1、基因工程技术原理与应用及答案解析(总分：1046.00，做题时间：90 分钟)一、填空题(总题数：51，分数：198.00)1.BarnH 是识别 6 个核苷酸的酶，其切割产物的平均长度的理论值是 1。（分数：1.50）填空项 1:_2.通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的大小不同的片段，可以构建显示该区域各限制酶切位点位置的 1。（分数：1.50）填空项 1:_3.EcoK 是类限制性内切酶，分子组成是 2 2。 亚基的作用是_； 亚基的作用是_； 亚基的作用是_。（分数：4.50）填空项 1:_4.个体之间 DNA 限制性片段长度的差异称为 1。（分数：1.50
2、）填空项 1:_5.限制性内切核酸酶的命名原则是：第一个字母来自_；第二、三两个字母来自_；第四个字母则表示_。（分数：4.50）填空项 1:_6.在限制性内切核酸酶切反应管中添加各种成分后，需要离心数秒钟，其目的是_和_。（分数：3.00）填空项 1:_7.为了进行部分酶切可以采用下列措施：_、_和_等。（分数：4.50）填空项 1:_8.限制性内切核酸酶的识别序列分别由 4、6、8 对碱基组成，它们在 DNA 序列上的切割频率的理论值分别是_、_和_。（分数：4.50）填空项 1:_9.限制性内切核酸酶通常保存在 1 浓度的甘油溶液中。（分数：1.50）填空项 1:_10.测序酶是修饰了的
3、 T7 DNA 聚合酶，它只有_酶的活性，而没有_活性。（分数：3.00）填空项 1:_11.切口平移(nick translation)法标记 DNA 的基本原理在于_的_和_的作用。（分数：4.50）填空项 1:_12.欲将某一具有突出单链末端的双链 DNA 分子转变为平末端的双链形式，通常采用的方法是_和_。（分数：3.00）填空项 1:_13.反转录酶具有催化 DNA 合成的作用，同时还具有_的作用，可以将 DNA-RNA 杂合双链中的_消化掉。（分数：3.00）填空项 1:_14.基因工程中所用的载体主要有三类：_、_和_。（分数：4.50）填空项 1:_15.一个最简单的质粒载体必
4、须包括以下几个部分：_、_和_。（分数：4.50）填空项 1:_16.如果两个质粒不能稳定共存于同一个寄主细胞中，则属于_群，这是因为他们的_所致。（分数：3.00）填空项 1:_17.质粒的拷贝数是指细胞中 1。（分数：1.50）填空项 1:_18.ColEl 质粒复制的起始需要三种酶：_、_和_。（分数：4.50）填空项 1:_19.那些没有可以检测表型的质粒称为 1。（分数：1.50）填空项 1:_20.噬菌体可以被改造作为基因工程载体，主要是由于_和_。（分数：3.00）填空项 1:_21. 噬菌体载体主要有两种类型，插入型和置换型。就酶切位点来说，插入型为_个；置换型为_个。（分数：
5、3.00）填空项 1:_22.M13 噬菌体 DNA 的复制分为三个阶段：_、_和_。（分数：4.50）填空项 1:_23.噬菌粒是由质粒和噬菌体 DNA 共同构成的其中来自质粒的结构主要是_和_；来自噬菌体的主要结构是_。（分数：4.50）填空项 1:_24. 噬菌体由于包装的限制，插入外源 DNA 片段后，总长度应在噬菌体基因组的 1 范围内。（分数：1.50）填空项 1:_25.引物在基因工程中至少有 4 方面的用途：_、_、_、和_。（分数：4.50）填空项 1:_26.利用 Taq DNA 聚合酶进行 PCR 反应所得产物不是平末端，而是在_端带有一个突出的_；据此人们设计了 PCR
6、 产物的_克隆法。（分数：4.50）填空项 1:_27.简并引物 PCR 主要是依据蛋白质的氨基酸序列设计 1 引物来扩增相应的基因。（分数：1.50）填空项 1:_28.现有的克隆基因的策略大体上可以分为三类：_、_和_。（分数：4.50）填空项 1:_29.DNA 重组连接的方法大致有 4 种：_、_、_和_。（分数：6.00）填空项 1:_30.SD 序列是 mRNA 分子中与_结合的序列，位于_密码子的上游；在基因组中的对应位置是_位点与_位点之间。（分数：6.00）填空项 1:_31.携带有外源基因并能持久传递给子代的植物称为_植物；这些外源基因就叫做_。（分数：3.00）填空项 1
7、:_32.重组子的筛选有两层含义，一是_；二是_。（分数：3.00）填空项 1:_33.限制性内切核酸酶切割 DNA 后产生 5端突出的黏性末端，可以用_进行 3端标记；如果限制性内切核酸酶切割 DNA 后产生 3端突出的黏性末端，可以用_进行 5端标记。（分数：3.00）填空项 1:_34.为了获得单链标记的 DNA 探针可以采用以下三种方法：_、_和_。（分数：4.50）填空项 1:_35.根据 Northern 杂交的结果可以说明_；根据 Southern 杂交的结果可以说明_；根据western 杂交的结果可以说明_；根据原位杂交的结果可以说明_。（分数：6.00）填空项 1:_36.
