1、NORME INTERNATIONALE ISO 8294 Premire dition 1994-I I-01 Corps gras dorigines animale et vgtale - Dtermination de la teneur en cuivre, fer et nickel - Mthode par spectromtrie dabsorption atomique avec four en graphite Animal and vegetable fats and oils - Determination of copper, iron and nickel cont
2、ents - Graphite furnace atomic absorption method Numro de rfrence ISO 8294: 1994(F) ISO 8294: 1994(F) Avant-propos LISO (Organisation internationale de normalisation) est une fdration mondiale dorganismes nationaux de normalisation (comits membres de IISO). Llaboration des Normes internationales est
3、 en gnral confie aux comits techniques de IISO. Chaque comit membre intress par une tude a le droit de faire partie du comit technique cr cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernemen- tales, en liaison avec IISO participent galement aux travaux. LISO colla- bore
4、troitement avec la Commission lectrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation lectrotechnique. Les projets de Normes internationales adopts par les comits techniques sont soumis aux comits membres pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert lapprobation
5、 de 75 % au moins des co- mits membres votants. La Norme internationale ISO 8294 a t labore par le comit technique ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, sous-comit SC 11, Corps gras dorigines animale et vgtale. Lannexe A de la prsente Norme internationale est donne uniquement titre dinformatio
6、n. 0 ISO 1994 Droits de reproduction rservs. Sauf prescription diffrente, aucune partie de cette publi- cation ne peut tre reproduite ni utilise sous quelque forme que ce soit et par aucun pro- cd, lectronique ou mcanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans laccord crit de lditeur. Orga
7、nisation internationale de normalisation Case Postale 56 l CH-l 211 Genve 20 l Suisse Imprim en Suisse ii NORME INTERNATIONALE 0 KO ISO 8294: 1994(F) Corps gras dorigines animale et vgtale - Dtermination de la teneur en cuivre, fer et nickel - Mthode par spectromtrie dabsorption atomique avec four e
8、n graphite 1 Domaine dapplication La prsente Norme internationale prescrit une m- thode de dtermination des traces de cuivre, fer et nickel dans les corps gras dorigines animale et vg- tale, dsigns ci-aprs par (corps gras). 2 Rfrences normatives Les normes suivantes contiennent des dispositions qui,
9、 par suite de la rfrence qui en est faite, consti- tuent des dispositions valables pour la prsente Norme internationale. Au moment de la publication, les ditions indiques taient en vigueur. Toute norme est sujette rvision et les parties prenantes des accords fonds sur la prsente Norme internatio- na
10、le sont invites rechercher la possibilit dappli- quer les ditions les plus rcentes des normes indiques ci-aprs. Les membres de la CEI et de IISO possdent le registre des Normes internationales en vigueur un moment donn. ISO 661 :1989, Corps gras dorigines animale et vg- tale - Prparation de lchantil
11、lon pour essai. ISO 3696: 1987, Eau pour laboratoire usage analyti- 9ue - Spcification et mthodes dessai. 3 Principe Atomisation dune prise dessai du corps gras dans un spectromtre dabsorption atomique avec four en graphite, pralablement talonn laide de solutions talons des composs organiques des mt
12、aux do- ser. Calcul des teneurs en mtaux partir des ab- sorptions aux longueurs donde choisies. 4 Ractifs Utiliser uniquement des ractifs de qualit analytique reconnue, et de leau de qualit 2, conforme aux spcifications de IISO 3696. 4.1 Oxyde daluminium, qualit analytique. NOTE 1 Un oxyde daluminiu
13、m approprie (qualit no 1077) est distribue par MERCK, D-1600, Darmstadt, Al- lemagne?) 4.2 Huile de dilution, par exemple, huile alimentaire raffine liquide la temprature ambiante. La conserver dans un flacon en polypropylne ou en polythylne exempt de mtaux (5.1). Les teneurs en mtaux de Ihuile ne d
