1、 Numro de rfrence ISO 23611-2:2006(F) ISO 2006NORME INTERNATIONALE ISO 23611-2 Premire dition 2006-02-01Qualit du sol Prlvement des invertbrs du sol Partie 2: Prlvement et extraction des micro-arthropodes (Collembola et Acarina) Soil quality Sampling of soil invertebrates Part 2: Sampling and extrac
2、tion of micro-arthropods (Collembola and Acarina) ISO 23611-2:2006(F) PDF Exonration de responsabilit Le prsent fichier PDF peut contenir des polices de caractres intgres. Conformment aux conditions de licence dAdobe, ce fichier peut tre imprim ou visualis, mais ne doit pas tre modifi moins que lord
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7、eur. ISO copyright office Case postale 56 CH-1211 Geneva 20 Tel. + 41 22 749 01 11 Fax. + 41 22 749 09 47 E-mail copyrightiso.org Web www.iso.org Publi en Suisse ii ISO 2006 Tous droits rservsISO 23611-2:2006(F) ISO 2006 Tous droits rservs iii Sommaire Page Avant-propos. iv Introduction v 1 Domaine
8、dapplication 1 2 Termes et dfinitions 1 3 Principe 2 4 Matriaux dessai 2 4.1 Matriel biologique . 2 4.2 Ractifs 2 5 Appareillage 3 6 Mode opratoire 4 6.1 Collecte des chantillons de sol . 4 6.2 Extraction des collemboles et des acariens des chantillons de sol . 4 6.3 Tri, conservation et identificat
9、ion des collemboles et des acariens. 5 7 valuation des rsultats 6 8 Rapport dtude 7 Annexe A (informative) Dtermination des espces de collemboles et dacariens 8 Annexe B (informative) Mthodes alternatives pour le prlvement des micro-arthropodes . 10 Bibliographie 11 ISO 23611-2:2006(F) iv ISO 2006 T
10、ous droits rservsAvant-propos LISO (Organisation internationale de normalisation) est une fdration mondiale dorganismes nationaux de normalisation (comits membres de lISO). Llaboration des Normes internationales est en gnral confie aux comits techniques de lISO. Chaque comit membre intress par une t
11、ude a le droit de faire partie du comit technique cr cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec lISO participent galement aux travaux. LISO collabore troitement avec la Commission lectrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la
12、normalisation lectrotechnique. Les Normes internationales sont rdiges conformment aux rgles donnes dans les Directives ISO/CEI, Partie 2. La tche principale des comits techniques est dlaborer les Normes internationales. Les projets de Normes internationales adopts par les comits techniques sont soum
13、is aux comits membres pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert lapprobation de 75 % au moins des comits membres votants. Lattention est appele sur le fait que certains des lments du prsent document peuvent faire lobjet de droits de proprit intellectuelle ou de droits analogu
14、es. LISO ne saurait tre tenue pour responsable de ne pas avoir identifi de tels droits de proprit et averti de leur existence. LISO 23611-2 a t labore par le comit technique ISO/TC 190, Qualit du sol, sous-comit SC 4, Mthodes biologiques. LISO 23611 comprend les parties suivantes, prsentes sous le t
15、itre gnral Qualit du sol Prlvement des invertbrs du sol: Partie 1: Tri manuel et extraction au formol des vers de terre Partie 2: Prlvement et extraction des micro-arthropodes (Collembola et Acarina) Partie 3: Prlvement et extraction du sol des enchytraeides Partie 4: Prlvement, extraction et identi
16、fication des nmatodes du sol ISO 23611-2:2006(F) ISO 2006 Tous droits rservs v Introduction La prsente partie de lISO 23611 a t labore pour satisfaire le besoin croissant de normalisation des mthodes de prlvement et dextraction des micro-arthropodes du sol. Ces mthodes sont ncessaires pour les diffr
17、entes applications suivantes: la classification biologique des sols, y compris lvaluation de la qualit des sols (par exemple Rfrences 31, 32, 35, 41, 45 et 46); la bio-indication terrestre et la surveillance long terme (par exemple Rfrences 1, 7, 17, 40, 42). Les donnes obtenues laide de mthodes nor
18、malises permettent des valuations plus prcises et donc une comparaison plus fiable entre diffrents sites (par exemple des sites pollus face des sites non pollus, modifications des pratiques dexploitation du sol). Parmi les diffrents groupes de micro-arthropodes, les collemboles et les acariens sont
19、les groupes les plus tudis en cologie des sols. Leur pertinence par rapport au sol est due leur grande abondance et diversit, mais aussi au rle quils jouent dans les principaux processus biologiques. Les collemboles et les acariens oribates agissent essentiellement en tant que catalyseurs de la dcom