8、Northern 杂交和 Southern 杂交的根本区别在于_和_。（分数：3.00）填空项 1:_37.欲将某一具有单链突出末端的双链 DNA 分子转变成平末端的双链形式，通常采用的方法有_和_。（分数：3.00）填空项 1:_38.由于不同构型的 DNA 插入 EB 的量的不同，它们在琼脂糖凝胶电泳中迁移率也不同，scDNA 的泳动速度_；oc DNA 的泳动速度_；1DNA 居中。（分数：3.00）填空项 1:_39.在基因工程中，导入外源基因的主要方法有_、_、_和_等。（分数：6.00）填空项 1:_40.在基因组计划中用来构建人基因组 DNA 文库的载体通常有 4 种，分别是_、
9、_、_和_。（分数：6.00）填空项 1:_41.反向 PCR 的方法通常用来_；重组 PCR 的方法通常用来_；原位 PCR 的方法通常用来_。（分数：4.50）填空项 1:_42.核酸凝胶电泳中常用的染料是 1。（分数：1.50）填空项 1:_43.为对某一生物的基因进行全面的研究，只需建立_个基因组文库，同时必须建立_个 cDNA 文库。（分数：3.00）填空项 1:_44.双脱氧链终止法测定 DNA 碱基序列需要的试剂为_、_、_和_等。（分数：6.00）填空项 1:_45.Taq DNA 聚合酶需要适当浓度的 Mg2+才能发挥作用。Mg 2+浓度升高对 Taq DNA 聚合酶的效应是
10、_；Mg 2+浓度降低，对 Taq DNA 聚合酶的效应是_。（分数：3.00）填空项 1:_46.普通质粒载体、入噬菌体载体、黏粒载体和噬菌粒的容量由大到小依次为_、_、_和_。（分数：6.00）填空项 1:_47.目前栽培面积较大的 5 种农作物是_、_、_、_和_。其中以_为最大。（分数：9.00）填空项 1:_48.外源基因导入植物细胞的方法为_、_和_。（分数：4.50）填空项 1:_49.外源基因导人动物受精卵的方法有_、_、_、_和_。（分数：7.50）填空项 1:_50.大肠杆菌中选择性标记一般为_；酵母菌中选择性标记一般为_。（分数：3.00）填空项 1:_51.核型多角体病
11、毒有两种表现型_和_；分别感染_和_。（分数：6.00）填空项 1:_二、判断题(总题数：26，分数：26.00)52.限制与修饰现象是宿主的一种保护体系，它是通过对外源 DNA 的修饰和对自身 DNA 的限制而实现的。( )（分数：1.00）A.正确B.错误53.限制性内切核酸酶在 DNA 中的识别/切割位点的二级、三级结构也影响酶切效率。( )（分数：1.00）A.正确B.错误54.能够产生限制酶从而防御病毒的侵染的细菌，其本身的基因组 DNA 中没有该酶的识别序列。( )（分数：1.00）A.正确B.错误55.限制性酶切图谱和限制性片段长度多态性图谱的区别在于前者是物理图谱，而后者是连锁
12、图谱。( )（分数：1.00）A.正确B.错误56.某一限制酶在一环状 DNA 上有 3 个切点，用此酶切割该环状 DNA，可以得到 3 个片段。( )（分数：1.00）A.正确B.错误57.基因工程中所使用的内切酶不仅具有内切核酸酶活性，也具有甲基化的活性。( )（分数：1.00）A.正确B.错误58.用同一种限制性内切核酸酶切割载体和外源 DNA 得到黏性末端后，为防止它们自身环化，要用 CIP 将他们脱磷酸。( )（分数：1.00）A.正确B.错误59.Gap 和 Nick 的含义是不同的，前者是指 DNA 的单链中有较小的缺失，后者仅是断开了一个磷酸二酯键。( )（分数：1.00）A.
