1、 Numro de rfrence ISO 23275-1:2006(F) ISO 2006NORME INTERNATIONALE ISO 23275-1 Premire dition 2006-11-01Corps gras dorigines animale et vgtale quivalents au beurre de cacao dans le beurre de cacao et dans le chocolat de mnage Partie 1: Dtermination de la prsence dquivalents au beurre de cacao Animal
2、 and vegetable fats and oils Cocoa butter equivalents in cocoa butter and plain chocolate Part 1: Determination of the presence of cocoa butter equivalents ISO 23275-1:2006(F) PDF Exonration de responsabilit Le prsent fichier PDF peut contenir des polices de caractres intgres. Conformment aux condit
3、ions de licence dAdobe, ce fichier peut tre imprim ou visualis, mais ne doit pas tre modifi moins que lordinateur employ cet effet ne bnficie dune licence autorisant lutilisation de ces polices et que celles-ci y soient installes. Lors du tlchargement de ce fichier, les parties concernes acceptent d
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6、nformer le Secrtariat central ladresse donne ci-dessous. ISO 2006 Droits de reproduction rservs. Sauf prescription diffrente, aucune partie de cette publication ne peut tre reproduite ni utilise sous quelque forme que ce soit et par aucun procd, lectronique ou mcanique, y compris la photocopie et le
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8、O 23275-1:2006(F) ISO 2006 Tous droits rservs iii Sommaire Page Avant-propos. iv Introduction v 1 Domaine dapplication 1 2 Termes et dfinitions 1 3 Principe 1 4 Ractifs et matriaux 1 5 Appareillage 2 6 chantillonnage 3 7 Prparation de lchantillon pour essai 3 7.1 Prparation du MRC beurre de cacao po
9、ur talonnage et vrification de laptitude du systme 3 7.2 Prparation de lchantillon de chocolat 3 8 Mode opratoire 3 8.1 Extraction de la matire grasse. 3 8.2 Sparation des triacylglycrols individuels par HR-GC . 3 8.3 Identification 4 9 Calculs . 4 9.1 Dtermination des facteurs de rponse . 4 9.2 Cal
10、cul des pourcentages des triacylglycrols 4 9.3 Dcision relative la puret en beurre de cacao de lchantillon. 5 10 Exigences du mode opratoire . 5 10.1 Considrations gnrales 5 10.2 Aptitude du systme. 5 11 Fidlit . 6 11.1 Essai interlaboratoires . 6 11.2 Rptabilit 6 11.3 Reproductibilit. 6 12 Rapport
11、dessai . 6 Annexe A (informative) Rsultats dun essai interlaboratoires. 7 Bibliographie 13 ISO 23275-1:2006(F) iv ISO 2006 Tous droits rservsAvant-propos LISO (Organisation internationale de normalisation) est une fdration mondiale dorganismes nationaux de normalisation (comits membres de lISO). Lla
12、boration des Normes internationales est en gnral confie aux comits techniques de lISO. Chaque comit membre intress par une tude a le droit de faire partie du comit technique cr cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec lISO participent ga
13、lement aux travaux. LISO collabore troitement avec la Commission lectrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation lectrotechnique. Les Normes internationales sont rdiges conformment aux rgles donnes dans les Directives ISO/CEI, Partie 2. La tche principale des comits techniqu
14、es est dlaborer les Normes internationales. Les projets de Normes internationales adopts par les comits techniques sont soumis aux comits membres pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert lapprobation de 75 % au moins des comits membres votants. Lattention est appele sur le f
15、ait que certains des lments du prsent document peuvent faire lobjet de droits de proprit intellectuelle ou de droits analogues. LISO ne saurait tre tenue pour responsable de ne pas avoir identifi de tels droits de proprit et averti de leur existence. LISO 23275-1 a t labore par le comit technique IS
16、O/TC 34, Produits alimentaires, sous-comit SC 11, Corps gras dorigines animale et vgtale. LISO 23275 comprend les parties suivantes, prsentes sous le titre gnral Corps gras dorigines animale et vgtale quivalents au beurre de cacao dans le beurre de cacao et dans le chocolat de mnage: Partie 1: Dterm
17、ination de la prsence dquivalents au beurre de cacao Partie 2: Quantification des quivalents au beurre de cacao ISO 23275-1:2006(F) ISO 2006 Tous droits rservs v Introduction Lexpression quivalents au beurre de cacao est lexpression gnrale dsignant les matires grasses employes pour remplacer le beur
18、re de cacao dans le chocolat. Leur composition chimique et leurs proprits physiques ressemblent trs fortement celles du beurre de cacao, ce qui les rend extrmement difficiles quantifier et mme, dans certains cas, dtecter. En principe, les quivalents au beurre de cacao doivent par dfinition tre des m
