1、 Numro de rfrence ISO 23611-4:2007(F) ISO 2007NORME INTERNATIONALE ISO 23611-4 Premire dition 2007-11-15 Qualit du sol Prlvement des invertbrs du sol Partie 4: Prlvement, extraction et identification des nmatodes du sol Soil quality Sampling of soil invertebrates Part 4: Sampling, extraction and ide
2、ntification of soil-inhabiting nematodes ISO 23611-4:2007(F) PDF Exonration de responsabilit Le prsent fichier PDF peut contenir des polices de caractres intgres. Conformment aux conditions de licence dAdobe, ce fichier peut tre imprim ou visualis, mais ne doit pas tre modifi moins que lordinateur e
3、mploy cet effet ne bnficie dune licence autorisant lutilisation de ces polices et que celles-ci y soient installes. Lors du tlchargement de ce fichier, les parties concernes acceptent de fait la responsabilit de ne pas enfreindre les conditions de licence dAdobe. Le Secrtariat central de lISO dcline
4、 toute responsabilit en la matire. Adobe est une marque dpose dAdobe Systems Incorporated. Les dtails relatifs aux produits logiciels utiliss pour la cration du prsent fichier PDF sont disponibles dans la rubrique General Info du fichier; les paramtres de cration PDF ont t optimiss pour limpression.
5、 Toutes les mesures ont t prises pour garantir lexploitation de ce fichier par les comits membres de lISO. Dans le cas peu probable o surviendrait un problme dutilisation, veuillez en informer le Secrtariat central ladresse donne ci-dessous. DOCUMENT PROTG PAR COPYRIGHT ISO 2007 Droits de reproducti
6、on rservs. Sauf prescription diffrente, aucune partie de cette publication ne peut tre reproduite ni utilise sous quelque forme que ce soit et par aucun procd, lectronique ou mcanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans laccord crit de lISO ladresse ci-aprs ou du comit membre de lISO da
7、ns le pays du demandeur. ISO copyright office Case postale 56 CH-1211 Geneva 20 Tel. + 41 22 749 01 11 Fax. + 41 22 749 09 47 E-mail copyrightiso.org Web www.iso.org Publi en Suisse ii ISO 2007 Tous droits rservsISO 23611-4:2007(F) ISO 2007 Tous droits rservs iii Sommaire Page Avant-propos. iv Intro
8、duction v 1 Domaine dapplication 1 2 Termes et dfinitions 1 3 Principe 2 4 Ractifs 3 5 Appareillage 4 5.1 chantillonnage 4 5.2 Extraction 4 5.3 Comptage 4 5.4 Fixation et prparation de lames densemble 5 5.5 Identification 5 6 Mode opratoire 5 6.1 Gnralits 5 6.2 chantillonnage 5 6.3 Extraction 7 6.4
9、Comptage 8 6.5 Fixation et prparation de lames densemble 8 6.6 Identification 9 7 Analyse des donnes . 9 8 Rapport dtude. 10 Annexe A (informative) Figures du matriau et des mthodes pour la recherche nmatologique. 11 Annexe B (informative) Informations relatives la disponibilit de llutriateur Oosten
10、brink 14 Annexe C (informative) Informations relatives la mthode dextraction avec lentonnoir/plateau de Baermann . 16 Bibliographie 18 ISO 23611-4:2007(F) iv ISO 2007 Tous droits rservsAvant-propos LISO (Organisation internationale de normalisation) est une fdration mondiale dorganismes nationaux de
11、 normalisation (comits membres de lISO). Llaboration des Normes internationales est en gnral confie aux comits techniques de lISO. Chaque comit membre intress par une tude a le droit de faire partie du comit technique cr cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernem
12、entales, en liaison avec lISO participent galement aux travaux. LISO collabore troitement avec la Commission lectrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation lectrotechnique. Les Normes internationales sont rdiges conformment aux rgles donnes dans les Directives ISO/CEI, Part
13、ie 2. La tche principale des comits techniques est dlaborer les Normes internationales. Les projets de Normes internationales adopts par les comits techniques sont soumis aux comits membres pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert lapprobation de 75 % au moins des comits mem
14、bres votants. Lattention est appele sur le fait que certains des lments du prsent document peuvent faire lobjet de droits de proprit intellectuelle ou de droits analogues. LISO ne saurait tre tenue pour responsable de ne pas avoir identifi de tels droits de proprit et averti de leur existence. LISO
15、23611-4 a t labore par le comit technique ISO/TC 190, Qualit du sol, sous-comit SC 4, Mthodes biologiques. LISO 23611 comprend les parties suivantes, prsentes sous le titre gnral Qualit du sol Prlvement des invertbrs du sol: Partie 1: Tri manuel et extraction au formol des vers de terre Partie 2: Pr
16、lvement et extraction des micro-arthropodes (Collembola et Acarina) Partie 3: Prlvement et extraction des enchytrides Partie 4: Prlvement, extraction et identification des nmatodes du sol ISO 23611-4:2007(F) ISO 2007 Tous droits rservs v Introduction La prsente partie de lISO 23611 a t tablie en rai
