1、Norme internationale INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATIONWIEYHAPOAHAR OPrAHM3AlWlfl l-l0 CTAHAPTW3ALWWl.ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION Paprika (Capsicum annuum Linnaeus) en poudre - Examen L au microscope Round (powdered) paprika (Capsicum annuum Linnaeus) - Microscopical exa
2、mination Premire dition - 1984-11-15 CDU 633.841 : 620.186 Descripteurs : produit agricole, pice, poivre, analyse microscopique. Rf. no : ISO 75424984 (FI Prix bas sur 6 pages Avant-propos LISO (Organisation internationale de normalisation) est une fdration mondiale dorganismes nationaux de normalis
3、ation (comits membres de IISO). Llaboration des Normes internationales est confie aux comits techniques de IISO. Chaque comit membre intress par une tude a le droit de faire partie du comit technique correspondant. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouverne- mentales, en lia
4、ison avec IISO, participent galement aux travaux. Les projets de Normes internationales adopts par les comits techniques sont soumis aux comits membres pour approbation, avant leur acceptation comme Normes inter- nationales par le Conseil de IISO. La Norme internationale ISO 7542 a t labore par le c
5、omit technique ISO/TC 34, Produits agricoles alimen taies. Organisation internationale de normalisation, 1984 Imprim en Suisse NORME INTERNATIONALE ISO 75424984 (F) Paprika (Capsicum annuum Linnaeus) en poudre - Examen au microscope 1 Objet et domaine dapplication La prsente Norme internationale dcr
6、it la structure morpholo- gique et anatomique du paprika et spcifie une mthode dexa- men au microscope du paprika en poudre. 2 Rfrence ISO 7540, Paprika Kapsicum annuum Linnaeusl en poudre - Spcifications. 3 Dfinitions 3.1 paprika : Fruit entier du paprika, comprenant le pri- carpe, les graines, le
7、pdoncule, le calice et le placenta. 3.2 paprika en poudre : Produit obtenu par broyage de diverses varits de paprikas mrs et schs. 4 Structure du paprika 4.1 Description et structure morphologique Le paprika est une baie gonfle. Plusieurs varits de paprika, de formes diffrentes, sont cultives. Le pa
8、prika en poudre est obtenu partir des varits ayant une forme conique et cylindri- que longue ou courte. Le pricarpe est relativement mince, lgrement juteux, coriace lextrieur, et prsente une surface lisse rouge ou rouge som- bre lorsque le fruit est mr. Le fruit est divis en deux, trois ou quelquefo
9、is quatre loges par un septum, celles-ci tant bien dveloppes la partie inf- rieure du fruit et aplaties vers Iapex, de sorte que la partie sup- rieure du fruit est uniloculaire. Le placenta central de forme semi-sphrique est situ dans la partie infrieure du fruit, qui rassemble la majorit des graine
10、s. Les graines apparaissent un degr moindre sur le septum. Les graines ovoides ou rniformes, aplaties et paissies sur le bord, ont entre 2,8 et 4,5 mm de longueur. Le hile bords ouverts se situe sur la partie ventrale de la graine. Les graines sont de cou- leur blanc jauntre brun jauntre, et ont une
11、 fine surface bril- lante, piquete vers les bords. Le calice est attach la partie infrieure du fruit; sa forme est caractristique de la varit. En gnral, il est form de cinq spales pointus souds. Le calice se prolonge du pdoncule, dont la forme et la longueur sont propres la varit. Le fruit peut se p
12、rsenter rig, pendant ou latral. Lensemble placenta, calice et pdoncule est appel queue. 4.2 Structure anatomique (voir figure 1) La structure anatomique du paprika peut tre plus ou moins identifie dans le produit moulu. Les cellules de lpiderme externe (exocarpe) du pricarpe sont des cellules aplati
13、es poly- gonales vues de dessus, parois paisses au niveau des angles et lgrement ponctues. Leur surface externe est couverte dune cuticule paisse, sillonne de fentes transversales aigues qui peuvent tre observes, en particulier, en coupes transver- sales. Dans le msocarpe on peut observer deux zones
14、 distinctes : vers lextrieur Ihypoderme en contact avec lpiderme, et vers lintrieur, le pricarpe charnu. Lhypoderme comprend une ou plusieurs couches de cellules. Semblables celles de lpiderme, ces cellules prsentent des paississements aux angles et sont Igrement creuses, leurs parois sont subrises