13、正确B.错误60.线状质粒与环状质粒一样都不带有宿主必需的基因。( )（分数：1.00）A.正确B.错误61.有 a、b、c 三个质粒，a 和 b 能够共存于一个细胞中，a 和 c 也可以共存于一个细胞中，所以 b 和 c 也一定能够共存于一个细胞中。( )（分数：1.00）A.正确B.错误62.如果两个质粒可以稳定共存于一个细胞中，这两种质粒则属于同一个不亲和群。( )（分数：1.00）A.正确B.错误63.能够在不同的宿主细胞中复制的质粒叫穿梭质粒。( )（分数：1.00）A.正确B.错误64.置换型载体是指同一种限制性内切核酸酶在入 DNA 中具有两个切点，外源 DNA 通过取代这两个点
14、间的片段被克隆。( )（分数：1.00）A.正确B.错误65.噬菌体载体集质粒和丝状噬菌体的有利特征于一身的载体，既能合成单链 DNA，又能合成双链 DNA。( )（分数：1.00）A.正确B.错误66. 噬菌体 DNA 和 M13 单链噬菌体 DNA 在成熟前的 DNA 复制都是用滚环模型。( )（分数：1.00）A.正确B.错误67.所谓引物就是与 DNA 互补的一小段 RNA 分子。( )（分数：1.00）A.正确B.错误68.简并引物是根据已知 DNA 序列设计的引物群。( )（分数：1.00）A.正确B.错误69.通过原位杂交得到的阳性克隆就是重组子，但不能判断插入的外源基因是否表达
15、了。( )（分数：1.00）A.正确B.错误70.核酸杂交的原理是根据 DNA 分子间的互补。( )（分数：1.00）A.正确B.错误71.突出的 3端或凹端的 3端都可以用 Klenow 酶进行末端标记。( )（分数：1.00）A.正确B.错误72.用氯霉素处理细菌可以使内含的严紧型质粒大量扩增，从而极大地提高其产量。( )（分数：1.00）A.正确B.错误73.为了在大肠杆菌中高效表达外源蛋白质，常需要考虑的因素有启动子的强弱、SD 序列、蛋白的存在方式以及 Poly(A)加尾信号等。( )（分数：1.00）A.正确B.错误74.反转录酶是一种依赖于 RNA 的 DNA 聚合酶。( )（分
16、数：1.00）A.正确B.错误75.反转录酶催化的信息流是蛋白质RNADNA。( )（分数：1.00）A.正确B.错误76.在克隆载体 pUC 系列中，lacZ基因提供了一个外源基因的选择标记，蓝色的转化菌落通常表明克隆是失败的。( )（分数：1.00）A.正确B.错误77.只有用同一种限制性内切核酸酶切割获得的 DNA 片段末端才能够用 DNA 连接酶连接起来。( )（分数：1.00）A.正确B.错误三、选择题(总题数：72，分数：72.00)78.在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是( )。（分数：1.00）A.化学合成法B.基因组文库法C.cDNA 文库法D.聚合酶链反应E
17、.差异显示法79.在下列进行 DNA 部分酶切的条件中，控制哪一项最好?( )（分数：1.00）A.反应时间B.酶量C.反应体积D.酶反应的温度80.T4 DNA 连接酶是从 T4 噬菌体感染的 E.coli 中分离的，这种酶( )。（分数：1.00）A.催化连接反应时既能以 ATP 又能以 NAD 作为能量来源B.既能催化平末端连接又能催化黏性末端连接C.是一种单肽酶，分子质量为 74kDaD.既能催化单链 DNA 连接又能催化双链 DNA 连接81.限制性片段长度多态性是( )。（分数：1.00）A.用于遗传的“指纹结构”模式分析的技术B.二倍体细胞中的两个等位基因限制性图谱的差别C.物种
18、中的两个个体限制性图谱的差别D.两个物种中个体间的限制性图谱的差别E.两种酶在单个染色体上限制性图谱的差别82.建 cDNA 文库时，首先需分离细胞的( )。（分数：1.00）A.染色体 DNAB.线粒体 DNAC.总 mRNAD.tRNAE.rRNA83.从大肠杆菌的两个菌株中提纯的一种质粒，一个可以被某种限制性内切核酸酶切开而另一个不可以，是因为( )。（分数：1.00）A.该质粒在一个菌株中有切割B.该质粒在一个菌株中是线性的C.该质粒在一个菌株中被甲基化了D.不能被酶切的质粒是线性的84.外源基因在大肠杆菌中高效表达受很多因素影响，其中 SD 序列的作用是( )。（分数：1.00）A.
