1、NORME INTERNATIONALE 937 INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION.MEYHAPOC1HAR OPrAHM3AUMfl fl0 CTAHCIAfT3ALWWlWIRGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION Viandes et produits base de viande - Dtermination de la teneur en azote (Mthode de rfrence) Mea t and mea t products - De termina tion of
2、 nitrogen content (Re ference me thod) Premire dition - 1978-l 2-l 5 CDU 637.5 + 664.9 : 543.846 Descripteurs : viande, produit base de viande, analyse chimique, dosage, azote. Rf. no : ISO 937-1978 (F) Prix bas sur 3 pages AMANT-PROPOS LISO (Organisation internationale de normalisation) est une fdr
3、ation mondiale dorganismes nationaux de normalisation (comits membres de IISO). Llaboration des Normes internationales est confie aux comits techniques de IISO. Chaque comite membre intress par une tude a le droit de faire partie du comit technique correspondant. Les organisations internationales, g
4、ouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec IISO, participent galement aux travaux. Les projets de Normes internationales adopts par les comits techniques sont soumis aux comits membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes internationales par le Conseil de IISO. La Norm
5、e internationale ISO 937 a t labore par le comit technique EOfK 34, Produits agricoles alimentaires. Elle fut soumise directement au Conseil de IISO, conformment au para- graphe 6.13.1 des Directives pour les travaux techniques de IISO. Elle annule et remplace la Recommandation lSO/R 937-1969, qui a
6、vait t approuve par les comites membres des pays suivants : Afrique du Sud, Rp. d Grce Allemagne, R.F. Hongrie Australie Inde Bulgarie Iran Canada Irlande Colombie Isral Core, Rp. de Norvge gypte, Rp. arabe d Pologne France Portugal Roumanie Royaume-Uri TchcoslovaqlcGe Thailande Turquie U. R.S.S. Yo
7、ugoslavie Les comits membres des pays suivants lavaient dsapprouve pour des raisons techniques : Nouvel le-Zlande Pays-Bas 3 Organisation internationale de normalisation, 1978 l Imprim en Suisse NORME INTERNATIONALE ISO 937-1978 (F) Viandes et produits base de viande - Dtermination de la teneur en a
8、zote (Mthode de rfrence) 1 OBJET ET DOMAINE DAPPLICATION La prsente Norme internationale spcifie une mthode de rfrence pour la dtermination de la teneur en azote des viandes et des produits base de viande? 2 REFERENCE ISO 3 100, Viandes et produits base de vian te - chan- tillonnage. 3 DFINITION ten
9、eur en azote des viandes et des produits base de viande : Quantit dazote correspondant lammoniac produit et dtermine dans les conditions spcifies ci-aprs. 4 PRINCIPE Attaque dune prise dessai par lacide sulfurique concentr qui transforme lazote organique en ions ammonium, en prsence de sulfate de Cu
10、ivre( II) comme catalyseur; alcalini- sation, distillation de lammoniac libr dans un excs de solution dacide borique, titrage de i ammoniac combin avec lacide borique par lacide chlorhydrique et calcul, partir de lammoniac produit, de la teneur en azote de lchantillon. 5 RACTIFS Tous les ractifs doi
11、vent tre de qualit analytique reconnue. Leau utilise doit tre de leau distille ou de leau de puret au moins quivalente. 5.1 Sulfate de cuivre(R) pentahydrat (CuS0,.5H,O). 5.2 Sulfate de potassium (K$O,), anhydre. 5.3 Acide sulfurique, pzo 1,84 g/ml. 5.4 Hydroxyde de sodium, solution exempte de carbo
12、nate, contenant environ 33 g dhydroxyde de sodium (NaOH) pour 100 g de solution. Dissoudre 500 g dhydroxyde de sodium dans 1 000 ml deau. 5.5 Acide borique, solution. Dissoudre 40 g dacide borique (H,BO,) dans de leau et complter 1 000 ml. 5.6 Acide chlorhydrique, solution titre 0,l N, la normalit t
13、ant connue avec quatre dcimales. 5.7 Indicateur, solution : indicateur mixte (rouge de mthyle-bleu de mthylne)*), prpar par dissolution de 2 g de rouge de mthyle et de 1 g de bleu de mthylne dans 1 000 ml dthanol 95 % (WV). Le changement de couleur de la solution dindicateur a lieu pour un pH de 5,4
14、. Conserver la solution dindicateur dans une bouteille fonce dans un endroit sombre et frais. 5.8 Rgularisateurs dbullition. 5.8.3 Pour /attaque Billes en verre, carbure de silicium ou clats de porcelaine dure. 5.8.2 Pour la distillation Carbure de silicium ou morceaux de pierre ponce rcem- ment inc
15、inrs. 6 APPAREILLAGE Matriel courant de laboratoire, et notamment : 6.1 Hachoir mcanique viande, type de laboratoire, muni dune plaque perfore dont les trous ont un diamtre ne dpassant pas 4 mm. 6.2 Papier sulfuris, denviron 9 cm x 6 cm. 1) Voir aussi ISO 187 1, Produits agricoles alimentaires - Dir
