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    ISO 11292-1995 Instant coffee - Determination of free and total carbohydrate contents - Method using high-performance anion-exchange chromatography《速溶咖啡 游离的和碳水化.pdf

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    ISO 11292-1995 Instant coffee - Determination of free and total carbohydrate contents - Method using high-performance anion-exchange chromatography《速溶咖啡 游离的和碳水化.pdf

    1、NORME INTERNATIONALE Iso 11292 Premire dition 1995-06-I 5 Corrige et rimprime 1997-02-01 Caf soluble - Dtermination des teneurs en hydrates de carbone libres et totaux - Mthode par chromatographie dchange danions haute performance lnstan t coffee - Determination of free and total carbohydrate conten

    2、ts - Method using high-performance anion-exchange _ chromatography Numro de rfrence ISO II 292:1995(F) ISO 11292:1995(F) Avant-propos LISO (Organisation internationale de normalisation) est une fdration mondiale dorganismes nationaux de normalisation (comits membres de IISO). Llaboration des Normes

    3、internationales est en gnral confie aux comits techniques de IISO. Chaque comit membre intress par une tude a le droit de faire partie du comit technique cr cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernemen- tales, en liaison avec IISO participent galement aux travaux

    4、. LISO colla- bore troitement avec la Commission lectrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation lectrotechnique. Les projets de Normes internationales adopts par les comits techniques sont soumis aux comits membres pour vote. Leur publication comme Normes internationales re

    5、quiert lapprobation de 75 % au moins des co- mits membres votants. La Norme internationale ISO 11292 a t labore par le comit technique ISO/TC 34, Produits agricoles alimentaires, sous-comit SC 15, Caf. Les annexes A et B de la prsente Norme internationale sont donnes uniquement titre dinformation. 0

    6、 ISO 1995 Droits de reproduction rservs. Sauf prescription diffrente, aucune partie de cette publi- cation ne peut tre reproduite ni utilise sous quelque forme que ce soit et par aucun pro- cd, lectronique ou mcanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans laccord crit de lditeur. Organisa

    7、tion internationale de normalisation Case Postale 56 l CH-l 211 Genve 20 l Suisse Imprim en Suisse ii NORME INTERNATIONALE 0 ISO SO 11292:1995(F) Caf soluble - Dtermination des teneurs en hydrates de carbone libres et totaux - Mthode par chromatographie dchange danions haute performance 1 Domaine da

    8、pplication La prsente Norme internationale prescrit une m- thode pour la dtermination de la teneur en hydrates de carbone libres et totaux dans le caf soluble par chromatographie dchange danions haute perfor- mance. Elle permet en particulier de doser les mono- saccharides individuels, le saccharose

    9、 et le mannitol. 2 Rfrences normatives Les normes suivantes contiennent des dispositions qui, par suite de la rfrence qui en est faite, consti- tuent des dispositions valables pour la prsente Norme internationale. Au moment de la publication, les ditions indiques taient en vigueur. Toute norme est s

    10、ujette rvision et les parties prenantes des accords fonds sur la prsente Norme internatio- nale sont invites rechercher la possibilit dappli- quer les ditions les plus rcentes des normes indiques ci-aprs. Les membres de la CEI et de IISO possdent le registre des Normes internationales en vigueur un

    11、moment donn. ISO 1042:1983, Verrerie de laboratoire - Fioles jau- ges un trait. ISO 3509: 1989, Cafs et drivs - Vocabulaire. ISO 3726: 1983, Caf soluble - Dtermination de la perte de masse 70 “C sous pression rduite. 3 Dfinitions Pour les besoins de la prsente Norme internationale, les dfinitions do

    12、nnes dans IISO 3509 et les dfini- tions suivantes sappliquent. 3.1 teneur en hydrates de carbone libres: Teneur en chaque monosaccharide individuel (arabinose, fructose, galactose, glucose, mannose), en saccha- rose et en mannitol, dtermine dans les conditions dcrites (mthode A). Cette teneur est ex