19、提供一个 mRNA 转录终止子B.提供一个 mRNA 起始点C.提供一个核糖体结合位点D.提供一个翻译的终点85.在基因工程技术中，不常用到的酶是( )。（分数：1.00）A.限制性内切核酸酶B.DNA 聚合酶C.DNA 连接酶D.反转录酶E.DNA 解链酶86.限制性内切核酸酶切割 DNA 后产生( )。（分数：1.00）A.3磷酸基末端和 5羟基末端B.5磷酸基末端和 3羟基末端C.3磷酸基末端和 5磷酸基末端D.5羟基末端和 3羟基末端E.3羟基末端、5羟基末端和磷酸87.最常用的筛选转化细菌是否含质粒的方法是( )。（分数：1.00）A.营养互补筛选B.抗药性筛选C.免疫化学筛选D.P
20、CR 筛选E.分子杂交筛选88.PCR 变性温度一般为( )。（分数：1.00）A.94B.85C.72D.62E.5589.在切口平移标记 DNA 探针时只能使用( )。（分数：1.00）A.Klenow 酶B.DNA 聚合酶C.DNA 聚合酶D.DNA 聚合酶90.RFLP 产生自( )。（分数：1.00）A.使用不同的限制性内切核酸酶B.每种类型的染色体有两条C.染色体中碱基的随机变化D.Southern 印迹E.不同探针的使用91.型限制性内切核酸酶( )。（分数：1.00）A.由两个亚基组成，仅识别半甲基化位点B.甲基化和限制活性相互排斥：MS 亚基促使甲基化，R 亚基促使限制C.由
21、两个亚基组成，在识别位点附近识别并进行甲基化或限制D.在错配修复中起关键作用，因为酶结合到 DNA 上是以结构扭曲为基础，而不是序列错误识别92.限制性内切核酸酶可以特异性的识别( )（分数：1.00）A.双链 DNA 的特定碱基对B.双链 DNA 的特定碱基序列C.特定的三联体密码D.以上都正确93.以质粒为载体将外源基因导入受体菌的过程称( )。（分数：1.00）A.转化B.转染C.感染D.转导94.Klenow 酶与 DNA 聚合酶相比，前者丧失了( )活性。（分数：1.00）A.53合成酶B.35外切酶C.53外切酶D.转移酶95.cDNA 文库包括该种生物的( )。（分数：1.00）
22、A.某些蛋白质的结构基因B.所有蛋白质的结构基因C.所有的结构基因D.内含子和调控区96.基因工程研究中所用的质粒大多是经过改造的，真正的天然质粒载体很少。在下列载体中被视为基因工程载体的天然质粒是( )。（分数：1.00）A.pBR322B.pSC101C.pBSD.pUC1897.限制性内切核酸酶的星号活性是指( )。（分数：1.00）A.在非常规条件下，识别和切割序列发生变化的活性B.活性大大提高C.切割速度大大加快D.识别序列与原来的完全不同98.切口平移是指在( )作用下，使( )带上放射性标记。（分数：1.00）A.DNA 聚合酶，RNAB.DNA 聚合酶，DNAC.DNA 聚合酶
23、，RNAD.DNA 聚合酶，DNA99. 互补筛选法属于( )。（分数：1.00）A.抗药性标志筛选B.酶联免疫筛选C.标志补救筛选D.原位杂交筛选E.免疫化学筛选100.DNA 被某限制性内切核酸酶切割后，电泳得到的电泳带有些扩散，下列原因中哪一项不太可能?( )（分数：1.00）A.酶失活B.底物 DNA 不纯，污染有蛋白质C.酶切条件不合适D.由外切核酸酶污染101.要对一双链的 DNA 分子进行 3端标记可用( )。（分数：1.00）A.Klenow 酶B.DNA 聚合酶C.T4 DNA 聚合酶D.T7 DNA 聚合酶102.下面哪一种不是产生星号活性的主要原因?( )（分数：1.00
24、）A.甘油含量过量B.反应体系中含有有机溶剂C.含有非 Mg2+的二价阳离子D.酶切反应时酶浓度过低103.基因工程技术常用的限制性内切核酸酶为( )。（分数：1.00）A.类酶B.类酶C.类酶D.类酶E.类酶104.用于 Northern 杂交的探针可以是放射性标记的( )。（分数：1.00）A.DNAB.dNTPC.抗体D.抗原105.有关理想质粒载体的特点，正确的是( )。（分数：1.00）A.为线性单链 DNAB.含有多种限制酶的单一切点C.含有同一限制酶的多个切点D.其复制受宿主控制E.不含耐药基因106.M13K07 是一种辅助噬菌体，可以用来帮助噬菌粒制备单链 DNA，这是由于(