16、ectives gnrales pour le dosage de lazote selon la mthode de Kjeldahl. 2) Communment nomm indicateur de Tashiro. 1 ISO 937-1978 (F) 6.3 Burette, de 50 ml de capacit, conforme IISO/R 385, classe A. 6.4 Matras de Kjeldahl, de 800 ml de capacit maximale, muni, si ncessaire, dun bouchon en verre piriform
17、e sadaptant librement au sommet du col. 6.5 Appareil dentranement par la vapeur, ou, en variante, appareil de distillation ordinaire. 6.6 Dispositif de chauffage, sur lequel le matras de Kjeldahl peut tre chauff en position incline de manire que la source de chaleur natteigne que la partie de la par
18、oi du matras situe au-dessous du niveau du liquide. Par exemple, une plaque damiante pourvue dun trou circulaire convient dans le cas dun chauffage par le gaz, afin que seule la partie infrieure du matras soit expose la flamme nue. 6.7 Dispositif daspiration, pour les vapeurs dacide libres pendant l
19、attaque. 6.8 Balance analytique. 7 CHANTILLON 7.1 Oprer sur un chantillon reprsentatif dau moins 200 g. Voir ISO 3100. 7.2 Conserver lchantillon de facon viter toute dtrio- ration et tout changement dans sa composition. Les agents de conservation, sil y en a, ne doivent pas contenir de composants az
20、ots en quantits mesurables. 8 MODE OPRATOIRE 8.1 Prparation de lchantillon pour essai Rendre lchantillon homogne par au moins deux passages dans le hachoir viande (6.1) et mlange. Garder Ichan- tillon dans un flacon ferm, tanche et rempli complte- ment, et le conserver de facon viter toute dtriorati
21、on et tout changement dans sa composition. Analyser Ichan- tillon ds que possible aprs lhomognisation, mais toujours dans les 24 h. 8.2 Prise dessai Placer quelques rgularisateurs dbullition (5.8) dans le matras de Kjeldahl (6.4), puis ajouter environ 15 g du sulfate de potassium anhydre (5.2) et 0,
22、5 g du sulfate de cuivre(H) (5.1). Peser, 0,001 g prs, environ 2 g (ou 1,5 g dans le cas dun chantillon trs gras) de lchantillon pour essai (8.1) sur un morceau de papier sulfuris (6.2). Introduire le papier sulfuris et la prise dessai dans le matras de Kjeldahl. 8.3 Dtermination Ajouter, dans le ma
23、tras de Kjeldahl, 25 ml de lacide sulfurique (5.3). Mlanger doucement la solution par rotation. Le cas chant, un bouchon piriforme en verre peut tre introduit dans le col du matras, lextrmit effile tant dirige vers le bas. Placer le matras en position incline (inclinaison denviron 40” par rapport la
24、 verticale) sur le dispositif de chauffage (6.6). Le chauffer dabord doucement, jusqu ce que la formation de mousse cesse et que le contenu se soit compl- tement liqufi. Puis attaquer en chauffant vigoureusement et en faisant tourner priodiquement le matras, jusqu ce que le liquide soit compltement
25、limpide et de teinte claire bleu-vert. Maintenir le ,liquide bullition durant encore 90 min. La totalit de lattaque doit seffectuer en un minimum de 2 h. Prendre soin quaucun liquide condens ne coule sur la paroi extrieure du matras. viter que trop dacide sulfurique ne schappe par suite dune surchau
26、ffe pendant lattaque, ce qui risquerait dentraner une perte dazote. Refroidir environ 40 “C et aiouter, avec prcaution, s environ 50 ml deau. Mlanger et laisser refroidir. Verser, au moyen dune prouvette gradue, 50 ml de la solution dacide borique (5.5) dans une fiole conique denviron 500 ml de capa
27、cit, ajouter 4 gouttes de la solution dindicateur (5.7), mlanger et placer la fiole sous le rfrigrant de lappareil de distillation (6.5) de facon que lextrmit de lallonge plonge dans le liquide. Oprer sur le contenu du matras de Kjeldahl selon lune des deux techniques suivantes : a) En cas dentranem
28、ent par la vapeur Transvaser le contenu du matras de Kjeldahl dans Iappa- reil de distillation et rincer le matras avec environ 50 ml deau. Ajouter, au moyen dune prouvette gradue, 100 ml de la solution dhydroxyde de sodium (5.4), en les versant avec soin le long du col inclin du matras, afin que le
29、s deux couches ne se mlangent pas dans le matras. Relier immdiatement le matras la tte distiller de lappareil de distillation. Chauffer le liquide alcalin en le faisant traverser par la vapeur jusqu bullition et maintenir celle-ci durant 20 min. Chauffer dabord lentement afin de rduire un minimum la
