1、 Numro de rfrence ISO 23275-2:2006(F) ISO 2006NORME INTERNATIONALE ISO 23275-2 Premire dition 2006-11-01Corps gras dorigines animale et vgtale quivalents au beurre de cacao dans le beurre de cacao et dans le chocolat de mnage Partie 2: Quantification des quivalents au beurre de cacao Animal and vege
2、table fats and oils Cocoa butter equivalents in cocoa butter and plain chocolate Part 2: Quantification of cocoa butter equivalents ISO 23275-2:2006(F) PDF Exonration de responsabilit Le prsent fichier PDF peut contenir des polices de caractres intgres. Conformment aux conditions de licence dAdobe,
3、ce fichier peut tre imprim ou visualis, mais ne doit pas tre modifi moins que lordinateur employ cet effet ne bnficie dune licence autorisant lutilisation de ces polices et que celles-ci y soient installes. Lors du tlchargement de ce fichier, les parties concernes acceptent de fait la responsabilit
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8、06 Tous droits rservs iii Sommaire Page Avant-propos. iv Introduction v 1 Domaine dapplication 1 2 Termes et dfinitions 1 3 Principe 2 4 Ractifs et matriaux 2 5 Appareillage. 2 6 chantillonnage 3 7 Prparation de lchantillon pour essai 3 7.1 Prparation du MRC beurre de cacao pour talonnage et vrifica
9、tion de laptitude du systme 3 7.2 Prparation de lchantillon de chocolat 3 8 Mode opratoire 3 8.1 Extraction de la matire grasse. 3 8.2 Sparation des triacylglycrols individuels par HR-GC . 4 8.3 Identification 5 9 Calculs 5 9.1 Dtermination des facteurs de rponse . 5 9.2 Calcul des pourcentages des
10、triacylglycrols. 5 9.3 Calcul de la teneur en EBC dans le beurre de cacao 6 9.4 Calcul de la teneur en EBC dans le chocolat.6 10 Exigences du mode opratoire 6 10.1 Gnralits. 6 10.2 Aptitude du systme. 7 11 Fidlit 7 11.1 Essai interlaboratoires . 7 11.2 Rptabilit 7 11.3 Reproductibilit. 7 12 Rapport
11、dessai . 8 Annexe A (informative) Rsultats dun essai interlaboratoires . 9 Bibliographie 14 ISO 23275-2:2006(F) iv ISO 2006 Tous droits rservsAvant-propos LISO (Organisation internationale de normalisation) est une fdration mondiale dorganismes nationaux de normalisation (comits membres de lISO). Ll
12、aboration des Normes internationales est en gnral confie aux comits techniques de lISO. Chaque comit membre intress par une tude a le droit de faire partie du comit technique cr cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec lISO participent g
13、alement aux travaux. LISO collabore troitement avec la Commission lectrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation lectrotechnique. Les Normes internationales sont rdiges conformment aux rgles donnes dans les Directives ISO/CEI, Partie 2. La tche principale des comits techniq
14、ues est dlaborer les Normes internationales. Les projets de Normes internationales adopts par les comits techniques sont soumis aux comits membres pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert lapprobation de 75 % au moins des comits membres votants. Lattention est appele sur le
15、fait que certains des lments du prsent document peuvent faire lobjet de droits de proprit intellectuelle ou de droits analogues. LISO ne saurait tre tenue pour responsable de ne pas avoir identifi de tels droits de proprit et averti de leur existence. LISO 23275-2 a t labore par le comit technique I
16、SO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comit SC 11, Corps gras dorigines animale et vgtale. LISO 23275 comprend les parties suivantes, prsentes sous le titre gnral Corps gras dorigines animale et vgtale quivalents au beurre de cacao dans le beurre de cacao et dans le chocolat de mnage: Partie 1: Dter
17、mination de la prsence dquivalents au beurre de cacao Partie 2: Quantification des quivalents au beurre de cacao ISO 23275-2:2006(F) ISO 2006 Tous droits rservs v Introduction Lexpression quivalents au beurre de cacao est lexpression gnrale dsignant les matires grasses employes pour remplacer le beu
18、rre de cacao dans le chocolat. Leur composition chimique et leurs proprits physiques ressemblent trs fortement celles du beurre de cacao, ce qui les rend extrmement difficiles quantifier et mme, dans certains cas, dtecter. En principe, les quivalents au beurre de cacao doivent par dfinition tre des