25、 )。（分数：1.00）A.M13K07 能够进行滚环复制，得到大量单链噬菌体 DNAB.M13K07 能够提供成熟包装蛋白质C.M13K07 提供成熟包装所需的信号D.M13K07 提供噬菌粒进行单链复制所需的所有蛋白质107.同一种质粒 DNA 可以以三种不同的形式存在，它们的迁移速率是( )。（分数：1.00）A.oc DNAsc DNA1DNAB.sc DNA1DNAoc DNAC.1DNAoc DNAsc DNAD.sc DNAoc DNA1DNA108.第 1 个作为重组 DNA 载体的质粒是( )。（分数：1.00）A.pBR3222B.ColE1C.pSC101D.pUC181
26、09.基因工程技术中实现目的基因与载体 DNA 连接的酶是( )。（分数：1.00）A.DNA 聚合酶B.RNA 聚合酶C.DNA 连接酶D.RNA 连接酶E.限制性内切核酸酶110.能够用来克隆 30kb 以上大小外源 DNA 片段的质粒载体是( )。（分数：1.00）A.charomidB.plasmidC.cosmidD.phagemid111.随机引物标记探针，下列各项中哪一项是不正确的?( )（分数：1.00）A.双链 DNA、单链 DNA、RNA 都是可以标记的B.不需用 DNA 酶预处理C.反应时可用 Klenow 酶D.反应时可用 DNA 聚合酶112.将 PstI 限制酶切割
27、后的目的基因与用相同内切酶切割后的载体 DNA 连接属( )。（分数：1.00）A.同聚物加尾连接B.人工接头连接C.平端连接D.黏性末端连接E.非黏性末端连接113.选用融合蛋白的表达策略的主要优点是( )。（分数：1.00）A.容易检测表达蛋白B.构建表达载体方便C.表达产物较稳定D.易获得有天然活力的蛋白质114.为了正确地构建一个真核基因组的物理图谱( )。（分数：1.00）A.必须分离单条染色体B.必须从单倍体细胞中分离 DNA，这样避免由于二倍体细胞中同源染色体的存在而产生的干扰C.必须进行单个染色体分析D.必须找到对于每个染色体只切割一次的限制酶E.必须首先分离核 DNA 和细胞
28、器 DNA，然后分别对它们作图115.下面关于细菌人工染色体的特征描述，除了( )外都正确。（分数：1.00）A.通过电激法将其转化大肠杆菌比 CaCl2的转化率提高了 10100 倍B.细菌人工染色体在细菌中以超螺旋环状存在，使分离操作相对容易C.细菌人工染色体在大肠杆菌中保持高拷贝数D.克隆到细菌人工染色体上的外源片段可以直接进行序列测定以获得末端序列116.用下列方法进行重组体的筛选，表明出现了外源基因的产物的方法是( )。（分数：1.00）A.Southern 印迹B.Northern 印迹C.Western 印迹D.菌落原位杂交117.关于穿梭质粒载体，下面哪一种说法最正确?( )（
29、分数：1.00）A.在不同的宿主中具有不同的复制机制B.在不同的宿主中使用不同的复制起点C.在不同的宿主中使用不同的复制酶D.在不同的宿主中具有不同的复制速率118.关于质粒的相容性，下面哪种说法不正确?( )（分数：1.00）A.不同不相容群的质粒能够共存于同一细胞中B.质粒可以分为若干个不相容群，但不能分为若干相容群C.如果 a、b 两种质粒不相容，说明它们的复制机制相同D.属于同一个不相容群的质粒，不仅复制机制相同，而且拷贝数和相对分子质量也相同119.基因工程中，可以用碱性磷酸酶( )。（分数：1.00）A.防止 DNA 的自身环化B.降解 DNA 样品中混杂的 RNAC.制备突出的