19、atires grasses pauvres en acide laurique, riches en triacylglycrols monoinsaturs symtriques de type 1,3-dipalmitoyl-2-oloyl-glycrol, 1-palmitoyl-2-oloyl-3-staroyl-glycrol et 1,3-distaroyl-2-oloyl-glycrol, miscibles avec le beurre de cacao, et obtenues uniquement par raffinage et fractionnement. Dans
20、 lUnion Europenne, les matires grasses vgtales suivantes, obtenues partir des plantes numres ci-dessous, peuvent tre utilises isolment ou en mlanges, conformment la Directive 2000/36/CE 1 : illip, suif de Borno ou tengkawang (Shorea spp.), huile de palme (Elaeis guineensis, Elaeis olifera), sal (Sho
21、rea robusta), karit (Butyrospermum parkii), kokum gurgi (Garcinia indica), et noyaux de mangue (Mangifera indica). La prsente partie de lISO 23275 spcifie un mode opratoire pour la dtection de ces matires grasses (seules existent des restrictions pour les chantillons de graisse dillip pure) dans le
22、beurre de cacao et dans le chocolat de mnage. LISO 23275-2 spcifie un mode opratoire permettant de raliser une quantification fiable de ces matires grasses au taux de 5 %, valeur conforme la limite statutaire fixe par la Directive 2000/36/CE 1du Parlement europen et du Conseil. Pour faciliter lutili
23、sation de ces deux parties de lISO 23275, une bote outils danalyse, nomme CoCal-1, a t cre. CoCal-1 contient, en tte des mthodes valides de dtection (partie 1) et de quantification (partie 2) des quivalents au beurre de cacao dans le chocolat de mnage, un matriau de rfrence certifi de beurre de caca
24、o (IRMM-801) permettant dtalonner les instruments, et une fiche dvaluation lectronique Microsoft Excel permettant de calculer le rsultat final. Lanalyste charg de la dtection et de la quantification des quivalents au beurre de cacao na plus qu talonner le systme de sparation par chromatographie en p
25、hase gazeuse laide du matriau de rfrence certifi IRMM-801, sparer les fractions de triglycride de lchantillon en question, et utiliser la fiche dvaluation lectronique pour le traitement des donnes afin de dtecter et de quantifier les quivalents au beurre de cacao. Des informations sur le CoCal-1 peu
26、vent tre trouves sur le site Internet de lInstitute for Reference Materials and Measurements: http:/www.irmm.jrc.be. NORME INTERNATIONALE ISO 23275-1:2006(F) ISO 2006 Tous droits rservs 1 Corps gras dorigines animale et vgtale quivalents au beurre de cacao dans le beurre de cacao et dans le chocolat
27、 de mnage Partie 1: Dtermination de la prsence dquivalents au beurre de cacao 1 Domaine dapplication La prsente partie de lISO 23275 spcifie un mode opratoire permettant la dtection des quivalents au beurre de cacao (EBC) dans le beurre de cacao (BC) et le chocolat de mnage par analyse chromatograph
28、ique en phase gazeuse/liquide capillaire haute rsolution (HR-GC) des triacylglycrols, et lvaluation ultrieure des donnes par analyse de rgression. La mthode sapplique la dtection de 2 % dEBC incorpors dans du beurre de cacao, proportion correspondant environ 0,4 % dEBC dans le chocolat (dans lhypoth
29、se dun taux de matires grasses de ce dernier gal 30 %). 2 Termes et dfinitions Pour les besoins de la prsente Norme internationale, les termes et dfinitions suivants sappliquent. 2.1 quivalents au beurre de cacao EBC matires grasses dtectes dans le beurre de cacao et le chocolat de mnage conformment
30、 au mode opratoire recommand dans la prsente partie de lISO 23275 NOTE Le rsultat est exprim sous forme qualitative, savoir EBC prsents/EBC absents (OUI/NON). 3 Principe Le beurre de cacao, ou la matire grasse obtenue au moyen dune extraction par solvant partir de chocolat de mnage, est spar en frac
31、tions de triacylglycrols par HR-GC en fonction de la masse molculaire et du degr dinsaturation de ceux-ci. La prsence dEBC est dtecte par une analyse de rgression linaire effectue sur les fractions de triacylglycrols individuels issus de la matire grasse analyse. 4 Ractifs et matriaux Tous les racti
32、fs doivent tre de qualit analytique reconnue, sauf indication contraire. AVERTISSEMENT Lattention des lecteurs est attire sur les rgles qui rgissent la manipulation des produits dangereux. Les mesures de scurit sur les plans technique, organisationnel et personnel doivent tre suivies. ISO 23275-1:20