19、matires grasses pauvres en acide laurique, riches en triacylglycrols monoinsaturs symtriques de type 1,3-dipalmitoyl-2-oloyl-glycrol, 1-palmitoyl-2-oloyl-3-staroyl-glycrol et 1,3-distaroyl-2-oloyl-glycrol, miscibles avec le beurre de cacao, et obtenues uniquement par raffinage et fractionnement. Dan
20、s lUnion Europenne, les matires grasses vgtales suivantes, obtenues partir des plantes numres ci-dessous, peuvent tre utilises isolment ou en mlanges, conformment la Directive 2000/36/CE 1 : illip, suif de Borno ou tengkawang (Shorea spp.), huile de palme (Elaeis guineensis, Elaeis olifera), sal (Sh
21、orea robusta), karit (Butyrospermum parkii), kokum gurgi (Garcinia indica), et noyaux de mangue (Mangifera indica). LISO 23275-1 spcifie un mode opratoire pour la dtection de ces matires grasses (seules existent des restrictions pour les chantillons de graisse dillip pure) dans le beurre de cacao et
22、 dans le chocolat de mnage. La prsente partie de lISO 23275 spcifie un mode opratoire permettant de raliser une quantification fiable de ces matires grasses au taux de 5 %, valeur conforme la limite statutaire fixe par la Directive 2000/36/CE 1du Parlement europen et du Conseil. Pour faciliter lutil
23、isation de ces deux parties de lISO 23275, une bote outils danalyse, nomme CoCal-1, a t cre. CoCal-1 contient, en tte des mthodes valides de dtection (partie 1) et de quantification (partie 2) des quivalents au beurre de cacao dans le chocolat de mnage, un matriau de rfrence certifi de beurre de cac
24、ao (IRMM-801) permettant dtalonner les instruments, et une fiche dvaluation lectronique Microsoft Excel permettant de calculer le rsultat final. Lanalyste charg de la dtection et de la quantification des quivalents au beurre de cacao na plus qu talonner le systme de sparation par chromatographie en
25、phase gazeuse laide du matriau de rfrence certifi IRMM-801, sparer les fractions de triglycride de lchantillon en question, et utiliser la fiche dvaluation lectronique pour le traitement des donnes afin de dtecter et de quantifier les quivalents au beurre de cacao. NORME INTERNATIONALE ISO 23275-2:2
26、006(F) ISO 2006 Tous droits rservs 1 Corps gras dorigines animale et vgtale quivalents au beurre de cacao dans le beurre de cacao et dans le chocolat de mnage Partie 2: Quantification des quivalents au beurre de cacao 1 Domaine dapplication La prsente partie de lISO 23275 spcifie un mode opratoire p
27、ermettant la quantification des quivalents au beurre de cacao (EBC) dans le beurre de cacao (BC) et le chocolat de mnage par analyse chromatographique en phase gazeuse/liquide capillaire haute rsolution (HR-GC) des triacylglycrols, et lvaluation ultrieure des donnes par analyse de rgression par la m
28、thode des moindres carrs partiels. NOTE La prsence dEBC dans le BC et le chocolat de mnage en une teneur aussi faible que 0,6 % (pour un taux de matire grasse du chocolat suppos gal 30 %) peut tre dtermine en utilisant le mode opratoire dcrit dans la lISO 23275-1. Les diffrences entre les modes opra
29、toires de lune et lautre mthodes rsident dans le nombre de triacylglycrols individuels utiliss lors du traitement des donnes et dans le principe mathmatique auquel il est fait appel pour lvaluation des donnes. La prsence dEBC est dtecte par une analyse de rgression linaire effectue sur les proportio
30、ns relatives des trois principales fractions de triacylglycrols issues de la matire grasse analyse. La quantit dEBC dans le mlange est estime par une analyse de rgression par la mthode des moindres carrs partiels effectue sur les proportions relatives des cinq triacylglycrols principaux. 2 Termes et
31、 dfinitions Pour les besoins de la prsente Norme internationale, les termes et dfinitions suivants sappliquent. 2.1 quivalents au beurre de cacao EBC matires grasses dtectes dans le beurre de cacao et le chocolat de mnage 2.2 teneur en EBC du beurre de cacao fraction massique de substance dtermine s
32、elon la mthode spcifie dans la prsente partie de lISO 23275 NOTE Elle est exprime en grammes pour 100 g de beurre de cacao. 2.3 teneur en EBC du chocolat fraction massique de substance dtermine selon la mthode spcifie dans la prsente partie de lISO 23275 NOTE Elle est exprime en grammes pour 100 g d