17、son du besoin croissant de normalisation des mthodes de prlvement et danalyse des organismes du sol. Ces mthodes couvrent principalement lchantillonnage, lextraction et la manipulation dinvertbrs dans le sol et sont ncessaires pour les applications suivantes: la classification biologique des sols co
18、mprenant lvaluation de qualit des sols 15, 17, 28 ; la bio-indication et la surveillance terrestre long terme 9, 10, 13, 24 ; lvaluation des effets des substances chimiques sur les animaux du sol (ISO 11268-3). Les donnes utilisables pour la ralisation de ces objectifs sont obtenues par des mthodes
19、normalises tant donn quelles peuvent tre la base de dcisions grande porte (par exemple la dcision de dcontamination dun site). En fait, labsence de telles mthodes normalises est lune des principales raisons pour lesquelles la classification biologique et lvaluation biologique dans les habitats terre
20、stres (cest-dire les sols) ont rarement t utilises ce jour compars aux sites aquatiques. Les nmatodes constituent une partie importante de la faune du sol. Certains auteurs estiment que ce groupe est probablement le plus important parmi les organismes pluricellulaires (mtazoaires) sur terre. Les nma
21、todes sont prsents de lAntarctique aux tropiques et des sdiments en eau profonde aux rgions montagneuses. Ils sont actifs en tout lieu prsentant suffisamment deau et de matires organiques. Leur diversit spcifique et fonctionnelle est impressionnante. Les nmatodes sont gnralement connus en tant que p
22、arasites des animaux et des plantes, mais la majeure partie de la nmatofaune participe aux processus de dcomposition du fait du rgime trophique de certains dentre eux: bactrivores ou fongivores. Les nmatodes sont prsents en grand nombre (5 000 100 000)/kg de sol frais et avec une diversit spcifique
23、leve (20 100) dans pratiquement chaque chantillon de sol. De plus, ils prsentent un spectre cologique large de rgimes trophiques et de places dans la chane alimentaire; il existe des nmatodes bactrivores, fongivores, phytophages, prdateurs et omnivores 27, 28 . Ces facteurs rendent ce groupe particu
24、lirement adapt en tant quindicateur de la qualit cologique du sol, mais la normalisation des mthodes est urgemment ncessaire pour la comparaison et lanalyse conjointe des rsultats. Au cours des 100 dernires annes, la nmatologie sest fortement dveloppe dans les domaines de lagriculture, lchantillonna
25、ge en vue de produire des recommandations et les rglementations phytosanitaires parce que certains nmatodes phytoparasites causent des dgts importants sur les cultures. En ce qui concerne les mthodes, il existe plusieurs coles dans diffrentes parties du monde avec leurs propres histoires, avantages
26、pratiques et inconvnients. Une vue densemble est prsente par Oostenbrink 14et Southey 22, 23 . Les mthodes (ou variantes) dcrites plus rcemment ont souvent t dveloppes avec un intrt particulier pour certaines espces de nmatodes phytoparasites. Depuis que Bongers 4a introduit lindice de maturit, luti
27、lisation des nmatodes dans la bio-indication pour la qualit des sols sest rapidement dveloppe. Les nmatodes sont dsormais utiliss pour ltude et la surveillance cologique des sols dans plusieurs pays dans le monde entier. Les activits de surveillance prsentent certaines exigences mthodologiques. Par
28、exemple, un grand nombre dchantillons de sol sont traits en routine pour un cot raisonnable. Certaines des mthodes initialement dveloppes pour pouvoir formuler des recommandations en agriculture sont particulirement adaptes pour la recherche cologique. Elles constituent la base de variantes spcifiqu
29、es dcrites dans ce document. NORME INTERNATIONALE ISO 23611-4:2007(F) ISO 2007 Tous droits rservs 1 Qualit du sol Prlvement des invertbrs du sol Partie 4: Prlvement, extraction et identification des nmatodes du sol 1 Domaine dapplication La prsente partie de lISO 23611 spcifie une mthode pour chanti
30、llonner et manipuler les nmatodes du sol en tant que condition pralable pour les utiliser comme bio-indicateurs (par exemple pour valuer la qualit dun sol en tant quhabitat pour des organismes). La prsente partie de lISO 23611 sapplique tous les biotopes terrestres dans lesquels des nmatodes sont pr
31、sents. La procdure dchantillonnage pour les tudes de terrain est spcifie de faon gnrale dans lISO 10381-1. La prsente partie de lISO 23611 nest pas applicable pour les nmatodes aquatiques parce que ceux-ci ne traversent pas le filtre. Des mthodes pour certains autres groupes dorganismes tels que les
32、 vers de terre, les enchytraeidae ou les collemboles sont couverts dans dautres parties de lISO 23611. Les nmatodes qui sont caractriss avec le mode opratoire propos sont toutes les formes libres de nmatodes trouves dans le sol. Ils comprennent les nmatodes non phytophages ainsi que les nmatodes phy
