1、 ISO 2012 Qualit du sol Dtermination des effets des polluants sur la flore du sol Partie 2: Effets des sols contamins sur lmergence et la croissance des vgtaux suprieurs Soil quality Determination of the effects of pollutants on soil flora Part 2: Effects of contaminated soil on the emergence and ea
2、rly growth of higher plants Numro de rfrence ISO 11269-2:2012(F) NORME INTERNATIONALE ISO 11269-2 Troisime dition 2012-01-15 ISO 11269-2:2012(F) ii ISO 2012 Tous droits rservs DOCUMENT PROTG PAR COPYRIGHT ISO 2012 Droits de reproduction rservs. Sauf prescription diffrente, aucune partie de cette pub
3、lication ne peut tre reproduite ni utilise sous quelque forme que ce soit et par aucun procd, lectronique ou mcanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans laccord crit de lISO ladresse ci-aprs ou du comit membre de lISO dans le pays du demandeur. ISO copyright office Case postale 56 CH-1
4、211 Geneva 20 Tel. + 41 22 749 01 11 Fax + 41 22 749 09 47 E-mail copyrightiso.org Web www.iso.org Publi en Suisse ISO 11269-2:2012(F) ISO 2012 Tous droits rservs iii Sommaire Page Avant-propos .iv Introduction v 1 Domaine dapplication . 1 2 Rfrences normatives 1 3 Termes et dfinitions 2 4 Units 3 5
5、 Principe 3 6 Vgtaux dessai . 3 7 Matriaux . 4 7.1 Rcipients pour essais 4 7.2 Sol 4 8 quipement . 6 9 Substance de rfrence . 6 10 Mode opratoire . 7 10.1 Dispositif exprimental 7 10.2 Prparation des pots 8 10.3 Prparation des semences . 8 10.4 Conditions de croissance . 8 10.5 Mise en route de less
6、ai . 9 10.6 Manipulation au cours de lessai 9 11 Critres de validit 10 12 valuation des rsultats 10 12.1 Prsentation des donnes 10 12.2 Expression des rsultats .10 13 Analyse statistique . 11 13.1 Gnralits 11 13.2 Essai prliminaire 11 13.3 Essai dfinitif 11 14 Rapport dessai 12 Annexe A (informative
7、) Espces vgtales supplmentaires prconises sur la base de rsultats dessai obtenus en appliquant la mthode dessai Environment Canada: EPS 1/RM/45 4.14 Annexe B (informative) Donnes de phytotoxicit pour les composs de rfrence: trichloroactate de sodium et acide borique 17 Annexe C (informative) Mthode
8、recommande pour mesurer la capacit de rtention en eau du sol .18 Annexe D (informative) Recommandations pour lalimentation des sols en lments nutritifs .19 Bibliographie 20 ISO 11269-2:2012(F) Avant-propos LISO (Organisation internationale de normalisation) est une fdration mondiale dorganismes nati
9、onaux de normalisation (comits membres de lISO). Llaboration des Normes internationales est en gnral confie aux comits techniques de lISO. Chaque comit membre intress par une tude a le droit de faire partie du comit technique cr cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non g
10、ouvernementales, en liaison avec lISO participent galement aux travaux. LISO collabore troitement avec la Commission lectrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation lectrotechnique. Les Normes internationales sont rdiges conformment aux rgles donnes dans les Directives ISO/C
11、EI, Partie 2. La tche principale des comits techniques est dlaborer les Normes internationales. Les projets de Normes internationales adopts par les comits techniques sont soumis aux comits membres pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert lapprobation de 75 % au moins des co
12、mits membres votants. Lattention est appele sur le fait que certains des lments du prsent document peuvent faire lobjet de droits de proprit intellectuelle ou de droits analogues. LISO ne saurait tre tenue pour responsable de ne pas avoir identifi de tels droits de proprit et averti de leur existenc
13、e. LISO 11269-2 a t labore par le comit technique ISO/TC 190, Qualit du sol, sous-comit SC 4, Mthodes biologiques. Cette troisime dition annule et remplace la deuxime dition (ISO 11269-2:2005), qui a fait lobjet dune rvision technique. LISO 11269 comprend les parties suivantes, prsentes sous le titr
14、e gnral Qualit du sol Dtermination des effets des polluants sur la flore du sol: Partie 1: Mthode de mesurage de linhibition de la croissance des racines Partie 2: Effets des sols contamins sur lmergence et la croissance prcoce des vgtaux suprieurs iv ISO 2012 Tous droits rservs ISO 11269-2:2012(F)
15、Introduction La prsente partie de lISO 11269 dcrit un mode opratoire dvaluation de la qualit des sols de diffrentes origines porteurs de contaminations inconnues. Lvaluation des effets sur la croissance des vgtaux est base sur lmergence et les effets inhibiteurs sur les premiers stades de croissance
16、 dau moins deux espces de vgtaux suprieurs. Des orientations pour lvaluation des effets potentiels de substances sur lmergence et la croissance de plantules sont donnes dans les lignes directrices 208 de lOCDE 14 . La prsente partie de lISO 11269 se rfre troitement lISO 22030 et sappuie sur: a) les