30、3端D.上述方法都正确120.胰岛素通常以融合蛋白的方式在大肠杆菌中表达，利用融合处有一个甲硫氨酸残基，可以用何种方法将胰岛素从融合蛋白上切下来。( )（分数：1.00）A.氢氟酸裂解B.羟氨裂解C.蛋白水解酶D.溴化氰裂解121.分析限制性内切核酸酶切割 DNA 所得到的片段长度有助于物理作图，这是因为( )。（分数：1.00）A.即使只有一种限制酶，因为 DNA 是线性的，所以也可以迅速准确确定限制片段序列B.内切酶在等距离位点切割 DNA，同时对于每个生物体的长度是特异的C.DNA 的线性意味着单限制酶切片段的长度之和等于 DNA 的总长D.内切酶的消化活性是物种特异的E.这一技术同时为
31、核苷酸序列提供了广泛信息122.cDNA 是指( )。（分数：1.00）A.在体外经反转录合成的与 RNA 互补的 DNAB.在体外经反转录合成的与 DNA 互补的 DNAC.在体外经转录合成的与 DNA 互补的 RNAD.在体内经转录合成的与 DNA 互补的 RNA123.下面关于松弛型质粒性质的描述中，不正确的是( )。（分数：1.00）A.质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，而不受染色体复制机制的制约B.可以用氯霉素作用进行扩增C.通常带有抗药性标记D.同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型复制子124.型限制性内切核酸酶( )。（分数：1.00）A.具内切酶和甲基化酶活性且经常识别
32、回文序列B.仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性有另一种酶提供C.限制性识别非甲基化的核苷酸序列D.有外切核酸酶和甲基化酶活性125.基因组代表一个细胞或生物体的( )。（分数：1.00）A.部分遗传信息B.整套遗传信息C.可转录基因D.非转录基因E.可表达基因126.以质粒为载体将重组 DNA 导入受体细胞的过程称为( )。（分数：1.00）A.转化B.转导C.接合D.转染127.关于 DNA 接头在基因工程中的作用，下面的说法中哪一项不正确?( )（分数：1.00）A.给外源 DNA 添加适当的酶切位点B.人工构建载体C.调整外源基因的可读框D.增加调控元件128.关于多克隆位点的描述不正确的
33、是( )。（分数：1.00）A.仅位于质粒载体中B.具有多种酶的识别序列C.不同酶的识别序列可以有重叠D.一般是人工合成后添加到载体中的129.Ti 质粒( )。（分数：1.00）A.存在于所有农杆菌细胞中B.作为双链 DNA 被转移C.在植物中导致肿瘤D.在植物细胞中作为染色体外质粒130.通过限制酶切片段分析，可以对等位基因进行精确的分析比较，其原因是( )。（分数：1.00）A.限制性内切核酸酶只切割两个变异等位基因中的一个B.它利用限制性位点作为遗传标记C.一个特定细胞中等位基因的核苷酸序列不会是相同的D.限制性内切核酸酶的酶切位点被限制在编码区域内131.在细菌转化实验中，如将 DN
34、A 酶加入培养基，将使转化( )。（分数：1.00）A.不能实现B.加速C.不受影响D.失去规律132.下列常用于原核表达体系的是( )。（分数：1.00）A.酵母细胞B.昆虫细胞C.哺乳类细胞D.真菌E.大肠杆菌133.下列哪个酶要求有引物才能发挥作用( )。（分数：1.00）A.限制性内切核酸酶B.DNA 连接酶C.末端转移酶D.反转录酶134.黏粒是一种人工构建的载体，( )。（分数：1.00）A.具有 cos 位点，因此可以进行体外包装B.具有质粒 DNA 的复制特性，必须利用 CaClz 制备的感受态细胞转化入大肠杆菌C.进入受体细胞后，可引起裂解反应D.进入受体细胞后，可引起溶原化
35、反应135.在蓝白斑筛选法中，IPTG 的作用是( )。（分数：1.00）A.诱导宿主合成 -半乳糖苷酶的羧基端B.诱导宿主合成 -半乳糖苷酶的氨基端C.作为酶反应的底物D.作为显色反应的指示剂136.下列酶中，催化反应不需要 ATP 的是( )。（分数：1.00）A.EcoKB.EcoBC.T4 DNA 连接D.BamH 137.当大量的 RNA 与有限的 DNA 杂交时( )。（分数：1.00）A.所有的 DNA 都杂交上了B.50%的 DNA 杂交上了C.50%的 RNA 杂交上了D.没有 RNA 杂交上，而所有的 DNA 全部复性成为双链 DNA138.用菌落原位杂交法筛选重组子时，(
