1、NORME INTERNATIONALE Iso 7543-2 Premire dition 1993-07-l 5 Piments et leurs olorsines - Dtermination de la teneur en capsacinodes totaux - Partie 2: Mthode par chromatographie en phase liquide haute performance Chillies and chilli oleoresins - Determina tion of total capsaicinoid content - Part 2: M
2、ethod using high-performance liquid chroma tography Numro de rfrence ISO 7543-2:1993(F) ISO 7543-2:1993(F) Avant-propos LISO (Organisation internationale de normalisation) est une fedration mondiale dorganismes nationaux de normalisation (comits membres de IISO). Llaboration des Normes international
3、es est en gnral confie aux comits techniques de IISO. Chaque comite membre intress par une tude a le droit de faire partie du comite technique cree a cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernemen- tales, en liaison avec IISO participent galement aux travaux. LISO
4、colla- bore Atroitement avec la Commission lectrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation lectrotechnique. Les projets de Normes internationales adoptes par les comits techniques sont soumis aux comites membres pour vote. Leur publication comme Normes internationales requie
5、rt lapprobation de 75 % au moins des co- mites membres votants. La Norme internationale ISO 7543-2 a t elaboree par le comit techni- que lSO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, sous-comite SC 7, Epices. LISO 7543 comprend les parties suivantes, prsentes sous le titre g- neral Piments et leurs ol
6、Gor A est laire du pic du nonyl acide vanilylamide; Pr est la puret du nonyl acide vanilylamide (4.1); m est la masse corrige du nonyl acide vanilylamide, en milligrammes. 7 chantillonnage II est important que le laboratoire reoive un echan- tillon rellement reprsentatif, non endommage ou modifie lo
7、rs du transport et de lentreposage. Lchantillonnage ne fait pas partie de la mthode spcifie dans la prsente partie de IISO 7543. Une methode dchantillonnage recommandee est donne dans 1 ISO 948*). 8 Prparation de lchantillon pour essai 8.1 Piments en poudre 8.1.1 Vrifier par tamisage que la poudre p
8、asse en totalit au travers dun tamis de 500 prn (5.9). Si ce nest pas le cas, broyer nouveau, selon les pres- criptions de IISO 2825, pour obtenir cette granulo- mtrie. 8.1.2 Peser 0,l g prs, entre 10 g et 15 g de Iechantillon pour essai prpar comme en 8.1 .l. Ex- traire pendant 8 h dans lappareil l
9、extraction conti- nue (5.8) laide de 100 ml de ttrahydrofuranne (4.2.1). Concentrer partiellement le solvant. Transvaser quantitativement lextrait dans une fiole jauge de 100 ml (5.2). Ajuster au trait de jauge avec le mlange de ttrahydrofuranne/mthanol (4.2.4). 8.2 Piments entiers 8.2.1 Broyer lech
10、antillon pour essai selon les pres- criptions de IISO 2825, jusqu ce que la poudre passe en totalit au travers dun tamis de 500 prn douverture de maille (5.9). 8.2.2 En utilisant lechantillon pour essai prpar comme en 8.2.1, procder comme dcrit en 8.1.2. 8.3 Olorsines de piment Bien homogniser Ioleo
11、rsine. 9 Mode opratoire 9.1 Prise dessai 9.1.1 Piments entiers ou en poudre Prlever, laide dune pipette (5.1), 5 ml de la solu- tion dextraction obtenue selon 8.1.2 ou 8.2.2 et les placer dans une fiole jauge (5.2) de 25 ml. Complter au trait de jauge avec le mlange au ttrahydrofuranne/mthanol (4.2.
12、4). NOTE 2 Cette dilution peut tre ventuellement modifie par lanalyste en fonction de la teneur prsume en capsaicinoides totaux de lchantillon et de la sensibilit du dtecteur. 9.1.2 Olborbsines de piments Peser 0,l mg prs, dans une fiole jauge de 100 ml, 1 g doleorsine (voir 8.3), et ajuster au trai
13、t de jauge avec le mlange au ttrahydrofuranne/mthanol (4.2.4). Prelever 5 ml de ce mlange dans une fiole jauge de 25 ml, et complter au trait avec la phase eluante (4.3). NOTE 3 Cette dilution peut tre ventuellement modifie par lanalyste en fonction de la teneur prsume en capsaicinoides totaux de lc
14、hantillon et de la sensibilit du dtecteur. 9.2 Dtermination La dilution finale doit tre claire. Si ce nest pas le cas, la filtrer sur la membrane (5.3). Injecter la solution dessai dans le chromatographe (5.4.1). Sur le chromatogramme obtenu, mesurer les aires des pics de la capsacine (C 1 1 de la n
15、ordihydrocapsacine (C2) et de la dihydrocapsaicine (C,) (voir les chromatogrammes-types donnes dans lannexe A). Effectuer deux essais et rpter la determination si les rsultats scartent de plus de 5 %. 2) ISO 948: 1980, pices - chantillonnage. ISO 7543=2:1993(F) 10 Calcul Calculer la teneur en capsac
16、inodes totaux, 9, en pourcentage en masse, laide de la formule sui- vante: ttt = (ACl +Ac2 +Ac3jK x 500 x 100 mx valeurs moyennes de plusieurs essais (au moins trois) effectues sur le mme Achantillon. Les diffrentes valeurs prises en consideration pour calculer ces moyennes ne doivent pas scarter de
17、 plus de 5 %. 12 Rapport dessai Le rapport dessai doit contenir les indications sui- vantes: ACl est laire du pic de la capsaicine; AC2 est laire du pic de la nordihydrocapsacine; AC3 est laire du pic de la dihydrocapsacine; Iylx est la masse, en milligrammes, de la prise dessai; K est le coefficien
18、t de rponse determin pou,r la substance de rference. NOTE 4 Dans cette formule, le coefficient de dilution 500 peut tre ajust par lanalyste en fonction de la teneur en capsacinoides de lchantillon doser. 11 Rptabilit Prendre comme rsultats pour le coefficient de r- ponse K et pour la teneur en compo
19、se a doser, les a) b) d dl refrence la prsente partie de IISO 7543; systme dappareillage; caractristiques de la colonne (matriau, dimen- sions, remplissage, phase stationnaire); caractristiques du detecteur (facultatif) et condi- tions dutilisation; caractristiques de la phase mobile (dbit et na- tu
20、re); identification de Iechantillon (quantit injecte et ventuelle dilution); rsultats obtenus. ISO 7543=2:4993(F) Annexe A (informative) Chromatogrammes-types La figure A. 1 illustre deux exemples de chromatogrammes-types obtenus selon les conditions opratoires donnes dans la prsente partie de IISO
21、7543. Solvant Solvant c 1 15 30 Temps, min OMor6sine 1 Olbor6sine 2 Identlficatlon des pics CI Capsacine Cz Nordihydrocapsacine Ca Dihydrocapsacine Figure A.1 5 ISO 7543=2:1993(F) CDU 633.843543.544 Descripteurs: produit agricole, produit alimentaire, assaisonnement, epice, piment, analyse chimique, dosage, chromatographie liquide haute performance. Prix bas sur 5 pages