33、06(F) 2 ISO 2006 Tous droits rservs4.1 Matriau de Rfrence Certifi (MRC) beurre de cacao IRMM-801 2 , pour talonnage et vrification de laptitude du systme. 4.2 Solvant dextraction, solvants non chlors, par exemple ther dithylique, n-heptane, iso-octane. 5 Appareillage 5.1 Balance danalyse, avec une p
34、rcision de lecture de 0,1 mg. 5.2 tuve dessiccation, maintenue 55 C Il est possible dutiliser un bloc chauffant chaleur sche. 5.3 Robot mnager, cest-dire un appareil de cuisine dont le moteur est situ au-dessus du rcipient collecteur afin dviter de faire fondre les chantillons 1) . 5.4 vaporateur ro
35、tatif Dautres mthodes dvaporation peuvent tre employes. 5.5 Pipettes, de 1 ml de capacit. 5.6 Fioles jauges, de 20 ml de capacit. 5.7 Microseringue, volume maximal de 10 l avec graduations de 0,1 l, ou chantillonneur automatique. 5.8 Chromatographe en phase gazeuse (GC), quip dun systme dinjection f
36、roid sur colonne et dun dtecteur ionisation de flamme (FID). Dautres systmes dinjection, par exemple un injecteur dbit divis, un vaporisateur temprature programme (VTP), ou un injecteur aiguille mobile, peuvent tre employs condition que soient obtenus les mmes rsultats que ceux indiqus en 10.2. La s
37、paration et la dtection se sont avres satisfaisantes en suivant les conditions exprimentales ci-dessous: colonne GC: 25 m 30 m de longueur, avec un diamtre intrieur de 0,25 mm, en silice fondue revtue de poly(phnylmthylsiloxane) 50 % thermostable, sous forme dun film dpaisseur 0,1 m 0,15 m; programm
38、ation de temprature: 30 C/min de 100 C (temprature initiale) 340 C (temprature finale); gaz vecteur: hlium ou hydrogne (puret W 99,999 %). NOTE Des types de colonnes appropris ainsi que dautres conditions exprimentales, utiliss lors dune tude comparative interlaboratoires internationale, sont numrs
39、dans lAnnexe A. Il est possible de modifier les conditions de fonctionnement en vue dobtenir une sparation optimale des triacylglycrols du beurre de cacao. 5.9 Systme de traitement des donnes chromatographiques. 1) Philips HR 2833 est un exemple de produit disponible sur le march. Cette information
40、est donne par souci de commodit lintention des utilisateurs de la prsente partie de lISO 23275 et ne saurait constituer un engagement de lISO lgard de ce produitISO 23275-1:2006(F) ISO 2006 Tous droits rservs 3 6 chantillonnage Il convient quun chantillon reprsentatif ait t envoy au laboratoire et q
41、uil nait pas t endommag ou modifi au cours du transport ou du stockage. Lchantillonnage ne fait pas partie de la mthode indique dans la prsente partie de lISO 23275. Une mthode dchantillonnage recommande est indique dans lISO 5555. 7 Prparation de lchantillon pour essai 7.1 Prparation du MRC beurre
42、de cacao pour talonnage et vrification de laptitude du systme Avant douvrir et dutiliser le MRC beurre de cacao (4.1), lampoule doit tre chauffe dans une tuve dessiccation (5.2) jusqu ce que son contenu ait fondu. lobtention dune solution limpide, mlanger le contenu de lampoule par retournements suc
43、cessifs pendant au moins 20 s, louvrir et en verser le contenu dans un flacon propre pouvant tre hermtiquement ferm et conserv au froid en vue dune utilisation ultrieure. 7.2 Prparation de lchantillon de chocolat Rfrigrer environ 200 g de chocolat jusqu ce quil soit dur, puis le rduire en fins copea
44、ux laide dun dispositif mcanique (5.3). Bien mlanger et conserver au froid dans un flacon soigneusement ferm par un bouchon. 8 Mode opratoire 8.1 Extraction de la matire grasse Sparer la matire grasse partir de 10 g 40 g de chocolat rp (de la faon dcrite en 7.2) par extraction laide de deux ou trois
45、 portions de 100 ml dun solvant dextraction (4.2). Centrifuger et laisser dcanter. Runir les extraits, vaporer (5.4) lessentiel du solvant dextraction, puis scher le rsidu sous courant dazote. Dautres mthodes dextraction peuvent tre employes, en utilisant par exemple un extracteur de Soxhlet, le dio
46、xyde de carbone supercritique ou les micro-ondes, condition que les mmes rsultats soient obtenus. 8.2 Sparation des triacylglycrols individuels par HR-GC Les chantillons dessai beurre de cacao, matire grasse extraite du chocolat, MRC beurre de cacao (4.1) doivent tre chauffs dans une tuve dessiccati
47、on (5.2) jusqu ce quils aient compltement fondu. Si lchantillon liquide contient des sdiments, filtrer lchantillon lintrieur de ltuve afin dobtenir un filtrat limpide. Il convient que les pipettes (ou tout instrument du mme type) servant transfrer lchantillon lors des oprations de pese soient amenes une temprature denviron 55 C dans une tuve dessiccation (5.2) afin d