33、e chocolat. ISO 23275-2:2006(F) 2 ISO 2006 Tous droits rservs3 Principe Le beurre de cacao, ou la matire grasse obtenue partir de chocolat de mnage, est spar en fractions de triacylglycrols par HR-GC en fonction de la masse molculaire et du degr dinsaturation de ceux-ci. La quantit ajoute dEBC est e
34、stime par une analyse de rgression par la mthode des moindres carrs partiels effectue sur les fractions de triacylglycrols individuels issus de la matire grasse analyse. 4 Ractifs et matriaux Tous les ractifs doivent tre de qualit analytique reconnue, sauf indication contraire. AVERTISSEMENT Lattent
35、ion des lecteurs est attire sur les rgles qui rgissent la manipulation des produits dangereux. Les mesures de scurit sur les plans technique, organisationnel et personnel doivent tre suivies. 4.1 Matriau de Rfrence Certifi (MRC) beurre de cacao IRMM-801 2 , pour talonnage et vrification de laptitude
36、 du systme. 4.2 Solvant dextraction, solvants non chlors (par exemple ther dithylique, n-heptane, iso-octane). 4.3 Acide chlorhydrique, c = 8 mol/l. 4.4 Papier filtre pliss 1) , 15 cm. 5 Appareillage 5.1 Balance danalyse, avec une prcision de lecture de 0,1 mg. 5.2 tuve dessiccation, maintenue 55 C
37、Il est possible dutiliser un bloc chauffant chaleur sche. 5.3 Robot mnager, un appareil de cuisine dont le moteur est situ au-dessus du rcipient collecteur afin dviter de faire fondre les chantillons 2) . 5.4 Fioles jauges, de 20 ml de capacit. 5.5 Pipettes, de 1 ml de capacit. 5.6 Microseringue, vo
38、lume maximal de 10 l avec graduations de 0,1 l, ou chantillonneur automatique. 5.7 Chromatographe en phase gazeuse (GC), un chromatographe quip dun systme dinjection froid sur colonne et dun dtecteur ionisation de flamme (FID). Dautres systmes dinjection, par exemple un injecteur dbit divis, un vapo
39、risateur temprature programme (VTP), ou un injecteur aiguille mobile, peuvent tre employs condition que soient obtenus les mmes rsultats que ceux indiqus en 10.2. 1) Le papier-filtre moyen S programmation de temprature: 30 C/min de 100 C (temprature initiale) 340 C (temprature finale); gaz vecteur:
40、hlium ou hydrogne (puret W 99,999 %). NOTE Des types de colonnes appropris ainsi que dautres conditions exprimentales, utiliss lors dune tude comparative interlaboratoires internationale, sont numrs dans lAnnexe A. Il est possible de modifier les conditions de fonctionnement en vue dobtenir une spar
41、ation optimale des triacylglycrols du beurre de cacao. 5.8 Systme de traitement des donnes chromatographiques. 5.9 Extracteur Soxhlet, quip de bouchons rodage conique normaliss, dun siphon dune capacit denviron 100 ml (cartouche dextraction de 33 mm 88 mm), dun Erlenmeyer de 250 ml, et dun chauffe-
42、ballon thermostat. 6 chantillonnage Il convient quun chantillon reprsentatif ait t envoy au laboratoire. Il convient quil nait t ni endommag ni modifi au cours du transport ou du stockage. Lchantillonnage ne fait pas partie de la mthode indique dans la prsente Norme internationale. Une mthode dchant
43、illonnage recommande est indique dans lISO 5555. 7 Prparation de lchantillon pour essai 7.1 Prparation du MRC beurre de cacao pour talonnage et vrification de laptitude du systme Avant douvrir et dutiliser le MRC beurre de cacao (4.1), lampoule doit tre chauffe dans une tuve dessiccation (5.2) jusqu
44、 ce que son contenu ait fondu. lobtention dune solution limpide, mlanger le contenu de lampoule par retournements successifs pendant au moins 20 s, louvrir et en verser le contenu dans un flacon propre pouvant tre hermtiquement ferm et conserv au froid en vue dune utilisation ultrieure. 7.2 Prparati
45、on de lchantillon de chocolat Rfrigrer environ 200 g de chocolat jusqu ce quil soit dur, puis le rduire en fins copeaux laide dun dispositif mcanique (5.3). Bien mlanger et conserver au froid dans un flacon soigneusement ferm par un bouchon. 8 Mode opratoire 8.1 Extraction de la matire grasse Isoler
46、 la matire grasse et dterminer la teneur en matire grasse du chocolat (prpar de la faon dcrite en 7.2) laide dun extracteur Soxhlet 3 . Autrement dit: placer tout dabord 4 g 5 g de chocolat dans un bcher de 300 ml 500 ml. Ajouter lentement, tout en agitant, 45 ml de H 2 O bouillante afin de former une suspension homogne. Ajouter 55 ml de HCl (4.3) et quelques copeaux dbullition exempts de graisse ou un autre agent antidbordement, puis agiter. Couvrir avec un verre de montre, porter lentement bullition, et
