1、- 1 -动物细胞培养和核移植技术一、选择题1关于动物细胞培养的叙述，错误的是( )A用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织B将所取的组织需用胰蛋白酶等处理使其分散成单个细胞C在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液D动物细胞培养只能传 50代左右，所培养的细胞都会衰老死亡解析：选 D 动物细胞培养传至 50代左右，若细胞的遗传物质发生改变，并且带有癌变的特点，就能在适宜培养条件下无限制地传代下去。2下列关于动物细胞培养技术应用的叙述，错误的是( )A可用于检测某种物质的毒性B可通过培养各种病变细胞，用于药理等方面的研究C可通过动物细胞的大规模培养来生产病毒疫苗、干扰
2、素等D经过脱分化、再分化，可构建人造皮肤解析：选 D 动物细胞培养没有脱分化与再分化过程。3下列关于哺乳动物体细胞核移植技术和克隆动物的叙述，正确的是( )A体细胞核移植过程中通常用卵细胞作为受体细胞B目前科学家可以用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体C利用动物体细胞核移植技术可有选择地繁殖某一性别的家畜D用于核移植的供体细胞一般都选用传代 50代以内的细胞解析：选 C 体细胞核移植过程中常用减中期的卵母细胞作为受体细胞；动物体细胞的全能性受到限制，不能经过培养获得动物个体；用于核移植的供体细胞一般是 10代以内的细胞；克隆动物细胞核内的遗传物质来自供体细胞，其性别与提供细胞核的动物一致
3、，因此可有选择地克隆某一性别的家畜。4名为“我的皮肤”的生物活性绷带自从在英国诞生后，给皮肤烧伤病人带来了福音。该活性绷带的原理是先采集一些细胞样本，再让其在特殊的膜片上增殖。57 天后，将膜片敷在患者的伤口上，膜片会将细胞逐渐“释放”到伤口，并促进新生皮肤层生长，达到加速伤口愈合的目的。下列有关叙述中，错误的是( )A “我的皮肤”的获得技术属于动物细胞工程B人的皮肤烧伤后会因人体第二道防线的破坏而导致免疫力下降C种植在膜片上的细胞样本最好选自患者本人D膜片能否把细胞顺利“释放”到伤口，加速患者自身皮肤愈合与细胞膜上的 HLA有关- 2 -解析：选 B 根据题意， “我的皮肤”的获得技术属于
4、动物细胞工程中的动物细胞培养；人的皮肤烧伤后会因人体第一道防线的破坏而导致免疫力下降；种植在膜片上的细胞样本最好选自患者本人，以避免发生免疫排斥反应；人类白细胞抗原(HLA)是人类主要组织相容性复合物，作为不同个体免疫细胞相互识别的标志，因此膜片能否把细胞顺利“释放”到伤口，加速患者自身皮肤愈合与细胞膜上的 HLA有关。5下图是某克隆羊的培育过程模式图，则与获得该克隆羊接近的生殖方式和其发育成熟时所分泌的主要性激素分别是( )A无性生殖；雄性激素 B无性生殖；雌性激素C有性生殖；雄性激素 D有性生殖；雌性激素解析：选 A 克隆羊的产生属于无性生殖；由于此过程是雄性羊供核，故得到的克隆羊为雄性，
5、所分泌的性激素是雄性激素。6动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果，不能从该图获得的结论是( )A正常细胞与癌细胞的增殖速率相同B有无血清对正常细胞培养的影响较大C培养基中补充血清有助于正常细胞的培养D培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大解析：选 A 分析图中曲线可知，对癌细胞来说，相同的培养时间内，培养基中有无血清，其细胞数目相差不大，说明培养基中有无血清对癌细胞的培养影响不大；对正常细胞来说，在相同的培养时间内，有血清的培养基中培养的细胞数目远远多于没有血清的培养基中培养的细胞数目，说明有无血清对正常细胞的培养影响较
6、大；在相同条件和相同的培养时间内，癌细胞和正常细胞的数目差距较大，正常细胞达到一定的数目后不再增加，而癌细胞却能不断增加。7在将动物组织块分散成单个细胞时，可以使用胰蛋白酶。由此判断以下推测不合理的是( )A动物细胞之间可能依靠蛋白质相互联系- 3 -B处理时一定要注意处理时间、加酶量C胰蛋白酶一定不会对动物细胞造成损伤D动物细胞培养液的 pH应与胰蛋白酶作用的适宜 pH基本一致解析：选 C 胰蛋白酶可使蛋白质分解，胰蛋白酶可破坏动物细胞之间的联系，可推测动物细胞之间可能依靠蛋白质相互联系；细胞膜中含有蛋白质成分，所以一定要注意处理的时间和酶的用量，以防止对动物细胞造成损伤；酶促反应需要适宜的
7、 pH，所以培养液的 pH应与胰蛋白酶作用的适宜 pH基本一致。8实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如图所示。下列叙述错误的是( )A甲过程需要在无菌条件下进行B乙过程可用胰蛋白酶处理皮肤组织C丙过程是原代培养出现接触抑制现象D丁过程是传代培养细胞，不能保持二倍体核型解析：选 D 取小鼠的皮肤组织应在无菌条件下进行；乙过程可用胰蛋白酶处理皮肤组织，获得单细胞悬液；原代培养会出现接触抑制现象；传代培养细胞通常 10代以内能保持二倍体核型，10 代以后核型可能发生变化。9对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养，下列说法错误的是( )A在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理B细胞培养应在
8、含 5%CO2的恒温培养箱中进行，CO 2的作用是刺激细胞呼吸C为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素D在合成培养基中，通常需加入血清、血浆等天然成分解析：选 B 在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，以分解细胞间的蛋白质，得到单个细胞；细胞培养应在含 5%CO2的恒温培养箱中进行，CO 2的作用是维持培养液的 pH；为了防止细胞培养过程中细菌的污染，要求对培养液进行消毒、灭菌，也可向培养液中加入适量的抗生素；合成培养基通常需加入血清、血浆等天然成分。10如图为小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)培养的过程图，下列叙述错误的是( )A可用胶原蛋白酶分散组织