14、oivent pas tre suprieures CU, 3 pglkg; Fe, 5 pglkg; et Ni, 5 pg/kg. NOTE 2 Un chantillon dhuile pratiquement exempte de mtaux est obtenu laide du mode opratoire suivant. 1) Cette information est donne lintention des utilisateurs de la prsente Norme internationale et ne signifie nullement que IISO ap
15、prouve ou recommande lemploi exclusif du (des)produit(s) ainsi dsign(s). 1 , ISO 8294: 1994(F) Q ISO Dissoudre Ihuile dans de lther de ptrole (de point dbullition compris entre 40C et 60 OC), la proportion tant de 1 kg dhuile pour 3 litres dther de ptrole. Prparer une colonne doxyde daluminium (rapp
16、ort diamtrelhauteur = 1110) en utilisant deux fois la masse doxyde daluminium (active par chauffage a 150 “C pendant 14 h), en tant que masse de Ihuile a purifier. Ajouter la solution dans la co- lonne et eluer un volume dther de ptrole de 5/3 fois le volume dans lequel lchantillon a t dissout. vapo
17、rer lther de ptrole de Iluat sur un bain deau bouillante en utilisant un faible courant dazote (2 I/min a 5 l/min). limi- ner les dernires traces dther de ptrole sous vide. qui est un gaz toxique, il est ncessaire de ventiler en per- manence la zone o se situe le four. 5 Appareillage Matriel courant
18、 de laboratoire et, en particulier, ce qui suit. 5.1 Flacons et bouchons, en polypropylne ou en polythylne, exempt de mtal, dune capacit de 20 ml et 50 ml. 4.3 Solutions talons mres Prparer des solutions talons mres contenant res- pectivement CU, 2 mglkg; NOTE 6 Les flacons en polypropylne ou en pol
19、ythylne peuvent tre rendus exempts de mtaux de la faon sui- vante: nettoyer soigneusement les flacons avec une solu- tion chaude dacide nitrique c(HNO) = 1 mol/l, les rincer avec de leau puis les scher a ltuve environ 80 OC. Fe, 10 mg/kg; et 5.2 Micropipettes, de 20 1 et 100 1. Ni, 10 mg/kg, 5.3 Emb
20、outs de micropipettes par dilution approprie des talons des composs or- ganiques des mtaux doser, avec Ihuile de dilution (4.2). NOTE 3 On peut se procurer des talons appropries, par exemple, auprs de Continental Oil Company, Ponta City, Oklahoma, USA. (Conostan, 5 000 mg/kg) ou Merck, D-1600 Darmst
21、adt, Allemagne (1 000 mg/kg).l) 5.4 Four lectrique, rglable 150 “C + 2 “C. - 5.5 Spectromtre dabsorption atomique, muni soit dune imprimante en mode (hauteur de pic, soit dun enregistreur stylet en mode (continu) (r- ponse pleine chelle en 0,2 s), ainsi que dune lampe cathode creuse approprie ou dun
22、e lampe exci- tation haute frquence EDL et dun correcteur de fond 4.4 Solutions talons de travail au deutrium. Le jour de leur utilisation, prparer les solutions de travail en diluant les solutions mres (4.3) avec Ihuile de dilution (4.2) dans les proportions suivantes: CU, 0,05 mg/kg; 0,l mg/kg; 0,
23、2 mg/kg 5.6 Atomiseur four en graphite, plac dans le spectromtre dabsorption atomique (5.5) et dot dune unit de commande pour la programmation de la temprature et dun tube en graphite. Fe, 0,25 mg/kg; 0,5 mg/kg; 1,O mg/kg 5.7 Tube en graphite, non revtu pour atomisation. Ni, 0,25 mg/kg; 0,5 mg/kg; 1
24、,O mg/kg 6 chantillonnage 4.5 Solution de niobium Nb(NO,), contenant 1 000 mg de niobium par litre; (solution talon AAS en matrice aqueuse. II est important que le laboratoire reoive un chan- tillon rellement reprsentatif, non endommag ou modifi lors du transport et de lentreposage. NOTE 4 Une solut
25、ion approprie est disponible auprs de Alfa Division, 152 Andover Street, Danvers, MA 01923, USA (code 88083)J Lchantillonnage ne fait pas partie de la mthode spcifie dans la prsente Norme internationale. Une mthode dchantillonnage recommande est donne dans IISO 5555. 4.6 n-Heptane, qualit analytique
26、. 4.7 Argon, ayant une puret minimale de 99,99 % NOTE 5 Si lon ne peut disposer dargon, lazote peut tre utilise pour purger lappareillage. tant donn quau- dessus de 2 300 “C, lazote forme du cyanure dhydrogne 7 Prparation de lchantillon pour essai Prparer lchantillon pour essai conformment IISO 661.