20、position de la matire organique 4, 20 , alors que les acariens prdateurs peuvent jouer un rle en bout de chane trophique du sol 9 . Ces caractristiques, ajoutes la bonne connaissance de leur taxinomie, ont favoris leur utilisation en tant quorganismes dtude au sein de plusieurs programmes de recherc
21、he traitant des impacts de lexploitation forestire (par exemple Rfrences 12, 13, 14, 15, 18, 19, 21, 22, 23, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 33, 34, 37, 38 et 39) ou des pratiques de gestion des cultures (par exemple 6, 11, 16, 24). Ces caractristiques en font des organismes utiles comme bio-indicateurs
22、 pour mesurer des changements dans la qualit du sol, en particulier en raison des pratiques dexploitation du sol et de la pollution 43 . NORME INTERNATIONALE ISO 23611-2:2006(F) ISO 2006 Tous droits rservs 1 Qualit du sol Prlvement des invertbrs du sol Partie 2: Prlvement et extraction des micro-art
23、hropodes (Collembola et Acarina) 1 Domaine dapplication La prsente partie de lISO 23611 spcifie une mthode pour le prlvement, lextraction et la conservation des collemboles et des acariens du sol prlevs sur le terrain comme prrequis lutilisation de ces animaux en tant que bio-indicateurs (par exempl
24、e pour valuer la qualit dun sol en tant quhabitat pour des organismes). Il est possible de trouver des informations de base sur lcologie des micro-arthropodes et leur utilisation dans les rfrences cites dans la bibliographie. Les mthodes de prlvement et dextraction de la prsente partie de lISO 23611
25、 sappliquent la quasi- totalit des sols. Les sols prsents sous des conditions climatiques extrmes (sols durs, gels ou inonds) et les matrices autres que le sol, linstar des troncs darbres, des plantes ou des lichens, peuvent tre considrs comme des exceptions. En ce qui concerne les gnralits de la co
26、nception de lchantillonnage pour les tudes de terrain, voir lISO 10381-1. Les mthodes pour quelques autres groupes dorganismes du sol tels que les vers de terre sont traites dans dautres parties de lISO 23611. La prsente partie de lISO 23611 ne traite pas de la caractrisation pdologique du site, qui
27、 est vivement recommande en cas de prlvement des invertbrs du sol. LISO 10390, lISO 10694, lISO 11272, lISO 11274, lISO 11277, lISO 11461 et lISO 11465 savrent plus adquates pour mesurer le pH, la distribution granulomtrique, le rapport carbone-azote, la teneur en carbone organique et la capacit de
28、rtention deau. 2 Termes et dfinitions Pour les besoins du prsent document, les termes et dfinitions suivants sappliquent. 2.1 micro-arthropodes groupe dfini par sa petite taille (de 100 m quelques millimtres) constituant une partie importante du rseau trophique sous-terrain dans un grand nombre dcos
29、ystmes terrestres NOTE Ce groupe est compos principalement des acariens (Acarina), des collemboles (Collembola), des Protura, des Diplura, des scolopendres des jardins (Symphyla), des Paurapoda, de petits scolopendres et mille-pattes et dinsectes et de leurs larves issus de plusieurs ordres (Diptres
30、, Coloptres, etc.). ISO 23611-2:2006(F) 2 ISO 2006 Tous droits rservs3 Principe Les chantillons de sol sont prlevs sur le terrain laide dun carottier stratifi. Les carottes de sol sont places dans des tubes ou des sacs en plastique puis transportes vers le laboratoire. Ensuite, les collemboles et le
31、s acariens sont rapidement extraits (en lespace de quelques jours) laide de mthodes comportementales, au moyen du dispositif de MacFadyen et conservs des fins ultrieures didentification 7, 40 . De plus, les techniques de prparation sont aussi dcrites. Pour finir, les valeurs dabondance peuvent tre r
32、ecalcules et rapportes une surface (gnralement 1 m 2 ), un volume ou une masse (gnralement 1 kg). NOTE Dautres mthodes dextraction peuvent se rvler utiles dans des cas particuliers. Il est possible dutiliser les mthodes de flottation (par exemple la mthode de flottation dans lheptane) dans le cas de
33、 sols argileux ou limoneux et, lorsque les chantillons sont prlevs sur de la litire, il est conseill dutiliser un extracteur de Kempson 40 . 4 Matriaux dessai 4.1 Matriel biologique Les Collembola (collemboles) sont de petits hexapodes sans ailes (dont la longueur est comprise entre 150 m et 9 mm),