9、块中的细胞BMEF 细胞可能产生某种物质抑制胚胎干细胞的分化C加入培养液中的 MEF细胞最好是来自传代培养的细胞D细胞培养过程中可能出现细胞贴壁和接触抑制的现象解析：选 C 将动物组织细胞分散成单个细胞，可以用胶原蛋白酶或胰蛋白酶；由图可- 4 -知，在胚胎干细胞培养液中加入 MEF细胞不分化，但未加 MEF细胞的一组易分化，据此推知MEF细胞可能产生某种物质抑制胚胎干细胞的分化；加入培养液中的 MEF细胞最好是来自原代培养的细胞；在动物细胞培养过程中可能出现细胞贴壁和接触抑制的现象。二、非选择题11某研究小组进行药物实验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、
10、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量_。(2)在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是_。(3)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长_。药物实验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更_。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用_消化处理。(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_。(5)已知癌细胞的 X基因表达过量与肝肿瘤的发生密切相关。要实验一种抗肿瘤
11、药物 Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为 A、B 两组，A 组细胞培养液中加入_，B 组细胞培养液中加入无菌生理盐水。经培养后，从 A、B 两组收集等量细胞，通过分别检测 X基因在 A、B 两组细胞中的_或_合成水平的差异，确定 Y的药效。解析：(1)肿瘤细胞具有无限增殖能力，细胞周期短，相同时间内，甲细胞的数量多于乙细胞。(2)动物血清中含有胰岛素、生长激素等，能促进细胞的生长和增殖，是天然的培养基。(3)动物细胞培养时为了获得细胞悬液，需用胰蛋白酶处理组织块，使组织块中的细胞分散成单个细胞。(4)动物细胞培养时需要创造无菌的环境，因此为了防止病菌污染，可在培养基中添加抗生素。(5)设计对
12、照实验需要遵循单一变量原则，因此 A组需要加入药物Y，可通过检测基因是否完成转录和翻译来确定 Y的药效。答案：(1)多 (2)血清中含有适合动物细胞生长增殖的各种营养物质 (3)产生接触抑制 多 胰蛋白酶 (4)抗生素 (5)药物 Y mRNA 蛋白质12下面是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病(基因缺陷导致胰岛 B细胞不能正常合成胰岛素)的过程设计图解，请据图回答：(1)图中所示的结构名称是_。(2)图中、所示的生物技术名称分别是_、_。- 5 -(3)过程通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它_。(4)图中过程通常用作受体细胞的原因是_。(5
13、)图示治病的方法与一般的异体移植相比最大的优点是_。该种基因治疗所属类型为_。解析：(1)是从供体(患者)体细胞分离出的细胞核。(2)表示核移植技术，表示转基因技术。(3)核移植时，通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因是卵母细胞体积大、易操作、营养物质丰富，尤其是它含有能促进细胞核全能性表达的物质。(4)为胚胎干细胞，经诱导可形成各种类型的组织器官。(5)通过自身细胞的细胞核移植得到克隆器官，将其移植到患者体内后不会发生 免疫排斥。答案：(1)细胞核 (2)核移植技术 转基因技术(或基因工程、DNA 重组技术、基因拼接技术) (3)含有促进细胞核全能性表达的物质 (4)这些细胞分化程度很低，
14、具有全能性，可以定向诱导分化成各类细胞、组织、器官 (5)没有排斥反应 体外基因治疗13甲、乙两种化学物质可能有一定致畸、致癌作用，利用动物细胞培养的方法鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱。请依据实验结果完成下列实验报告。(1)实验步骤：制备细胞悬液：用_处理小白鼠胚胎组织使其离散成单个细胞，制成细胞悬浮液。进行细胞培养：a取 A、B、C 三个洁净的锥形瓶，分别加入_。b向 A、B 两个培养瓶中分别加入等量的化学物质甲、乙，并将其摇匀；C 瓶加等量生理盐水，作为对照。c把 3个培养瓶放在 37 的 CO2培养箱中培养。制作临时装片。镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，寻找处于有丝分裂中期
15、的细胞，与小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片进行对比，以确认发生变异的细胞。统计_。(2)实验结果：培养瓶 A B C变异细胞数占总细胞数的百分比 1.3% 12.5% 0.1%(3)请写出实验结论：- 6 -_。解析：(1)解离组织细胞常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶。根据 b的实验步骤可以得出：a中 A、B、C 三个洁净的锥形瓶，分别加入等量的细胞悬浮液。根据实验目的可知，应统计该时期变异的细胞数占细胞总数的百分比。(3)C 组为对照组，A 与 B组变异细胞数占总细胞数的比例均比 C组高，说明甲、乙两种化学物质均有一定毒性，B 组数据比 A组的数据大说明乙的毒性比甲的毒性大。答案：(1)胰蛋白酶 a.等量的细胞悬浮液 该时期变异的细胞数占细胞总数的百分比 (3)甲、乙两种化学物质均有一定毒性，且乙的毒性比甲的毒性大
