mL”量级 C.浓度越低越好 D.浓度越
38、高越好（分数：1.00）A. B.C.D.解析：考点 SDS-PAGE 实验操作。 解析 SDS-PAGE 用于蛋白质分离分析，分辨率在微克量级(g)。通常要求蛋白质样品在一定浓度范围(1mg/mL 左右)，上样量为几十微升。蛋白质浓度过高，许多条带将挤压在一起分不开；浓度过低，低丰度蛋白的条带无法检测到。34.下述蛋白质研究技术中哪项不一定涉及抗体? A.免疫印迹 B.亲和层析 C.免疫共沉淀 D.ELISA（分数：1.00）A.B. C.D.解析：考点 蛋白质分离技术。 解析 免疫技术离不开抗体，所以单从名称判断即可排除A、C；“ELISA”是“酶联免疫吸附测定”的英文缩写，因而也应该排除
39、。“亲和层析”概念比较广泛，其基本原理是利用生物分子之间的专一结合特性高效分离目标分子。在利用抗原分离抗体或用抗体分离抗原时会涉及抗体，但有些亲和层析，如利用底物分离酶，利用 Poly(T)分离 mRNA等，不会涉及抗体问题。二、B简答题/B(总题数：6，分数：30.00)35.什么是 western blot?指出 23 种用途。（分数：5.00）_正确答案：(western blot：就是蛋白质免疫印迹。 简要叙述如下：将经过凝胶电泳分离的蛋白质条带，原位电转移至能吸附蛋白质且有一定机械性能的薄膜(如硝酸纤维素膜)，然后分别与目标蛋白的特异抗体以及酶标二抗进行孵育结合，最后加入酶底物进行反
40、应，使与抗体特异结合的蛋白质条带显色，从而使目标蛋白得到鉴定。 此法有多种用途： (1)鉴定蛋白质样品中某种目标蛋白的存在与否(如果有显色条带，表明蛋白质样品中存在目标蛋白)； (2)鉴定抗体的特异性(如果在某一个蛋白质混合样品中只有一条带显色，显示抗体具有特异性)； (3)结合标准蛋白的使用还可以鉴定目标蛋白的分子质量和含量。)解析：36.什么是蛋白质透析?有什么用途?（分数：5.00）_正确答案：(透析(dialysis)是将蛋白质样品装在半透膜制成的透析袋中，浸入大量缓冲液进行平衡。由于小分子可以透过半透膜进入环境溶液中，而大分子被滞留在透析袋中，经过连续、多次更换透析液，即可除去蛋白质
41、样品中的小分子物质。 透析常用于除去蛋白质样品中的小分子，如盐、糖等。)解析：37.什么是盐析、盐溶?有何用途?与 KCl、NaCl 等相比。(NH 4)2SO4用作沉淀剂的优点是什么?（分数：5.00）_正确答案：(盐析(salting out)是通过向蛋白质溶液中加入高浓度中性盐(如硫酸铵)，致使蛋白质发生沉淀的蛋白质分离技术。盐析作用主要是由于大量中性盐的加入使水的活度降低，不仅原来溶液中的大部分水转变为盐离子的水化水，而且蛋白质分子表面通过静电作用结合的水化层也被移去以溶剂化盐离子，使蛋白质分子表面的疏水残基充分暴露，从而发生聚集而沉淀下来。不同蛋白质分子表面疏水基团含量不同，溶解度不同，被沉淀下来所需的中性盐浓度也就不同。因此，选定某浓度中性盐，可以将目标蛋白沉淀分离。此法是按溶解度分离蛋白质的一种方法，常用于蛋白质粗分级分离，也可用于蛋白质浓缩。中性盐影响蛋白质溶解度的能力是其离子强度的函数。与 KCl、NaCl 等相比，(NH 4)2SO4用做沉淀剂的优点是：因为它是二价离子中性盐，而且在水中溶解度很高，溶解度的温度系数也较低，故能在低温下(4)以高浓度存在，争夺溶液中的水以及蛋白质分子表面的水化水，使蛋白质溶