    13、prime en pourcentage en masse sur matire sche. 3.2 teneur en hydrates de carbone totaux: Teneur en chaque monosaccharide individuel (arabinose, galactose, glucose, mannose, xylose) et en mannitol, dtermine dans les conditions dcrites, ce qui inclut une tape dhydrolyse forte (mthode B). Cette te- neu

    14、r est exprime en pourcentage en masse sur ma- tire sche. 4 Principe 4.1 Mthode A Dissolution dune prise dessai dans de leau. Spa- ration des hydrates de carbone prsents dans lextrait filtr par chromatographie ionique sur une colonne changeuse danions haute performance, en utili- sant uniquement de l

    15、eau comme luant. Dtection lectrochimique des composs lus laide dun dtecteur ampromtrie pulse et quantification par comparaison avec les aires des pics produits par des solutions talons. ISO 11292:1995(F) 0 ISO Peser, 0,l mg prs, environ 100 mg de chaque hydrate de carbone dans des fioles jauges indi

    16、vi- duelles de 100 ml (6.2) et complter au trait repre avec de leau (solutions mres 1 000 mg/l). 4.2 Mthode B Hydrolyse dune prise dessai avec une solution aqueuse dacide chlorhydrique. Analyse des hydrates de carbone prsents dans la solution hydrolyse fil- tre comme dcrit pour la mthode A. Des solu

    17、tions talons mixtes peuvent galement tre prpares partir des solutions mres individuelles, une fois que lon connat le temps de rtention de chaque hydrate de carbone dans les conditions chro- matographiques utilises. 5 Ractifs Effectuer des dilutions supplmentaires des solutions talons afin dobtenir d

    18、es concentrations en hydrate de carbone semblables celles que lon trouve dans les solutions hydrolyses ou non hydrolyses des chantillons de caf soluble. Sauf indication diffrente, utiliser uniquement des r- actifs de qualit analytique reconnue et de leau dis- qui- tille ou dminralise ou de leau de v

    19、alente. puret HI, SO lution Une bonne sparation entre le rhamnose et Iara- binose est difficile raliser. Si ces deux mono- saccharides coluent, ne pas inclure de rhamnose dans la solution talon mixte. 5.1 Hydroxyde de sodium (Na0 aqueuse 50 % (m/m. Le ractif doit contenir le moins possible de carbon

    20、ate de sodium et de mercure. Ne pas secouer ou agiter la solution avant lemploi. 6 Appareillage 5.2 Acide chlorhydrique (HCI), solution titre 1 ,00 mol/l. Matriel courant de laboratoire, et en particulier, ce qui suit. 5.3 luant 1 (SI), eau dminralise (18 MQcm). 6.1 Balance analytique, prcise + 0,l

    21、mg. Filtrer leau dminralise sur des membranes fil- trantes de 0,2 prn. Dgazer en faisant barboter de lhlium pendant 20 min 30 min. 6.2 Fioles jauges un trait, dune capacit de 100 ml (conformes la classe A de IISO 1042). 5.4 luant 2 (S2), hydroxyde de sodium (NaOH), solution 300 mmol/l. 6.3 prouvette

    22、s gradues, dune capacit de 1 000 ml et 50 ml, forme haute. laide dune pipette, ajouter 15,6 ml de la solution dhydroxyde de sodium (5.1) 985 ml deau dgaze (5.3). 6.4 Systme de filtration sous vide. ATTENTION - II est extrmement important dli- miner avant lemploi le dioxyde de carbone dissous dans le

    23、s luants. Le carbonate a un trs fort effet (poussant) sur la colonne, qui provoque une svre rduction de la rsolution et de lefficacit. Prparer la solution le jour prcdant lanalyse. 6.5 Papiers filtres plisss, moyens, qualitatifs. 6.6 Cartouches filtrantes Cl8 usage unique? utiliser selon les recomma

    24、ndations du fabricant. 67 tre Membranes filtrantes usage unique, diam- 5.5 Solutions talons dhydrate de carbone. des pores 0,2 prn. Prparer des solutions fraches darabinose, fructose, galactose, glucose, mannose, saccharose et mannitol. 6.8 Bain deau, rglable 100 “C + 5 “C. - 1) Sep-Pack Cl 8 (Water