33、tophages ectoparasitaires et les stades libres des nmatodes phytophages endoparasitaires. La quantification des nmatodes strictement phytophages dans les racines requirent des mthodes spcifiques. NOTE Des informations de base sur lcologie des nmatodes et leur utilisation en tant que bio-indicateurs
34、peuvent tre trouves dans la bibliographie. La prsente partie de lISO 23611 ne couvre pas la caractrisation pdologique du site qui est particulirement recommande lors du prlvement dinvertbrs du sol. lISO 10390, lISO 10694, lISO 11272, lISO 11274, lISO 11277, lISO 11461 et lISO 11465 sont plus appropr
35、is pour mesurer le pH, la granulomtrie, le rapport C/N, la teneur en carbone organique et la capacit de rtention en eau. 2 Termes et dfinitions Pour les besoins du prsent document, les termes et dfinitions suivants sappliquent. 2.1 nmatode petit ver libre non segment (jusqu quelques millimtres de lo
36、ngueur) appartenant la classe des nmatodes NOTE Les nmatodes dont aucun stade nhabite dans le sol ne sont pas inclus dans ce cadre. 2.2 situation zone ou point dtude que lon veut caractriser sur la base de la composition de la nmatofaune (entre autres) ISO 23611-4:2007(F) 2 ISO 2007 Tous droits rser
37、vs2.3 chantillon composite chantillon de sol constitu de nombreuses petites carottes de sol pour avoir un chantillon reprsentatif de la nmatofaune 2.4 outil de prlvement de sol gouge tarire outil utilis pour collecter le sol dune manire rapide et normalise 2.5 lutriateur Oostenbrink 1)entonnoir en m
38、tal avec un flux deau de bas en haut permettant de sparer les nmatodes des plus grosses particules de sol Voir la Figure A.3. 2.6 lame densemble lame microscopique sur laquelle 300 400 nmatodes sont monts pour lidentification des espces 2.7 identification dtermination de lespce, du genre ou de la fa
39、mille dun individu sur la base de caractristiques morphologiques (cavit buccale, organes sexuels, mensurations) avec une cl didentification 2.8 chelle colonisateur persistant (cp) classification cologique des nmatodes, propose par Bongers 4, 5NOTE Le principe est analogue aux stratgies dmographiques
40、 r-K, largement acceptes en cologie fondamentale. Les familles de nmatodes non phytophages sont classes dans lun des cinq groupes cp. Cest galement la base du calcul de lindice de maturit. 3 Principe Les chantillons de sol contenant les nmatodes sont collects avec une petite carotte cylindrique (dia
41、mtre: environ 2 cm, longueur: 10 cm) ou une tarire (voir la Figure A.2). Pour les applications de surveillance les chantillons de sol sont mlangs dans un chantillon composite, reprsentatif dune zone homogne. Le nombre total dchantillons doit tre dtermin en fonction de la surface tudie et de son homo
42、gnit (par exemple: pdologie, cultures). Les chantillons individuels peuvent tre collects sur le terrain dans des sacs en plastique ou des seaux en plastique. Lchantillon composite est trop volumineux pour un examen direct et, en consquence, celui-ci est mlang et sous-chantillonn. Sur le terrain et d
43、urant le transport au laboratoire, les chantillons de sol doivent tre protgs contre les fortes fluctuations de temprature, la perte deau et les perturbations mcaniques violentes. Ils peuvent tre conservs pendant quatre semaines au maximum 4 C. NOTE 1 La mthode dchantillonnage dcrite ci-dessus est dr
44、ive de la Dutch Method 23pour dterminer linfestation par les nmatodes kystes de parcelles cultives en pomme de terre et a t utilise depuis longtemps dans plusieurs pays europens. 1) Llutriateur Oostenbrink est lappellation commerciale dun produit distribu par la socit Eijkelkamp, Giesbeek, Pays-Bas
45、(http:/www.eijkelkamp.nl). Cette information est donne lintention des utilisateurs de la prsente Norme internationale et ne signifie nullement que lISO approuve ou recommande lemploi exclusif du produit ainsi dsign. Des produits quivalents peuvent tre utiliss sil est dmontr quils conduisent aux mmes
46、 rsultats. ISO 23611-4:2007(F) ISO 2007 Tous droits rservs 3 La mthode de lentonnoir Oostenbrink est recommande pour les extractions de routine dchantillons de sol, dans un rseau de surveillance, par exemple. La mthode Oostenbrink nest pas la plus simple qui peut tre utilise en toutes circonstances.
47、 Cependant, elle prsente plusieurs avantages: elle est trs normalise et prsente une efficacit dextraction constante. La mthode de lentonnoir Oostenbrink combine trois moyens de base qui peuvent tre utiliss pour la sparation des nmatodes des sols: le lavage, le tamisage et le mouvement actif. Par consquent, elle permet dobtenir de meilleurs rsultats que lune des mthodes de base individuellement. Les autres avantages sont donns ci-dessous: de