27、 Ne pas filtrer lchantillon. 43 ISO ISO 8294: 1994(F) 8 Mode opratoire Dterminer la teneur en chacun des mtaux lune aprs lautre. NOTE 7 Sil y a lieu de vrifier si lexigence de rptabilit est satisfaite, effectuer deux dterminations spares dans les conditions de rptabilit. 8.1 Prparation de lappareill
28、age 8.1.1 Mettre en marche le spectromtre dabsorp- tion atomique (5.5) et le correcteur de fond au deut- rium. 8.1.2 Conformment aux instructions du fabricant, procder au rglage de lintensit de la lampe, ainsi quau rglage de la longueur donde, de la largeur de la fente et de lamplification. Les long
29、ueurs donde requises pour les diffrents mtaux sont les sui- vantes: - cuivre: 3247 nm - fer: 302,l nm - nickel: 232,0 nm 8.1.3 Optimiser la position de latomiseur four en graphite (5.6) dans le spectromtre dabsorption ato- mique (5.5) et rgler le programme requis sur lunit de commande du four, confo
30、rmment au tableau 1. NOTE 8 Si lappareillage disponible ne peut tre rgl conformment au tableau 1, utiliser un programme compa- rable adapte a lappareillage. Si, dans un tel cas, la correc- tion de fond nest pas satisfaisante, diluer la prise blanc, les solutions talons de travail et les chantillons
31、pour essai avec un solvant organique (par exemple le n-heptane), un maximum de I:l 2 (m/m) et effectuer les mesurages spec- tromtriques temprature ambiante. Pour la dtermination de la teneur en cuivre et en ni- ckel, utiliser un tube en graphite non revtu (5.7). Pour la dtermination de la teneur en
32、fer, utiliser un tube revtu intrieurement de niobium, afin dtre sr que la quantit totale de fer soit dtermine. NOTE 9 Avec un tube non revtu, les rsultats varient suivant le type de compos du fer prsent dans le corps gras. Un mode opratoire approprie est le suivant: Injecter 100 PI de solution de ni
33、obium (4.5) dans le four. Dmarrer le programme de temprature pour scher a 100 “C pendant 60 s, puis atomiser 2 700 “C pendant 5 s. Rpter ce mode opratoire jusqu injection de 300 1 de la solution de niobium. Atomiser 2 700 “C jusqu ab- sorbance constante (afin dliminer toute contamination du fer). 8.