17、rsultats du projet de recherche allemand Entwicklung eines innovativen und technischen Instrumentariums zur Optimierung der kotoxikologischen Bewertung von Bden im Hinblick auf Sanierungsziele und Schutzerfordernisse (Dveloppement dun instrument technologique innovant pour lvaluation des sols des fi
18、ns dassainissement et en tenant compte des exigences de protection); b) les discussions dans le cadre du projet commun Ecotoxicological Test Batteries (batteries dessais cotoxicologiques) qui fait partie du Groupe de recherche interdisciplinaire du BMFB (Ministre fdral allemand de lducation et de la
19、 recherche) Processes for the Bioremediation of Soil (Procds de bio- rhabilitation du sol) 23 ; c) les rsultats du Groupe de recherche interdisciplinaire ERNTE Erprobung und Vorbereitung einer praktischen Nutzung kotoxikologischer Testsysteme (Mise lpreuve et prparation dune application pratique de
20、systmes dessais cotoxicologiques) du BMFB 17 ; d) les rsultats de lessai interlaboratoires Ecotoxicological Characterisation of Waste Results and Experiences from an International Ring Test (Caractrisation cotoxicologique des dchets Rsultats et expriences dun essai interlaboratoires international) 8
21、 . La croissance des vgtaux peut tre fortement influence par les proprits du sol, telles que la texture, le pH ou le niveau dlments nutritifs. Lors des essais mens sur des sols naturels, on utilise comme substrat de mlange et substrat tmoin soit des sols de rfrence (sols non contamins ayant les mmes
22、 proprits que le sol dessai), soit des sols standards. Dans le deuxime cas, les variations de croissance des vgtaux peuvent rsulter soit de la prsence de contaminants dans le sol, soit de diffrences dans les proprits du sol telles que les lments nutritifs et la texture. Par consquent, les rsultats d
23、essais mens sur les sols sont moins faciles interprter que les rsultats dessais sur substances chimiques. ISO 2012 Tous droits rservs v Qualit du sol Dtermination des effets des polluants sur la flore du sol Partie 2: Effets des sols contamins sur lmergence et la croissance des vgtaux suprieurs AVER
24、TISSEMENT Les sols contamins peuvent contenir des mlanges inconnus de substances chimiques toxiques, mutagnes ou autrement dangereux ou des micro-organismes infectieux. La poussire ou les substances chimiques vapores au cours de la manipulation et de lincubation peuvent faire courir des risques sani
25、taires professionnels. De plus, les vgtaux peuvent absorber des substances chimiques prsentes dans le sol; il convient donc de prendre galement des mesures de scurit lors de la manipulation des vgtaux dessai. 1 Domaine dapplication La prsente partie de lISO 11269 dcrit une mthode dvaluation de la qu
26、alit dun sol inconnu et de la fonction dhabitat dun sol en dterminant lmergence et la rponse sur les premiers stades de croissance dau moins deux espces de vgtaux terrestres par rapport des sols de rfrence ou des sols tmoins standards. Elle est applicable des sols de qualit inconnue, par exemple des
27、 sols provenant de sites contamins, des sols amends ou des sols aprs rhabilitation. 2 Rfrences normatives Les documents de rfrence suivants sont indispensables pour lapplication du prsent document. Pour les rfrences dates, seule ldition cite sapplique. Pour les rfrences non dates, la dernire dition
28、du document de rfrence sapplique (y compris les ventuels amendements). ISO 10381-6, Qualit du sol chantillonnage Partie 6: Lignes directrices pour la collecte, la manipulation et la conservation, dans des conditions arobies, de sols destins lvaluation en laboratoire des processus, de la biomasse et
29、de la diversit microbiens ISO 10390, Qualit du sol Dtermination du pH ISO 10694, Qualit du sol Dosage du carbone organique et du carbone total aprs combustion sche (analyse lmentaire) ISO 11260, Qualit du sol Dtermination de la capacit dchange cationique effective et du taux de saturation en bases c
30、hangeables laide dune solution de chlorure de baryum ISO 11268-1, Qualit du sol Effets des polluants visvis des vers de terre Partie 1: Dtermination de la toxicit aigu vis vis de Eisenia fetida/Eisenia andrei ISO 11268-2, Qualit du sol Effets des polluants visvis des vers de terre Partie 2: Dtermina
31、tion des effets sur la reproduction de Eisenia fetida/Eisenia andrei ISO 11277, Qualit du sol Dtermination de la rpartition granulomtrique de la matire minrale des sols Mthode par tamisage et sdimentation ISO 11465, Qualit du sol Dtermination de la teneur pondrale en matire sche et en eau Mthode gra
32、vimtrique ISO 22030, Qualit du sol Mthodes biologiques Toxicit chronique sur les plantes suprieures NORME INTERNATIONALE ISO 11269-2:2012(F) ISO 2012 Tous droits rservs 1 ISO 11269-2:2012(F) 3 Termes et dfinitions Pour les besoins du prsent document, les termes et dfinitions suivants sappliquent. 3.