34、possdant une tte caractristique avec une paire dantennes, dpourvus de vritables yeux composs, avec six segments abdominaux et trois appendices prgnitaux au niveau de labdomen. Le premier segment prsente un tube ventral (ou collophore) utilis pour adhrer aux surfaces lisses. Le nom de Collembola vien
35、t de sa structure (du grec colla = colle et embolon = barre). Le troisime segment prsente le rtinacle qui maintient lappareil de saut dans sa position normale. Lappendice sauteur, la furcula (ou ressort), lorsquil est prsent, se situe sur le quatrime segment. Les collemboles vivent dans la litire et
36、 dans le sol et prsentent des formes de vie trs varies. Ils appartiennent la classe Collembola et peuvent tre rpartis en 18 familles17 . Les acariens du sol sont de petits arthropodes Chlicrates apparents aux araignes (longueur comprise entre 150 m et 5 mm), vivant dans le sol et la litire et prsent
37、ant aussi des formes de vie trs varies. Ils appartiennent la classe Arachnida, sous-classe Acarida, qui comprend quatre groupes distincts: Cryptostigmates (Oribates), Msostigmates (Gamasides), Prostigmates (Trombidiformes) et Astigmates. NOTE Quelques indications sur la taxinomie des collemboles et
38、des acariens sont fournies dans lAnnexe A. 4.2 Ractifs Sauf indication contraire, utiliser uniquement des ractifs de qualit reconnue et de leau distille. 4.2.1 Propan-2-ol, 80 % (fraction volumique). 4.2.2 Formol solution de formaldhyde 40 % (fraction volumique). 4.2.3 Acide actique. 4.2.4 Phnol, C
39、6 H 5 OH, cristallin (acide carbolique). 4.2.5 Acide chlorhydrique, c(HCl) de 8 mol/l 10 mol/l. 4.2.6 2,2,2-Trichloro-1,1-thanediol (hydrate de chloral). 4.2.7 1,2,3-Trihydroxy propane (glycrine). 4.2.8 Fixateur de von Trne: utilis pour conserver les animaux extraits, compos de propan-2-ol (80 %), d
40、e formol (40 %) et dacide actique glacial (fraction volumique 10:0,3:0,03). ISO 23611-2:2006(F) ISO 2006 Tous droits rservs 3 4.2.9 Milieu dclaircissement de Nesbitt, utilis pour claircir les spcimens dacariens, compos dhydrate de chloral (80 g), deau distille (50 ml) et dacide chlorhydrique concent
41、r (5 ml). 4.2.10 Solution de lactophnol, utilise pour claircir les spcimens dacariens, compose dacide lactique (10 ml), de cristaux de phnol (3,6 g) et deau distille (5 ml). 4.2.11 Acide hydroxy-2-propanoque (acide lactique), utilis pour claircir et observer les spcimens de micro-arthropodes, en par
42、ticulier les acariens oribates sous le microscope. 4.2.12 thanol, de 70 % 75 % (fraction volumique), utilis pour la fixation et la conservation (dans ce dernier cas, il est aussi combin avec de la glycrine 10:1). 4.2.13 Milieu de Hoyer, utilis pour monter des spcimens de collemboles, compos deau dis
43、tille (50 ml), de gomme arabique (30 g), dhydrate de chloral (200 g) et de glycrine (20 ml). 5 Appareillage Matriel courant de laboratoire et ce qui suit. 5.1 Mtre ruban. 5.2 Flacons de collecte. 5.3 Pissette. 5.4 Pinces, pipette, pinceau fin, aiguilles fines. 5.5 Botes de Petri. 5.6 Microscope stro
44、scopique. 5.7 Microscope, contraste de phase ou interfrentiel de prfrence. 5.8 Lames, creuses en leur centre, et lamelles pour microscope. 5.9 Plaque chauffante lectrique. 5.10 Flacons en plastique. 5.11 lments chauffants en cramique. 5.12 Crayon, carnet de notes, marqueur indlbile, tiquettes. 5.13
45、Carottier stratifi Dispositif de prlvement fabriqu en acier inoxydable ou aluminium (il peut tre de 40 cm de long et, par exemple, de 5,6 cm de diamtre; il convient que la taille et le diamtre ne scartent pas beaucoup de ces valeurs afin de conserver des conditions comparables) utilis pour recueilli
46、r des carottes de sol (chantillons). Il peut tre compos de deux parties indpendantes qui sadaptent le long de laxe principal du carottier ou ntre constitu que dun seul tube. Il est muni dune poigne dans sa partie suprieure et dun bord tranchant dans sa partie infrieure. 5.14 Dispositif de MacFadyen
47、Dispositif dextraction (multiple) gradient lev utilis pour extraire les micro-arthropodes des chantillons de sol. Le principe consiste crer un gradient de temprature artificiel entre le bidon qui contient lchantillon (chaud) et le dispositif de collecte situ en dessous (froid), ce qui induit un comportement de thermotaxie ngative (et aussi dhygrotaxie positive, de phototaxie ngative et de scototaxie positive) chez les animaux qui, par voie de consquence, qu