34、1.4 Avant chaque injection dchantillon, prtraiter lembout de la micropipette (5.3) en pipettant puis en rejetant 20 1 de n-heptane. NOTE 10 Le film de n-heptane restant sur la paroi de lembout facilite un transfert reproductible de lchantillon. 8.2 Prtraitement des chantillons pour essai et des solu
35、tions prpares 8.2.1 Placer tous les chantillons pour essai, Ihuile (4.2) et les solutions talons de travail (4.4) dans le four (5.4), rgl 60 “C pendant 15 min au moins avant la dtermination. 8.2.2 Si la teneur en mtal dun corps gras brut est prsume se situer en dehors de la gamme indique en 4.4, le
36、diluer avec Ihuile de dilution (4.2). 8.2.3 Agiter vigoureusement tous les chantillons pour essai et les solutions avant analyse. Tableau 1 - Programmes pour atomiseur four en graphite Temprature Dure de monte en Dure de palier Dbit de gaz Dosage tape temprature de temprature interne “C 1s) (9 ml/mi
37、n Pour CU 1 900 50 30 300 2 2 700 1 5 50 Pour Fe, Ni 1 1 200 50 30 300 2 2 700 1 5 50 3 ISO 8294: 1994(F) 8.3 Dtermination . 0 ISO 8.3.5 Trac de la courbe dtalonnage 8.3.1 Essai blanc du tube en graphite Enregistrer Iabsorbance, si elle existe, du tube en graphite et rgler lappareil de faon que ce r
38、elev corresponde une absorbante de zro. 8.3.2 Essai blanc de Ihuile de dilution Injecter 20 PI de Ihuile raffine (4.2) dans le four en graphite, enclencher le programme de temprature et enregistrer Iabsorbance. 8.3.3 talonnage de lappareillage Injecter 20 1 de lune des trois solutions talons de trav
39、ail du mtal soumis lessai (4.4) dans le four en graphite et enregistrer Iabsorbance. Rpter ces oprations pour les deux autres solutions talons de travail. 8.3.4 Analyse des chantillons pour essai 8.3.4.1 chantillons liquides 40 “C Injecter 20 1 de lchantillon pour essai prtrait (8.2) dans le four en
40、 graphite, dmarrer le programme de temprature et enregistrer Iabsorbance. 8.3.4.2 chantillons solides 40 “C Outre les tapes 1 et 2, introduire une tape de pro- grammation supplmentaire sur lunit de commande: temps de maintien, 20 s, temprature, 60 “C, dbit de gaz interne, 0 ml/min. Dmarrer le progra
41、mme. Lors de la premire tape du programme, injecter 20 1 de lchantillon pour essai prtrait (8.1) dans le four en graphite, laisser lembout dans louverture dinjection afin de liqufier le corps gras, puis injecter. Enregistrer Iabsorbance. NOTE 11 La limite de dtection peut tre abaisse, soit par une c
42、helle largie, soit par des injections rptes dchantillon a la fin de la rduction en cendres, puis laisser le programme se poursuivre jusqu son terme. Si la teneur en mtal est trop leve (cest-a-dire dpasse la courbe dtalonnage), diluer lchantillon pour essai (voir article 7) avec Ihuile de dilution (4
43、.2) (voir galement 8.2.2). Tracer une courbe dtalonnage pour chacun des m- taux, en portant Iabsorbance de chaque solution ta- lon de travail (8.3.3) corrige de lessai blanc (8.3.2) en fonction de leurs teneurs respectives en mtal (en milligrammes par kilogramme). NOTE 12 Des appareillages perfectio
44、nns a talonnage automatique peuvent tre utiliss. 9 Expression des rsultats 9.1 Pour chaque chantillon, mesurer la hauteur de pic sur le diagramme ou lire ce qui apparat sur lcran daffichage ou limprimante. 9.2 laide de la courbe dtalonnage approprie, dterminer la teneur en mtal de chaque chantillon,
45、 en tenant compte de toute dilution de lchantillon. Exprimer les rsultats en milligrammes par kilo- gramme. 10 Fidlit La fidlit de la mthode a t dtermine par un essai interlaboratoire international organis en 1984 par lUnion internationale de chimie pure et applique (UICPA), et ralis conformment IIS
46、O 5725. 32 laboratoires ont particip cet essai qui a port sur des chantillons dhuile de grains de soja, dhuile darachides, et de beurre de cacao. Le cuivre et le fer ont t doss dans des chantillons aussi bien liqui- des que solides. Le nickel na pas t dos dans le beurre de cacao, car il tait fort im
47、probable que celui-ci en contienne. Les valeurs retenues pour les limites de rptabilit et de reproductibilit ont t fixes au niveau de pro- babilit de 95 %. 10.1 Rptabilit La diffrence absolue entre deux rsultats dessai in- dividuels, obtenus laide de la mme mthode sur un matriau identique soumis lessai dans le mme laboratoire, par le mme oprateur utilisant le mme appareillage et dans un court intervalle de temps, ne doit pas tre suprieure la valeur de r figurant dans le tableau 2. Rejeter les deux rsulta
