1、NORME INTERNATIONALE INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION MEXYHAPOHAR OPTAHlMAL(MR Il0 CTAHAPTM3AMM Huiles essentielles - Analyse par chromatographie liquide sous pression - Mthode gnrale Essen tial oils - Analysis b y high performance liquid ch
2、romatography - General method ISO 8432 Premire dition 1987-10-01 Numro de rfrence 1 ISO 8432: 1987 (F) Avant-propos LISO (Organisation internationale de normalisation) est une fdration mondiale dorganismes nationaux de normalisation (comits membres de IISO). Llaboration des Normes internationales es
3、t normalement confie aux comits techniques de IISO. Chaque comit membre intress par une tude a le droit de faire partie du comit technique cr cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec IISO participent galement aux travaux. Les projets de
4、Normes internationales adopts par les comits techniques sont soumis aux comits membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter- nationales par le Conseil de IISO. Les Normes internationales sont approuves confor- mment aux procdures de IISO qui requirent lapprobation de 75 % au m
5、oins des comits membres votants. La Norme internationale ISO 8432 a t labore par le comit technique ISO/TC 54, Huiles essentielles. Lattention des utilisateurs est attire sur le fait que toutes les Normes internationales sont de temps en temps soumises rvision et que toute rfrence faite une autre No
6、rme internationale dans le prsent document implique quil sagit, sauf indication contraire, de la dernire dition. 0 Organisation internationale de normalisation, 1987 Imprim en Suisse NORME INTERNATIONALE ISO 8432: 1987 (F) Huiles essentielles - Analyse par chromatographie liquide sous pression - Mth
7、ode gnrale 1 Objet et domaine dapplication 4.4 Solvant dlution. La prsente Norme internationale spcifie une mthode gn- rale danalyse par chromatographie liquide sous pression des huiles essentielles, dans le but de doser un compos spcifique et/ou de rechercher un profil caractristique. La nature et
8、la qualit des solvants seront choisies selon lchantillon analyser, la colonne et le dtecteur utiliss. Les solutions doivent tre exemptes de particules solides infrieures 0,5 prn. 2 Rfrence 4.5 Gaz. ISO 356, Hui/es essentielles - Prparation de l d,( II) est la distance de rtention du pic Il ; bo 5(l)
9、 I est la largeur, en millimtres, du pic I mi-hauteur; b0,kJ II) est la largeur, en millimtres, du pic II mi- hauteur. (Voir la figure.) 8 Performance de la colonne 8.1 Test dinertie chimique Sassurer que les produits identifier ne sont pas dgrads. 8.2 Efficacit de la colonne Dterminer le nombre de
10、plateaux effectifs UV) sur le pic de ltalon interne spcifi dans chaque norme particulire et en utilisant les solvants galement spcifis, temprature iso- therme, et dans des conditions isocratiques laide de la for- mule suivante o d, est la distance, en millimtres, mesure sur la ligne de base, entre l
11、e point dinjection et une perpenduculaire abais- se du maximum du pic tudi; 9 Mthodes de dosage 9.1 Conditions gnrales Raliser le chromatogramme comme le prcise la Norme inter- nationale particulire. Dans certaines dterminations de composants spcifiques, la Norme internationale particulire peut pres
12、crire doprer en iso- cratique ou en gradient dlution. Dans ces cas, le dbit doit tre rgl de telle sorte que lon obtienne la sparation indique dans la Norme internationale pafticulire. Aprs stabilisation des conditions opratoires, injecter une quantit approprie de la prise dessai. On obtient le chrom
13、atogramme A ). Sur le chromatogramme HA obtenu, vrifier que tous les pics recherchs sont bien spars. A, est laire du ltalon interne pic, en units dintgrateur, correspondant 10 Expression des rsultats mR est rente; la masse , en milligra mmes, de la substance de rf- 10.1 Mthode de ltalon interne mE e
14、st la masse, en milligrammes, de ltalon interne. Calculer la teneur, cx, exprime en pourcentage compos doser laide de la formule en masse, du 9.2.2 Dosage AxmE X K x 100 *Em, Si la Norme internationale applicable prescrit lemploi dun ta- lon interne, prparer un mlange en pesant 01 mg prs, des quanti
15、ts appropries de Ihuile essentielle et de ltalon interne. Choisir la quantit dtalon interne de faon que laire du pic du compos a doser et celle de ltalon interne soient approximativement gales. o A, est laire du pic, au compos doser en units d intgrateur, correspondant Aprs stabilisation de lensembl
16、e du systme, injecter une quantit approprie du mlange et effectuer lanalyse dans les conditions prcises en 9.1. On obtient le chromato- gramme ( C ). A, est laire du pic ltalon interne; en units dintgrateur, correspondant mx est la masse, en milligrammes, de Ihuile essentielle; 9.3 Mthode par additi
17、on mE est la masse, en milligrammes, de letalon interne; K est le coefficient de rapport ltalon interne rponse du compos doser Par Si pour un dosage la mthode de ltalon utilise, employer la mthode par addition i nterne ne peut tre 3 ISO 8432: 1987 (FI 10.2 Mthode par addition Calculer la teneur, cx,
18、 exprime en pourcentage en masse, en compos doser, laide de la formule A, est laire du pic correspondant au compos Y sur le chromatogramme ( E ). 10.3 RAsultats et rptabilit mR r -X - x 100 (r r) Prendre comme rsultats pour le coefficient de rponse K m r-r et pour la teneur en compos doser cx les va
19、leurs moyennes de plusieurs essais (au moins trois) effectus sur le mme chantillon. Les diffrentes valeurs prises en considration pour o mR est la masse, en grammes, de la substance de rf- rente (4.1) ; calculer ces moyennes ne doivent pas scarter au-del dun certain pourcentage de celles-ci. Ce pour
20、centage et le nombre dessais doivent tre spcifis dans les diffrentes mthodes m est la masse, en grammes, de Ihuile essentielle; dessais ou Normes internationales particulires. AX r - = A, 11 Procs-verbal dessai Le procs-verbal dessai doit contenir les indications suivantes : o A, est laire du pic co
21、rrespondant au compos X sur le chromatogramme ( D ; A, est laire du pic correspondant chromatogramme H D ; au compos A, r = - 4 Y sur le o A, est laire du pic correspondant au compos X sur le chromatogramme ( E ; a) b) systme dappareillage; rfrence la prsente Norme internationale; c) caractristiques
22、 de la colonne remplissage, phase station naire) ; d) caractristiques dutilisation ; du dtecteur (facultatif) et conditions (matriau, dimensions, e) caractristiques de la phase mobile (dbit et nature); identification de lchantillon (quantit injecte et ven- f) tuelle dilution) ; g) rsultats obtenus. Page blanche 60 8432 : 1987 (FI CDU 665.5 : 543.544 Descripteurs : huile essentielle, analyse chimique, mthode chromatographique, mthode chromatographique sur colonne. Prix bas sur 4 pages