    25、s) et Supelclean LC-18 (Supelco) sont des exemples de produits appropris disponibles sur le march. Cette information est donne lintention des utilisateurs de la prsente Norme internationale et ne signifie nullement que IISO approuve ou recommande lemploi exclusif des produits ainsi dsigns. 2 0 ISO I

    26、SO 11292:1995(F) 6.9 Chromatographe en phase liquide exempt de mtaux*), comprenant une colonne analytique chan- geuse danions 3) remplie dune rsine pelliculaire en polystyrne divinylbenzne, une prcolonne4) et un systme daddition postcolonne. 6.10 Dtecteur ampromtrie pulse avec une lectrode en or5).

    27、6.11 nes Intgrateur systme de traitement des don- chromatographiques? 6.12 Cartouches changeuses dions usage unique71 t utiliser selon les recommandations du fa- bricant. 7 chantillonnage II est important que le laboratoire reoive un chan- tillon rellement reprsentatif, non endommag ou modifi lors d

    28、u transport et de lentreposage. Lchantillonnage ne fait pas partie de la mthode spcifie dans la prsente Norme internationale. Une mthode dchantillonnage recommande est donne dans IISO 6670:1983, Caf soluble en caisses dou- bles - chantillonnage. Lorsque le caf soluble nest pas reu en caisses doubles

    29、, prendre un chantillon reprsentatif bien mlang partir dunits emballes sparment. 8.2 Prparation de lchantillon pour analyse - Mthode A Peser, 0,l mg prs, environ 300 mg de lchantillon pour laboratoire directement dans une fiole jauge de 100 ml (6.2). laide dune prouvette gradue (6.3), ajouter 70 ml

    30、deau et agiter jusqu dissolution com- plte. Complter au trait repre avec de leau. Filtrer 5 ml 10 ml de cette solution sur une cartouche fil- trante (6.6). Rejeter les premiers millilitres. 8.3 Prparation de lchantillon pour analyse - Mthode B Peser, 0,l mg prs, environ 300 mg de lchantillon pour la

    31、boratoire directement dans une fiole jauge de 100 ml (6.2). Ajouter 50 ml dacide chlorhydrique (5.2) et agiter. Placer la fiole pendant 150 min dans un bain deau bouillante (6.8). Maintenir constamment le niveau de la solution analyser en dessous de celui de leau du bain. Agiter la solution la main

    32、toutes les 30 min. Refroidir temprature ambiante en passant la fiole sous leau courante. Complter au trait repre avec de leau et filtrer la solution travers un papier filtre pliss (6.5). Faire passer 3 ml de filtrat sur une cartouche chan- geuse dions (6.12). Rejeter le premier millilitre. 8.4 Analy

    33、se chromatographique Installer le chromatographe (6.91, le dtecteur (6.10) et Iintgrateur (6.11). Laisser le systme squilibrer. 8 Mode opratoire 8.1 Dtermination de la teneur en matire sche Calculer la teneur en matire sche sur une portion de lchantillon pour laboratoire conformment IISO 3726. Filtr

    34、er les solutions talons (5.5) et les solutions analyser (8.2 ou 8.3) sur des membranes filtrantes de 0,2 prn (6.7). Injecter dans le chromatographe le mme volume de solution talon filtre et de solution analyser filtre et sparer les hydrates de carbone dans les conditions indiques dans les tableaux 1

    35、 et 2 . 2) Le systme BioLC (Dionex) comprenant une pompe gradient quaternaire modle GPM-II, un passeur dchantillons SP8875 (Spectra - Physics) avec une boucle de 20 1, un module de dgazage dluant modle EDM-II (Dionex) et un rservoir pour laddition postcolonne de NaOH (Dionex) sont des exemples de pr

    36、oduits appropris disponibles sur le march. 3) CarboPac PA1 (10 prn, 250 mm x 4 mm) (Dionex) est un exemple de colonne analytique approprie disponible sur le mar- ch. 4) CarboPac PA (Dionex) est un exemple de prcolonne approprie disponible sur le march. 5) Le modle PAD-II (Dionex) est un exemple dapp