30、 formation de mousse. Le volume de distillat recueilli doit tre dau moins 150 ml. b) En cas de distillation ordinaire Diluer, avec prcaution, le contenu du matrasde Kjeldahl avec 300 ml deau et agiter par rotation. Transvaser, si ncessaire, dans une fiole de 1 litre. Aprs environ 15 min, ajouter, au
31、 moyen dune prouvette gradue, 100 ml de la solution dhydroxyde de sodium (5.4), en les versant avec soin le long du col inclin du matras, afin que les deux couches ne se mlangent pas dans le matras. Relier immdiatement le matras la tte distiller de lappareil de distillation. 2 ISO 937-1978 (F) Disti
32、ller au moins 150 ml du liquide, mme si le mlange prsente des soubresauts irrguliers. Poursuivre la distilla- tion jusqu ce que le mlange commence prsenter des soubresauts ou jusqu lobtention de 250 ml de distillat. Sassurer que le distillat est effectivement refroidi et viter que la solution dacide
33、 borique ne schauffe. Dans les deux cas, juste avant la fin de la distillation, abaisser la fiole conique afin que lextrmit de lallonge soit au-dessus du niveau du liquide. Rincer lextrmit de lallonge au-dessus du liquide ( lintrieur et lextrieur) avec un peu deau. Vrifier que la distillation de lam
34、moniac est acheve, au moyen dun papier de tournesol rouge, humect avec de leau distille; sa couleur ne doit pas tre modifie par le liquide provenant du rfrigrant. Arrter le chauffage. Si la distillation se rvle tre incomplte, effectuer une nouvelle dtermination en se conformant soigneusement aux ind
35、ications. Titrer le contenu de la fiole conique avec la solution dacide chlorhydrique (5.6). Noter le volume de solution dacide chlorhydrique ncessaire, en lestimant 0,02 ml prs. Effectuer deux dterminations sur des prises dessai provenant du mme chantillon pour essai. 8.4 Essai blanc Effectuer touj
36、ours un essai blanc (en double) lorsque de nouveaux lots de ractifs ou des solutions frachement prpares sont utiliss. Il est recommand deffectuer priodiquement un essai blanc pour les ractifs et les solutions qui ont dj t utiliss depuis quelque temps. Effectuer cet essai blanc selon 8.3, en prenant
37、uniquement un morceau de papier sulfuris (6.2). 9 EXPRESSION DES RSULTATS 9.4 Mode de calcul et formule La teneur en azote, exprime en pourcentage en masse, est gale 100 0,001 4 x (v, - V,) x- m o V, est le volume, en millilitres, de solution dacide chlorhydrique 0,l N, utilis pour lessai blanc; V,
38、est le volume, en millilitres, de solution dacide chlorhydrique 0,l N, utilis pour la dtermination; m est la masse, en grammes, de la prise dessai. NOTE - Si la solution titre dacide chlorhydrique utilise na pas exactement la concentration prvue en 5.6, un facteur de correction appropri doit tre uti
39、lis pour le calcul du rsultat. Prendre comme rsultat la moyenne arithmtique des deux dterminations si les conditions de rptabilit (voir 9.2) sont remplies. Exprimer le rsultat 0,Ol g prs dazote pour 100 g dchantillon. 9.2 Rptabilit La diffrence entre les rsultats de deux dterminations, effectues pre
40、sque simultanment ou rapidement lune aprs lautre par le mme analyste, ne doit pas dpasser 0,lO g dazote pour 100 g dchantillon. 10 REMARQUES 10.1 La dtermination doit tre effectue dans une pice exempte de vapeur dammoniac. 10.2 II est galement possible deffectuer le dosage sur une partie aliquote du
41、 contenu du matras de Kjeldahl. Dans ces conditions, des modifications appropries doivent tre apportes lappareillage et au mode opratoire (quantits et concentrations des ractifs utiliss, temps de distillation, volume de distillat). Ces modifications doivent tre men- tionnes dans le procs-verbal dess
42、ai. 10.3 Lazote provenant de composs organiques non protiques sera inclus dans la dtermination, et ainsi des rsultats inexacts de teneur en protines seront obtenus si la teneur en protines est calcule partir de la teneur en azote. Si, outre le rsultat en azote, on veut exprimer le rsultat en protine
43、s, il faut indiquer le coefficient utilis. Il PROCS-VERBAL DESSAI Le procs-verbal dessai doit indiquer la mthode utilise et le rsultat obtenu, en azote; si le rsultat en protines est demand, le coefficient utilis doit galement tre donn. II doit, en outre, mentionner tous les dtails opratoires non pr
44、vus dans la prsente Norme internationale, ou facultatifs (notamment si le dosage a t effectu sur une partie aliquote - voir 10.2), ainsi que les incidents ventuels susceptibles davoir agi sur le rsultat. Le procs-verbal dessai doit donner tous les renseignements ncessaires lidentification complte de lchantillon. 3 Page blanche Page blanche Page blanche