15、et de couleur jaune. lintrieur de Ihypoderme se trouve une couche de cellules parenchymateu- ses plus larges dont les parois samincissent progressivement mais qui ne sont pas subrises et qui, dans les varits de paprika qui deviennent rouges maturit, renferment des chro- moplastes de teinte rouge. Lo
16、rsque le fruit nest pas trs mr, des grains damidon sphriques peuvent tre observs. Disperss dans le pricarpe charnu, on peut observer des fais- ceaux fibro-vasculaires composs de vaisseaux annels spirals et ponctus. Sur la partie interne du msocarpe on peut observer des cellu- les dites gantes de 1 2
17、 mm de diamtre, spares par des couches de cellules fines et non identifiables dans le produit en poudre. Lendocarpe form dune seule couche de cellules est reli immdiatement aux cellules gantes. II est compos de deux types de cellules : 1 ISO 75424984 (F) a) des cellules sclreuses en chapelet, jaunes
18、, aux parois paisses, qui sont plus ou moins allonges et parall- les laxe du fruit, et qui paraissent ondules lorsquelles sont vues de dessus; elles sont lgrement lignifies et groupes sous les cellules gantes; Le pdoncule du paprika est couvert dun piderme contenant une substance colorante verte qui
19、, maturit, vire au brun. Sous lpiderme on observe le tissu vasculaire dans les cellules parenchymateuses parois minces. Les lments du xylme (du tissu vasculaire) sont lignifis avec des trous en bordure mettant en vidence un paississement rticulaire. Les fibres allonges du xylme parois paisses prsent
20、ant des fentes et les fibres du phlome servent de tissu de soutien. b) des cellules parois minces, non lignifies, allonges, sparant les cellules groupes dcrites en a), formant un rseau cohrent pouvant se dchirer facilement et dont seuls des fragments peuvent tre retrouvs dans le produit en poudre. L
21、es cellules parenchymateuses gues, dans le phlome. se situent ct des fibres lon- Les cellules du septum sont identiques celles des autres par- ties du pricarpe charnu. Elles ne contiennent pas de chromo- plastes, les faisceaux vasculaires sont plus pais et comportent un nombre plus important dlments
22、 spirals, des cavits plus spacieuses. La capsicine, qui est le principe piquant du paprika, se dveloppe dans les cellules glandulaires situes en amas dans le tissu pidermique du septum. Les cellules glandulaires contenant la capsicine ne sont pas identifiables dans le produit en poudre. Ni les grain
23、es ni le pricarpe ne contiennent de cap- sicine. 5 Examen au microscope 5.1 Principe Clarification dune pince de poudre de paprika sur une lame pour microscope et examen des particules au grossissement appropri. 5.2 Ractifs Tous les ractifs doivent tre de qualit analytique reconnue et leau utilise d
24、oit tre de leau distille ou de leau de puret au moins quivalente. Le placenta central est form en grande partie de cellules parenchymateuses parois minces, non colores, semblables celles du pricarpe charnu et du septum. Les faisceaux vascu- laires sont bien dvelopps. Par endroits, on peut observer d
25、es cellules trs caractristiques pierreuses aux parois lgrement lignifies parmi les cellules parenchymateuses parois minces. 5.2.1 Glycrine, solution. Diluer une partie volume deau. en volume de glycrine avec une partie en La surface des graines est couverte dun tgument jauntre et dur, dont lassise e
26、xterne, lpiderme, est form de grandes cel- lules de couleur jaune-verdtre. Les parois radiales des cellules, vues de dessus, sont fortement ondules (cellules msentri- ques) et tout comme les parois internes, sont considrablement paissies et lignifies avec des ponctuations en forme de fen- tes. 5.2.2
27、 Chlorhydrate de sodium, solution. Mlanger cinq parties en volume de solution de chlorhydra sodium avec deux parties en volume deau chaude. 5.2.3 Solution dio (solut ,ion de Lugol). et diodure de potassium Lpaisseur et la hauteur des parois cellulaires augmentent vers le bord des graines et diminuen
28、t au niveau de la surface plate de celles-ci. La paroi cellulaire externe, plus ou moins convexe nest pas lignifie, et ce nest que dans la partie la plus interne que lon peut trouver une trs fine couche de cellules parois lignifies. Sous lpiderme (exocarpe) se trouvent des cellules parenchymateuses,