36、 )。（分数：1.00）A.需要外源基因的转录产生 mRNA，才能进行。B.需要外源基因的翻译产生蛋白质，才能进行。C.所用探针必须与克隆的基因有同源性D.上述说法都正确139.下列哪种酶不能用于聚合酶链反应(PCR)?( )（分数：1.00）A.Taq DNA 合成酶B.T7 DNA 合成酶C.引物酶D.Klenow 片段140.报道基因( )。（分数：1.00）A.必须是原核生物的基因B.以其易于分析的启动子区代替感兴趣基因的启动区C.产物容易检测D.能用于确定启动子何时何处有活性141.目前在转基因小鼠中常用的基因敲除技术是根据( )的原理而设计的。（分数：1.00）A.反义核苷酸的抑制
37、作用B.转座成分的致突变作用C.离体定向诱变作用D.同源重组142.就分子结构而论，质粒是( )。（分数：1.00）A.环状双链 DNA 分子B.环状单链 DNA 分子C.环状单链 RNA 分子D.线状双链 DNA 分子E.线状单链 DNA 分子143.重叠群是一群克隆，在这个克隆群体中各克隆( )。（分数：1.00）A.相互间重叠B.都是来自不同生物间的克隆C.插入片段位于不同染色体的不同区段D.位于同一染色体的不同区段144.催化聚合酶链反应的酶是( )。（分数：1.00）A.DNA 连接酶B.反转录酶C.末端转移酶D.碱性磷酸酶E.Taq DNA 聚合酶145.在对目的基因和载体 DNA
38、 进行同聚物加尾时，需采用( )。（分数：1.00）A.反转录酶B.多聚核苷酸激酶C.引物酶D.RNA 聚合酶E.末端转移酶146.在基因工程中通常所使用的质粒存在于( )。（分数：1.00）A.细菌染色体B.酵母染色体C.细菌染色体外D.酵母染色体外E.以上都不是147.在基因工程中通常所使用的质粒是( )。（分数：1.00）A.细菌的染色体 DNAB.细菌染色体外的 DNAC.病毒染色体 DNAD.病毒染色体外的 DNAE.噬菌体 DNA148.下列载体中对外源 DNA 片段的容量最大的是( )。（分数：1.00）A.质粒B.黏粒C.酵母人工染色体(YAC)D. 噬菌体149.构建基因组
39、DNA 文库时，首先需要分离细胞的( )。（分数：1.00）A.染色体 DNAB.线粒体 DNAC.总 mRNAD.tRNAE.rRNA四、简答题(总题数：50，分数：750.00)150.当两种限制性内切核酸酶的作用条件不同时，若进行双酶切，应采取何种措施?为什么?（分数：15.00）_151.什么是限制性内切核酸酶的星号活力?它受哪些因素的影响?（分数：15.00）_152.按照适当的顺序，列出将一种 mRNA 经反转录克隆到表达载体所用到的酶。（分数：15.00）_153.什么是测序酶(sequenase)?（分数：15.00）_154.什么是 Klenow 酶?具有哪些活性?简要说明其
40、在基因工程中的用途。（分数：15.00）_155.如何利用 T4 DNA 聚合酶进行双链 DNA 的 3端标记?（分数：15.00）_156.YAC 载体上具有什么样的功能性 DNA 序列?（分数：15.00）_157.作为一个理想的质粒载体必须具备什么样的特征?（分数：15.00）_158.什么是质粒的不亲和性?其分子机制如何?（分数：15.00）_159.简述质粒载体的发展改造过程。（分数：15.00）_160.什么是蓝白斑筛选?为什么蓝白斑筛选也会有假阳性?（分数：15.00）_161.什么是辅助噬菌体?它和相应的噬菌粒是如何协同工作的?（分数：15.00）_162.什么是接头连接法?人工接头在基因工程中有何用途?（分数：15.00）_163.cDNA 文库和基因组文库有何区别?（分数：15.00）_164.什么是黏粒?为什么它可以克隆大片段外源 DNA?（分数：15.00）_1