    37、areillage appropri disponible sur le march. 6) Le modle Autolon AI-450 est un exemple de systme appropri disponible sur le march. 7) On Guard-AG (Dionex) est un exemple de cartouche approprie disponible sur le march. Ces informations sont donnes lintention des utilisateurs de la prsente Norme intern

    38、ationale et ne signifie nullement que IISO approuve ou recommande lemploi exclusif des produits ainsi dsigns. ISO 11292:1995(F) Tableau 1 - Prparation de la colonne huant Isocratique Temps min 0 luant Sl ml 100 luant s2 ml 0 Mode opratoire Commencer Ienregis- trement 50,o 100 0 Terminer Ienregis- tr

    39、ement 50,l 0 100 Commencer le lavage 65,0 0 100 Terminer le lavage 65,l 100 0 Commencer le rquili- brage 80,O 100 0 Terminer le rquilibrage NOTES 1) Les temps de rtention peuvent varier dune colonne lautre. Commencer le lavage de la colonne uniquement lorsque le dernier monosaccharide (ribose) a t l

    40、u. 2) II peut tre ncessaire deffectuer deux ou trois injections de solution talon ou de prolonger la dure de rquilibrage afin dobtenir une bonne sparation du saccharose et du xylose. Tableau 2 - Conditions danalyse Injection 20 PI Dbit 1,0 mI/min Addition postcolonne luant S2 (5.4) un dbit de 0,6 mI

    41、/min Temprature Ambiante Dtecteur Remplir la cellule de rfrence avec Iluant S2 (5.4). Appliquer les conditions optimales recommandes par le fabricant. Identifier et quantifier les hydrates de carbone dans la solution analyser par comparaison avec les temps de rtention et les aires des pics correspon

    42、dants ob- tenus pour les solutions talons. o Injecter une solution talon toutes les quatre injec- tions, afin de tenir compte de tout changement dans les temps de rtention ou les intgrations des pics. 9 Calcul La teneur en hydrate de carbone, CI), exprime en mO est la masse, en grammes, de lhydrate

    43、de pourcentage en masse, est gale carbone dans la solution talon (5.5); A est laire du pic de lhydrate de carbone dans la solution analyser (8.4); AO est laire du pic de lhydrate de carbone dans la solution talon (8.4); m est la masse, en grammes, de la prise dessai dans la solution analyser (8.2 ou

    44、 8.3), exprime sur matire sche; A-q-V CO= Ao=mmVo x 100 0 ISO ISO 11292:1995(F) V est le volume, en millilitres, de la solution analyser (8.2 ou 8.3); VO est le volume, en millilitres, de la solution talon (5.5). Prendre comme rsultat la moyenne arithmtique de deux dterminations. Exprimer le rsultat

    45、 soit en hydrate de carbone libre (mthode A) ou total (m- thode B), 0,Ol %(m/m) prs pour chaque hydrate de carbone analys, ou pour la totalit des hydrates de carbone dtects. 10 Fidlit Des dtails dun essai interlaboratoire concernant la fidlit de la mthode sont rsums dans Ian- nexe A. Les valeurs ddu

    46、ites de cet essai interlabo- ratoire peuvent ne pas tre applicables des gammes et matrices de concentrations autres que celles don- nes. Les valeurs de rptabilit et de reproductibilit obte- nues pour chaque hydrate de carbone sont nettement dpendantes de leur concentration. Dans beaucoup dchantillon

    47、s, les concentrations en hydrates de car- bone taient trs basses, ce qui explique certaines mauvaises valeurs de reproductibili. Cependant, avec des concentrations plus leves, les deux valeurs de fidlit sont acceptables comme il est aussi indiqu dans lannexe A. 10.2 Reproductibilit La reproductibilit est dfinie comme tant la diff- rence absolue entre deux rsultats dessai individuels, obtenus sur un matriau identique soumis lessai dans des laboratoires diffrents par des oprateurs diffrents utilisant des appareillages diffrents. II nest


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