29、 ct desquelles se trouve lendocarpe, plus pais, form de cellules parois lignifies. Le tissu proti- nique de la graine est compos de cellules polygonales isodia- mtriques parois comparativement paisses remplies dhuile et daleurone. Dissoudre 2 g diodure de potassium deau, et complter 100 ml. et 1 g d
30、iode dans un peu 5.2.4 Solution de chlorhydrate de sodium et diode. Ajouter de liode la solution de chlorhydrate de sodium (5.2.2) jusqu lobtention dune couleur brune. 5.3 Appareillage Lpiderme externe (du ct le plus ferm du fruit) du calice cinq spales pointus est compos de cellules parois Igre- me
31、nt ondules. Lpiderme externe est garni de poils glandulai- res courts forms dune glande ovode pluriloculaire rouge- fonc supporte par un pdoncule court. 5.3.1 x 50 re. Microscope binoculaire, avec un grossissement de X 1300, muni dun micromtre oculaire lampe incorpo- 5.3.2 Lames pour microscope. Les
32、 cellules de lpiderme interne sont plus larges, octogonales et sont entremles de stomates mais ne prsentent pas de poils glandulaires. Entre les deux pidermes se trouve un parenchyme spongieux comprenant des faisceaux vasculaires spirals, des chromatoplastes verts et des cristaux doxalate de calcium
33、. 5.3.3 Lamelles. 5.3.4 Verre de montre. 5.3.5 Aiguille monte. 2 5.3.6 Scalpel. ISO 7542-1984 (FI 5.5 Mode opratoire 5.4 Prparation de lchantillon Prparer plusieurs chantillons en vue de lexamen au micros- cope. Placer une pince de paprika en poudre sur une lame (5.3.2), mlanger soigneusement avec l
34、es solutions de clarifica- tion et couvrir avec une lamelle (5.3.3). La solution de glycrine (5.2.1) rend la prparation plus claire et plus translucide; elle dissout lgrement les matires coloran- tes, et les parties incolores deviennent translucides. Le chlorhydrate de sodium a un effet de blanchime
35、nt de sorte que les particules colores deviennent ples, et il dissout une grande partie du contenu de la cellule, donnant une prparation plus translucide. Leffet de rduction peut tre acclr en chauffant la lame avec prcaution, jusqu ce que la solution de chlorhydrate de sodium commence bouillir, mais
36、 en remplacant leau perdue lvaporation. La solution diode et diodure de potassium est utilise plus par- ticulirement pour la dtection damidon tranger. Le pricarpe du paprika mr ne contient pas damidon. La solution de chlorhydrate de sodium et diode est utilise pour la dtection des grains fins damido
37、n provenant des pri- carpes non mrs. Le ractif rend le produit clair, fait gonfler les grains damidon et les colore en bleu. Lexamen est gnralement effectu un grossissement de X 200 X 600. Dans certains cas, lorigine dun tissu particulier peut seulement tre dtermine en recherchant les petits dtails
38、structuraux ou en comparant les dimensions relatives. (Voir figure 1 pour la coupe transversale du pricarpe du paprika.) Si des lments trangers sont rfrence doit tre examine. dcels, une prparation de Les principales caractristiqu es microscopiques lidentification du paprika sont les suivantes : perm
39、ettant a) Iexocarpe (piderme) du pricarpe (voir figure 2); b) les cellules sclreuses en chapelet) de lendocarpe du paprika (voir figure 3); c) lpiderme de la g ques) (voir figure 4); d) e) f) raine de paprika (cellules msentri- lpiderme du calice (voir figure 5); les cellules pierreuses du placenta
40、(voir figure 6); les lments du pdoncule (voir figure 7); g) le rouge. grand nombre de gouttelettes dhuile fixe de teinte ISO 7542-1984 (F) Msocarpe oiderme lexocarnd Y Hypoderme Faisceaux vasculaires 0 / CA- 8-Cellule gante Couche cellulair *e de lendocarpe -Cellules parois minces Figure 1 - Coupe t
41、ransversale du phicarpe du paprika 4 ISO 75424984 0 Figure 2 - Exocarpe du pricarpe du paprika Figure 3 - Cellules sclreuses en chapelet de lendocarpe du pricarpe du paprika, vues de dessus Figure 4 - Pricarpe de la graine de paprika (cellules msentriques), vues de dessus SO 75424984 (FI Fibre ,Poils glandulaires Figure 5 - piderme du calice l- Phloeme Faisceau vasculaire Figure 7 - lbments du pbdoncule Figure 6 - Cellules pierreuses du placenta