33、1 mergence apparition du coloptile ou du cotyldon au-dessus du sol 3.2 contaminant substance ou agent prsent dans le sol la suite dune activit humaine ISO 15176:2002 28 3.3 hormse amlioration, par rapport au tmoin, de lmergence, de la croissance ou de la survie des plantules (ou autre rponse des vgt
34、aux dessai) en prsence de faibles concentrations de substances chimiques ou de mlanges de sols qui sont toxiques lorsquils sont appliqus en concentrations plus leves 12 3.4 concentration minimale avec effet observ ou concentration effective CMEO plus faible pourcentage test du mlange de sol soumis e
35、ssai avec un sol de rfrence ou un sol tmoin standard dune substance pour lequel un effet statistiquement significatif est observ NOTE La CMEO est exprime en pourcentage de la masse sche du sol soumis essai par rapport la masse sche du mlange de sols. Tous les mlanges dessai au-dessus de la CMEO ont
36、un effet nocif gal ou suprieur leffet observ la CMEO. Si cette condition ne peut pas tre satisfaite, il convient dexpliquer la faon dont la CMEO et la CSEO (3.5) ont t choisies. 3.5 concentration sans effet observ CSEO pourcentage dessai de sols immdiatement infrieur la CMEO qui, compar au tmoin, na
37、 pas deffet statistiquement significatif ( 0,05) 3.6 concentration effective, x % CE xrapport effectif, x % RE x pourcentage du sol soumis essai pour lequel un critre deffet donn est inhib de x % par rapport au tmoin 3.7 rapport de mlange de sols rapport entre le sol soumis essai et le sol de rfrenc
38、e/tmoin dans un mlange de sols, exprim en pourcentage sur la base de la masse sche de sol NOTE Diffrents rapports peuvent tre appliqus dans une srie de dilutions pour tablir une relation dose-rponse 3.8 sol de rfrence sol non contamin dun site spcifique (par exemple collect dans le voisinage dun sit
39、e contamin) avec des proprits similaires (concentrations nutritives, pH, teneur en carbone organique et texture) celles du sol dessai 2 ISO 2012 Tous droits rservs ISO 11269-2:2012(F) 3.9 sol standard sol prlev sur le terrain ou sol artificiel dont les principales proprits (par exemple pH, texture,
40、teneur en matires organiques) se situent dans une gamme connue EXEMPLE Euro-Soils 11 , sol artificiel 14 , LUFA soils 1) . NOTE Les proprits des sols standards peuvent diffrer du sol dessai. 3.10 sol tmoin sol de rfrence ou sol standard utilis comme contrle et comme milieu pour prparer les sries de
41、dilution avec des sols dessai ou une substance de rfrence NOTE CE 50et CSEO sont toutes deux exprimes en milligrammes dune substance dessai par kilogramme (masse sche) du substrat dessai. Les mlanges de sols sont donns en pourcentages bass sur une masse sche de sol. 4 Units Lmergence est exprime en
42、pourcentage de plantules qui mergent par rapport aux pots tmoins. La biomasse des pousses est exprime sous forme de masse sche par vgtal ou, si ncessaire, sous forme de masse sche par pot. 5 Principe Lessai mesure lmergence et les premiers stades de croissance dau moins deux espces de vgtaux terrest
43、res (une espce monocotyldone et une espce dicotyldone). L essai compare le dveloppement des vgtaux dans un sol soumis essai et/ou dans une srie de mlanges de celui-ci avec un sol tmoin. Les semences de lespce vgtale slectionne sont plantes dans des pots contenant le sol/les mlanges de sols et dans d
44、es pots tmoins contenant un sol de rfrence ou un sol standard. Les pots sont conservs dans des conditions de croissance adaptes aux espces slectionnes. Lorsque 50 % des plantules des pots tmoins ont merg, les taux dmergence sont dtermins et les vgtaux sont claircis de manire obtenir un nombre spcifi
45、. Aprs une priode de deux trois semaines, les vgtaux restants sont recueillis pour dterminer leur biomasse. Linhibition relative de la croissance dans un sol soumis essai non dilu est dtermine pour valuer sa fonction dhabitat pour les vgtaux. Les valeurs de CSEO, de CMEO ou de CE x et de RE xpeuvent
46、, en outre, tre calcules partir de la courbe dose-rponse obtenue avec des mlanges du sol soumis essai avec le sol tmoin. NOTE Un essai de croissance des vgtaux peut inclure des critres deffet dessai supplmentaires, par exemple la longueur des pousses, la longueur des racines et la masse sche des rac
47、ines. Dans de nombreux cas, les critres deffets relatifs aux racines sont plus sensibles que la masse sche des pousses. Dans presque tous les cas, lmergence est un critre deffet moins sensible. 6 Vgtaux dessai Une espce monocotyldone et une espce dicotyldone sont soumises essai en parallle. Lavoine (Avena sativa) est prconise en tant quespce vgtale monocotyldone et la navette (Brass
